規(guī)模豬場傳染性萎縮性鼻炎的防控措施

規(guī)模豬場傳染性萎縮性鼻炎的防控措施

劉漢中
（江蘇省鹽城市亭湖區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督所，江蘇鹽城 224001）

從亭湖區(qū)一自繁自養(yǎng)大型養(yǎng)豬場病豬分離到的支氣管敗血波氏桿菌（Bb）和巴氏桿菌（Pm），通過藥物敏感性試驗，篩選出敏感藥物。并選取本場菌株作為菌種，制成本場I相支氣管敗血波氏桿菌-巴氏桿菌二聯(lián)滅活苗。以二聯(lián)滅活苗分別免疫母豬和仔豬，對個別發(fā)病仔豬以敏感藥物進(jìn)行治療，同時，加強(qiáng)環(huán)境條件控制，改善飼養(yǎng)管理，有效控制了該豬場傳染性萎縮性鼻炎。

支氣管敗血波氏桿菌巴氏桿菌藥敏試驗滅活苗綜合防治

近年來，亭湖區(qū)一豬場持續(xù)發(fā)生豬傳染性萎縮性鼻炎，主要表現(xiàn)：6～8周齡豬出現(xiàn)鼻炎癥狀，打噴嚏，鼻孔流出少量清亮或黏性鼻液，有些病豬發(fā)生不同程度血性鼻漏。有的病豬出現(xiàn)眼結(jié)膜炎，淚液分泌增多，眼角經(jīng)常流淚，在內(nèi)眼角下方皮膚上形成半月形濕潤區(qū)，黏附塵土后而變黃，形成灰或黑色斑塊，稱為淚斑。甚至有的豬出現(xiàn)面部變形或歪斜，豬鼻變短，向上翹起，鼻背皮膚粗厚出現(xiàn)較深的皺紋、下頜伸長，上下門齒錯開，不能正常咬合。常導(dǎo)致機(jī)體代謝障礙，生長發(fā)育遲緩，飼料報酬降低，并發(fā)肺炎。該豬場也曾用疫苗預(yù)防和藥物治療豬傳染性萎縮性鼻炎，但效果不佳，給豬場帶來嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。為此，從該豬場離出支氣管敗血波氏桿菌和多殺性巴氏桿菌制成蜂膠苗用于該豬場，并對個別發(fā)病仔豬以敏感藥物進(jìn)行治療，同時加強(qiáng)環(huán)境條件控制，改善飼養(yǎng)管理，有效控制了該豬場傳染性萎縮性鼻炎?，F(xiàn)將試驗結(jié)果報告如下。

1　材料和方法

1.1病料來源

從亭湖區(qū)豬場中選取典型傳染性萎縮性鼻炎病豬，用酒精棉球徹底消毒鼻鏡后，將棉拭子（棉拭子為150 mmxO.8：aln的竹簽，頂端纏以脫脂棉，在腦心浸液充分浸濕后高壓滅菌，一周內(nèi)使用）插入鼻腔至第一臼齒處，采取鼻腔內(nèi)分泌物，共采取10頭份樣本，并迅速送至實(shí)驗室進(jìn)行細(xì)菌的分離和鑒定。

1.2試驗試劑

血清肉湯培養(yǎng)基（MH）、鮮血培養(yǎng)基、馬鈴薯培養(yǎng)基和生化試劑均按常規(guī)方法制備。

1.3試驗動物

試驗動物為體重20 g左右的小白鼠和成年家兔，由鹽城市獸醫(yī)院獸醫(yī)實(shí)驗室提供，健康妊娠母豬由病料來源豬場提供。

1.4受試藥物

氨芐西林、頭孢曲松鈉、頭孢噻呋、鏈霉素、慶大霉素、丁胺卡那霉素、新霉素、土霉素、紅霉素、林可霉素、磺胺六甲氧嘧啶、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、呋喃唑酮、呋喃妥因15種藥物均由恰威斯生物技術(shù)有限公司提供。

1.5滅活苗的制備、檢驗及應(yīng)用試驗

1.5.1擴(kuò)菌

用接種環(huán)鉤取適量Bb菌株，劃線于馬鈴薯瓊脂平板表面，37℃培養(yǎng)20～22 h，以滅菌生理鹽水洗下菌落作為種子，再均勻涂布于馬鈴薯瓊脂平板表面，37℃培養(yǎng)20～22 h，以滅菌生理鹽水洗下菌落，置于滅菌瓶中，用麥?zhǔn)媳葷峁軠y定其含菌數(shù)。

