李桃花 梁蓉 唐俊瑜 粟敏
(湖南省長沙市長沙醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 湖南長沙 410219)
水果酵素對小鼠胃腸道消化功能的影響
李桃花 梁蓉 唐俊瑜 粟敏*
(湖南省長沙市長沙醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院 湖南長沙 410219)
目的:研究水果酵素對小鼠胃腸道消化功能的影響。方法:80只小鼠隨機(jī)分為4組,分別為對照組、實(shí)驗(yàn)組1、2、3。實(shí)驗(yàn)組分別喂養(yǎng)濃度為2.5%、5%、7.5%的水果酵素,對照組喂養(yǎng)正常飼料。飼養(yǎng)28天后,作胃排空實(shí)驗(yàn)以及腸推進(jìn)功能檢測。結(jié)果:①與對照組相比較,實(shí)驗(yàn)組小鼠的腸推進(jìn)功能較強(qiáng)。②隨著水果酵素濃度的增高,小鼠的胃內(nèi)殘留率呈下降趨勢。③實(shí)驗(yàn)組小鼠紅細(xì)胞數(shù)與血小板數(shù)水平高于對照組,白細(xì)胞水平隨喂養(yǎng)水果酵素濃度的上升而呈下降趨勢,淋巴細(xì)胞則相反。④與對照組相比,實(shí)驗(yàn)組小鼠,平均體重明星減輕。結(jié)論:水果酵素對小鼠胃腸動力、腸道機(jī)械運(yùn)動功能提升均有促進(jìn)作用,且隨著水果酵素喂養(yǎng)濃度的增加,促進(jìn)作用逐漸增強(qiáng)。
水果酵素 消化功能 血?dú)夥治?/p>
水果酵素以水果為主要原材料制成,酶為其主要功能性成分。近年來,隨著對其生物功能的研究深入,對其部分功效已有了初步了解。如火龍果酵素被研究證實(shí)具有抗氧化、清除自由基的作用;人參茯苓酵素具有補(bǔ)益脾胃的功效[1]。其它類型酵素功效的研究都不盡相同,但是其對于胃腸道消化功能的研究性論證并不多見。因此,本實(shí)驗(yàn)對小鼠的胃腸道消化功能進(jìn)行了研究。
1.1 實(shí)驗(yàn)儀器
微量稱重儀、顯微鏡、pH計(jì)、注射器、量筒、卷尺、灌胃器、手術(shù)器械、血?dú)夥治鰞x
1.2 實(shí)驗(yàn)試劑
水果酵素(廣州漢草生物科技有限公司)、戊巴比妥鈉、液態(tài)蠟、松結(jié)油、甲醛溶液、蘇木精-伊紅染液試劑(北京宜科思源科技有限公司)、乙醇、亞甲藍(lán)氯化鈉、半固體糊(羧甲基纖維素納2.5g、 奶粉4g、糖2g、淀粉2g、蒸餾水65mL配成80mL糊狀物)、小鼠標(biāo)準(zhǔn)飼料
1.3 實(shí)驗(yàn)動物
昆明系小鼠,由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司提供,動物許可證號:scxk(湘)2014-011。
表1 實(shí)驗(yàn)組和正常對照組血常規(guī)分析
表2 小鼠小腸亞甲藍(lán)顯色部位距回盲瓣距離比較
表3小鼠胃全重胃凈重及胃內(nèi)殘留率
2.1 實(shí)驗(yàn)小鼠分組
選取體重相近健康小鼠80只,分4組,分別為實(shí)驗(yàn)組1、2、3和對照組,每組20只。對照組用普通鼠飼料喂養(yǎng),實(shí)驗(yàn)組1、2、3小鼠分別用1mL 2.5%、5%、7.5%的酵素灌胃,每天1次。
2.2 酵素對小鼠體重的影響及血?dú)夥治?/p>
飼養(yǎng)4周后各組小鼠稱重,記錄數(shù)值。同時隨機(jī)抽取每組小鼠各5只斷尾采血,用血?dú)夥治鰞x作血?dú)夥治觥?/p>
2.3酵素對小鼠小腸推進(jìn)功能的影響
飼養(yǎng)4周后,隨機(jī)抽取每組小鼠各5只,以10%亞甲藍(lán)氯化鈉灌胃,0.5ml每只。40min后,剖腹取出全部胃腸,自幽門括約肌切除胃,將實(shí)驗(yàn)組與空白組亞甲藍(lán)顯色部位距小鼠腸道回盲瓣的距離進(jìn)行比較,以檢測小鼠腸推進(jìn)功能[2]。
2.4 酵素對小鼠胃排空功能的影響
飼養(yǎng)4周后,隨機(jī)抽取每組小鼠各5只,灌營養(yǎng)性半固體糊[3],0. 8g/只,30min后剖腹取出全部胃腸,自幽門括約肌取胃。測得胃全重、胃凈重[4],計(jì)算出胃內(nèi)殘留率,以檢測其胃排空功能。
胃內(nèi)殘留率=[(胃全重-胃凈重)/營養(yǎng)性半固體糊重]×100%
2.5 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析
