徐 偉,陳亞妮,何珊珊,關 然,蘇小艷,胡松華
(浙江大學動物科學學院,浙江 杭州 310058)
奶牛急性大腸桿菌性乳房炎病例
徐偉,陳亞妮,何珊珊,關然,蘇小艷,胡松華
(浙江大學動物科學學院,浙江 杭州 310058)
奶牛發(fā)生臨床型乳房炎時通??梢娙榉烤植考t、腫、熱、痛,奶產量下降,但鮮見病牛死亡。筆者遇到卻因大腸桿菌性乳房炎導致奶牛死亡的病例,報告如下。
浙江某郊區(qū)奶牛場有荷斯坦泌乳奶牛1 300余頭。2016年2月15日,該場105牛舍109 097號奶牛突然發(fā)病,臨床癥狀表現(xiàn)為乳房紅腫、堅硬,乳汁稀薄,初期呈清水樣,后期變?yōu)檠獦?,日產奶量由發(fā)病前的40公斤迅速下降,同時伴有呼吸和心率加快,眼角膜充血,眼圈下凹,體溫升高至41.5℃,精神委靡,食欲廢絕,急劇消瘦。該牛于2009年9月17日出生,發(fā)病時已生產5胎,最近一次產犢時間為2015年11月2日。病牛先后用以下方法治療:(1)青霉素1 600萬IU,鏈霉素1 000萬μg,靜脈注射,1日兩次;青霉素320萬IU,鏈霉素200萬μg,乳房灌注,1日兩次。該方法連續(xù)治療3 d后未見好轉;(2)四環(huán)素6 g,靜脈注射,1日兩次;鹽酸林可霉素20 mL(1.2 g),氨芐西林鈉2 g,乳房灌注,1日兩次。連續(xù)治療3 d后病牛體溫開始下降,但其他癥狀未見好轉;(3)紅霉素3 g,靜脈注射,1日兩次;鹽酸林可霉素20 mL(1.2 g),氨芐西林鈉2 g,乳房灌注,1日兩次。病牛連續(xù)治療3 d未見好轉,反而出現(xiàn)起臥困難,呻吟,乳房皮膚顏色變深等癥狀。2016年2月24日上午,病牛因醫(yī)治無效而死亡。尸體剖檢發(fā)現(xiàn)乳房有大量血水和化膿病灶。無菌采集乳房組織病料和病奶進行細菌學檢驗。
按照下列方法進行細菌學檢查:(1)將病奶或乳腺組織病料接種于血瓊脂,置37℃溫箱培養(yǎng)24~48 h;(2)觀察菌落形態(tài)特征,挑取典型單個菌落接種于普通肉湯進行增菌培養(yǎng),37℃振蕩培養(yǎng)24 h,革蘭染色、鏡檢,判定細菌為革蘭陽性或革蘭陰性,球菌或桿菌;(3)將肉湯培養(yǎng)物劃線接種于營養(yǎng)瓊脂,37℃培養(yǎng)過夜,進行生化鑒定。首先對革蘭陽性球菌進行觸酶試驗確定該菌為葡萄球菌或鏈球菌。結合鏡檢結果且觸酶陽性的判定為葡萄球菌,觸酶陰性的判定為鏈球菌。利用血漿凝固酶試驗將葡萄球菌進一步鑒定區(qū)分為金黃色葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌(CNS)。利用CAMP、七葉苷水解、馬尿酸鈉水解、美藍牛乳還原等試驗將鏈球菌進一步鑒定區(qū)分為無乳鏈球菌、停乳鏈球菌或乳房鏈球菌。對革蘭陰性桿菌,接種于營養(yǎng)瓊脂、麥康凱瓊脂及伊紅美藍瓊脂,37℃培養(yǎng)過夜,觀察細菌生長狀態(tài),并按常規(guī)方法進行相關生化鑒定。
用Kirby-Bauer瓊脂擴散法對分離菌進行藥敏試驗,包括以下15種藥物:氨芐西林、丁胺卡那霉素、林可霉素、多西環(huán)素、阿莫西林、恩諾沙星、氟苯尼考、慶大霉素、妥布霉素、頭孢曲松、阿奇霉素、青霉素、四環(huán)素、紅霉素、多黏菌素B。37℃培養(yǎng)24 h后用游標卡尺測量瓊脂表面抑菌圈直徑,并根據不同抗菌藥物藥敏紙片的判定標準判定為高敏、中敏或耐藥。
細菌培養(yǎng)結果表明,血瓊脂上呈圓形菌落、光滑、濕潤、無明顯溶血;革蘭測陰性桿菌;麥康凱瓊脂上菌落呈粉紅色;伊紅美藍瓊脂上菌落呈黑色、有金屬光澤。生化鑒定結果如表1。因此,判定為大腸桿菌(E.coli),病奶和組織病料中均檢出同樣細菌。
表1 生化試驗結果
藥敏試驗結果見表2。本研究分離菌對氨芐西林、林可霉素、多西環(huán)素、阿莫西林、氟苯尼考、青霉素、四環(huán)素、紅霉素等表現(xiàn)為不敏感;對丁胺卡那霉素、恩諾沙星、慶大霉素、妥布霉素、頭孢曲松、阿奇霉素等表現(xiàn)為敏感。
表2 藥敏試驗結果
根據發(fā)病奶牛的臨床癥狀以及細菌學分離鑒定結果,該病例診斷為大腸桿菌引起的急性乳房炎。大腸桿菌是一種環(huán)境性致病菌,該病原侵入乳腺后可在短時間內大量繁殖,釋放出內毒素(endotoxin),進入血液引起毒血癥(toxemia)。由于毒素作用,病牛在臨床上出現(xiàn)體溫升高,食欲不振,呼吸和心率加快等全身癥狀。該病多發(fā)于產后高產奶牛,病情嚴重可導致病牛死亡。奶牛發(fā)病后,使用了青霉素、四環(huán)素、林可霉素、氨芐西林鈉和紅霉素等藥物治療。從表2可知,病牛分離菌對這些藥物均不敏感。由于治療無效,奶牛發(fā)病后第9天死亡。根據大腸桿菌性乳房炎的發(fā)病機理,在治療上除了使用敏感抗菌藥物消滅病原外,還應針對內毒素產生的毒血癥盡早進行大劑量靜脈輸液,必要時使用皮質激素和抗前列腺素藥物緩解全身癥狀。
胡松華,E-mail:songhua@zju.edu.cn