用接種環(huán)鉤取適量Pm菌株，劃線于7%鮮血瓊脂平板表面，37℃培養(yǎng)20～22 h，以滅菌生理鹽水洗下菌落作為種子，再均勻涂布于7%鮮血瓊脂平板表面，37℃培養(yǎng)20～22 h，以滅菌生理鹽水洗下菌落，置于滅菌瓶中，用麥?zhǔn)媳葷峁軠y定其含菌數(shù)。

1.5.2滅活

分別取Bb、：Pm的菌株培養(yǎng)液混合，以滅菌生理鹽水稀釋至含每種細(xì)菌數(shù)均為100億/m l。加入福爾馬林使其在菌液中的最終濃度為0.4%，37℃滅活48 h，其間不斷搖動。滅活后的菌液緩緩加入到一定量的蜂膠中，加的過程中不斷用玻璃棒攪拌，最后加入柳硫汞鈉使最終濃度為0.01%，混勻、檢驗、分裝。

1.5.3性狀和無菌檢驗

肉眼直接觀察滅活苗性狀；混勻并取適量滅活苗，均勻涂布于鮮血瓊脂平板上，37℃培養(yǎng)3 d后觀察。

1.5.4安全性檢查

取10只小白鼠，分別皮下注射菌苗0.1 m l，觀察1周內(nèi)生長狀況；取10只家兔，皮下注射滅活苗2 m l/只，觀察2 d，期間每4 h 測1次體溫；妊娠母豬10頭，產(chǎn)前15 d左右，肌肉注射5 ml/頭，觀察。

1.5.5應(yīng)用試驗

選擇健康的妊娠母豬，隨機(jī)分為3組。第一組本場滅活苗免疫，產(chǎn)前15d肌肉注射，3mml/頭；所產(chǎn)仔豬在7～10日齡、25～28日齡各接種一次，每次1m l，肌肉注射。第二組用市售蜂膠苗進(jìn)行免疫作對照。第三組不免疫作為對照。每天觀察試驗?zāi)肛i所產(chǎn)仔，記錄仔豬傳染性萎縮性鼻炎發(fā)生情況和仔豬發(fā)育情況，綜合判定滅活苗的免疫效果。

2　結(jié)果

2.1病原分離培養(yǎng)、純化和鑒定

2.1.1分離培養(yǎng)及染色鏡檢

從10頭份的鼻腔棉拭子中均分離出波氏桿菌和巴氏桿菌。對分離菌株的形態(tài)與培養(yǎng)特性進(jìn)行鑒定。均分別符合Bb和Pm的特征。

2.1.2生化鑒定

分離的Bb均有溶血現(xiàn)象，同時過氧化氫酶，氧化酶，尿素酶，檸檬酸酶，6%、7.5%、9%氯化鈉試驗和石蕊牛乳試驗均為陽性；阿拉伯糖、果糖、半乳糖、葡糖糖、麥芽糖、甘露醇、蔗糖、木糖試驗和亞硝酸鉀試驗均為陰性。

分離的Pm經(jīng)過氧化氫酶、氧化酶、尿素酶、吲垛、硫化氫試驗，硝酸鹽還原試驗，葡萄糖、半乳糖、蔗糖、山梨醇試驗均為陽性。麥康凱培養(yǎng)基生長性、運(yùn)動性、溶血性為陰性，M-R、V-P反應(yīng)，明膠液化試驗，乳糖、棉子糖試驗為陰性。

2.2滅活苗的檢驗及應(yīng)用試驗

2.2.1無菌試驗

滅活苗靜置后分層，上層這淡黃色澄清液體，下層為深黃色沉淀物，振混勻呈均一渾濁液；培養(yǎng)基上無任何細(xì)菌生長。

2.2.2安全性檢查

20只小白鼠7d內(nèi)均健活；10只家兔均沒有體溫升高；產(chǎn)前15d妊娠母豬注射7d后，未出現(xiàn)異常反應(yīng)，胎兒、新生仔豬均正常。