將實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)整理成計(jì)數(shù)資料后,采用均數(shù)加減標(biāo)準(zhǔn)差±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,用SPSS17.0處理數(shù)據(jù),兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,p<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3.1 對小鼠血常規(guī)的影響
每周將各組小鼠稱重,記錄數(shù)值。對比發(fā)現(xiàn),實(shí)驗(yàn)組小鼠整體體重水平較對照組小鼠體重水平低。且其體重水平下降程度與喂養(yǎng)水果酵素濃度呈正相關(guān),既實(shí)驗(yàn)組3小鼠體重水平較實(shí)驗(yàn)組1、2小鼠體重水平低。同時每周隨機(jī)抽取各組小鼠2只采血作血?dú)夥治?取隨機(jī)抽取的小鼠血?dú)夥治鲋瞥杀?。
3.2 對小鼠小腸的影響
3個實(shí)驗(yàn)組小鼠的小腸全長均大于對照組小鼠小腸全長,且有顯著差異;而就顯色部位至回盲瓣距離來看,5%酵素、7%酵素喂養(yǎng)組小鼠與對照組相比有極顯著差異。
3.3 對小鼠胃的影響
5%酵素、7%酵素喂養(yǎng)組小鼠的胃內(nèi)殘留率明顯低于對照組小鼠,與對照組相比有顯著差異。
健康的胃腸動力需由健全的胃腸生理免疫環(huán)境來維持[5]。當(dāng)生理環(huán)境發(fā)生改變時,胃腸運(yùn)動功能就會紊亂[6]。本實(shí)驗(yàn)用不同的濃度的水果酵素對小白鼠進(jìn)行喂養(yǎng),相比對照組,實(shí)驗(yàn)組小鼠的胃排空能力與腸推進(jìn)功能較強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)2組小鼠腸推進(jìn)功能與水果酵素濃度呈顯著負(fù)相關(guān)。比較實(shí)驗(yàn)組與對照組小鼠的血象指標(biāo)顯示:實(shí)驗(yàn)組小鼠白細(xì)胞總數(shù)較對照組而言,總體增高。上述實(shí)驗(yàn)說明,其對益生菌群有滋養(yǎng)作用。實(shí)驗(yàn)組小鼠后期出現(xiàn)排便量增多以及排便性質(zhì)的改變。體重記錄表明,飼養(yǎng)后期,實(shí)驗(yàn)組小鼠的體重較正常組減輕。以白細(xì)胞水平增高為體現(xiàn)的腸道炎癥反應(yīng),可能與小鼠排便質(zhì)與量的變化以及體重的下降有關(guān)。水果酵素對腸道益生菌群有滋養(yǎng)作用,相對的,也可能使這個微環(huán)境原有的“和諧”狀態(tài)破壞,從而介導(dǎo)了炎癥的發(fā)生。另外,實(shí)驗(yàn)組小鼠的血小板明顯增高,據(jù)查,炎癥可引起血液中,血小板總的數(shù)目升高。水果酵素引起腸道pH值下降對小鼠腸道益生菌群的滋養(yǎng)作用,以及后者改善小鼠腸推進(jìn)以及胃排空功能。同時,小鼠以白細(xì)胞水平升高為表現(xiàn)的炎癥反應(yīng)、其導(dǎo)致的排便質(zhì)與量的變化,以及炎癥反應(yīng)引起的血小板升高。說明水果酵素對小鼠胃腸功能作用并不是單方面,至于其具體影響還有待于進(jìn)一步研究。
[1]蔡爽.人參術(shù)苓酵素的制備及改善腸胃功能研究[D].吉林:吉林大學(xué),2013.
[2]唐洪梅,何嘉侖,廖小紅,李得堂,閆雪;腸激安提取物對大鼠小腸吸收功能及小鼠腸推進(jìn)運(yùn)動的實(shí)驗(yàn)研究[A]; 2010年廣東省藥師周大會論文集 [C];2011.
[3]蔡揚(yáng).黃連吳.茱萸配伍對實(shí)驗(yàn)性功能性消化不良大鼠胃排空及胃腸激素的影響[D].成都中醫(yī)藥大學(xué),2013.
[4]郁保生,張國山,石曉理,晏桂華.小柴胡湯對功能性消化不良大鼠血管活性腸肽、胃排空及小腸推進(jìn)率的影響[J].中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志. 2013.251-254.
[5]李曉芳.小鼠腸道菌群失衡模型的建立及菌群失衡對腸道機(jī)械屏障的影響[D].大連醫(yī)科大學(xué),2009.
[6]劉起勝,劉懷,譚周進(jìn)等.菌群失調(diào)腹瀉抗生素造模對小鼠腸黏膜的影響[J].中國微生態(tài)學(xué)雜志 2015 27(5):501-504,512.
Q891
A
1674-2060(2016)03-0010-02
長沙醫(yī)學(xué)院大學(xué)生研究性學(xué)習(xí)與創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(長醫(yī)教[2014]10號-57)。
通訊作者:粟敏(1983—),女,土家族,湖南沅陵人,碩士,講師,研究方向:天然產(chǎn)物開發(fā)與利用。