2.2.3應(yīng)用試驗

用本場滅活苗和市售滅活苗分別免疫妊娠母豬及其所產(chǎn)的仔豬，觀察其仔豬在生長過程中的保護(hù)情況，見表1。

表1　原場滅活苗免疫效果

從表1可以看出，本場苗組、市售苗組和對照組傳染性萎縮性鼻炎的發(fā)生率分別為1.94%、17.59%和25.45%，表明本場苗對豬傳染性萎縮性鼻炎有好的預(yù)防效果。

2.3藥敏試驗

Bb藥敏試驗：15種抗生素中對頭孢曲松鈉、頭孢噻呋、氨芐西林、鏈霉素高度敏感；對環(huán)丙沙星、恩諾沙星、丁胺卡那霉素、慶大霉素、土霉素、林可霉素、新霉素中度敏感；對磺胺六甲氧嘧啶、紅霉素、呋喃唑酮、呋喃妥因耐藥。

Pm藥敏試驗：15種抗生素中對頭孢曲松鈉、鏈霉素、磺胺六甲氧嘧啶高度敏感；對頭孢噻呋、慶大霉素、氨芐西林、丁胺卡那霉素、環(huán)丙沙星、恩諾沙星、呋喃唑酮、呋喃妥因、紅霉素中度敏感；對土霉素、林可霉素、新霉素耐藥。

2.4治療結(jié)果

對39頭患病仔豬，按照本文方案采用高敏藥物治療，無死亡，淘汰5頭，其余的全部康復(fù)，治愈率為87.18%。

3　小結(jié)與討論

單獨(dú)妊娠母豬免疫接種，免疫母豬的初乳中抗體效價可達(dá)17log：以上，通過初乳抗體被動保護(hù)仔豬。免疫母豬所產(chǎn)仔豬，在生后（吃初乳）4 h即可在鼻腔中出現(xiàn)被動抗體，對鼻腔感染的局部保護(hù)力維持約2周。但被動保護(hù)力持續(xù)時間很短。仔豬免疫接種，學(xué)者認(rèn)為這種方法無效，這可能是由于污染群中母豬的初乳中有一定水平的抗體。對仔豬早期疫苗注射的免疫應(yīng)答有一定的干擾作用。因此日本北里研究建議給免疫母豬所產(chǎn)的仔豬在5周齡第1次注苗，1 周后注射第二次。而本試驗采用母仔結(jié)合免疫取得良好的效果，一方面與蜂膠佐劑有關(guān)，蜂膠不僅對母源抗體的干擾作用不敏感，而且還能全面啟動機(jī)體的免疫防衛(wèi)系統(tǒng)，刺激機(jī)體細(xì)胞免疫、體液免疫、紅細(xì)胞免疫系統(tǒng)和巨噬細(xì)胞，補(bǔ)體系統(tǒng)都能產(chǎn)生免疫應(yīng)答；另一方面可能與蜂膠苗的抗原劑量有關(guān)，其免疫機(jī)理還有待進(jìn)一步研究。

造成本病病原產(chǎn)生耐藥的主要原因是養(yǎng)豬生產(chǎn)上濫用抗菌藥物。在一些中小豬場，尤其是一些農(nóng)戶，不問病因，只要發(fā)燒就用青霉素，鏈霉素，土霉素，四環(huán)素，慶大霉素等抗生素，甚至長期在飼料中添加抗菌藥物，使原來的極少數(shù)耐藥菌株得到大量生長繁殖和傳播。所以在使用藥物預(yù)防和治療該病時應(yīng)先做藥敏試驗，以藥敏試驗結(jié)果為依據(jù)，切勿盲目用藥。

疫苗的免疫效果在一定程度上還與衛(wèi)生管理部門有關(guān)，在實(shí)際生產(chǎn)中，應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，有效降低空氣中病原體、塵埃和有害氣體濃度；改善豬舍環(huán)境條件、降低飼養(yǎng)密度；保證通風(fēng)干燥，減少各種應(yīng)激；最好實(shí)行全進(jìn)全出的管理體制，豬舍內(nèi)豬欄最好采用實(shí)墻隔開，以防接觸傳播；在北方冬季應(yīng)注意防寒保暖的同時，更應(yīng)做好通風(fēng)換氣和降濕工作。

[1]李國江，鄭偉，劉彪，等.規(guī)?；i場傳染性萎縮性鼻炎病原學(xué)調(diào)查與分析[J］.中國畜牧獸醫(yī)，2012，39（11）：184-186.

[2]李中興.豬傳染性萎縮性鼻炎的診斷及防治[J］.北方牧業(yè)，2010，31（1）：17.