液相色譜—質(zhì)譜法在非法添加化學(xué)藥物檢測(cè)中的應(yīng)用探究

張祥瑞?李青松?葉明真

摘 要：非法添加化學(xué)藥物對(duì)于人的健康有極大的危害，對(duì)于傳統(tǒng)的添加藥物的鑒別一般采用的方法是化學(xué)鑒別方法、薄層色譜法，但是由于以上兩種方法具有比較強(qiáng)的主觀性，分辨率低，專屬性差，很難做出準(zhǔn)確的判斷。隨著檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，在對(duì)藥物的非法添加物的研究中使用液相色譜-質(zhì)譜法取得了比較客觀的檢查結(jié)果，并且液相色譜-質(zhì)譜法得出的檢測(cè)結(jié)果具有快速、客觀、準(zhǔn)確等特點(diǎn)。

關(guān)鍵詞：液相色譜-質(zhì)譜法；化學(xué)藥物；非法添加

隨著我國(guó)醫(yī)藥市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)的愈加激烈，在藥物中摻加其他化學(xué)成分已經(jīng)成為一種新的非法制藥手段，藥物的作用是讓患者的身體恢復(fù)健康，但是有部分商販為了牟取非法的利益，在藥物的生產(chǎn)過程中摻入一些其他成分，這樣對(duì)于藥物的質(zhì)量不僅有大大的影響，而且對(duì)藥物的安全性也產(chǎn)生一定的影響，這一現(xiàn)象已經(jīng)引起了食品藥品監(jiān)督管理局的高度重視，其力推使用液相色譜-質(zhì)譜法對(duì)藥物中的成分進(jìn)行檢測(cè)。

液相色譜-質(zhì)譜法具有液相色譜的高的分辨率、質(zhì)譜的專屬性和高靈敏性等特點(diǎn)，并且藥品用量少、分析速度快，在中藥、西藥的檢測(cè)中都有很廣的應(yīng)用范圍。由于一般藥物都是由多種藥物組合而成，使用液相色譜-質(zhì)譜法不需要人工對(duì)混合物質(zhì)進(jìn)行分離就能夠?qū)⒂行С煞趾透蓴_成分進(jìn)行完全色譜分離，這樣就能夠?qū)Ψ欠ㄌ砑拥幕瘜W(xué)藥物的結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析和檢測(cè)。

1 液相色譜-質(zhì)譜法的原理和應(yīng)用

液相色譜-質(zhì)譜法是對(duì)摻入化學(xué)藥品的高效分析方法之一。由于使用液相色譜-質(zhì)譜法不需要將待測(cè)物質(zhì)和干擾組分進(jìn)行完全色譜分離，通過對(duì)質(zhì)核比進(jìn)行篩選就能夠得到單一的色譜圖，還可以進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜分析，這對(duì)結(jié)果的進(jìn)一步確證有很大的幫助作用。并且，在進(jìn)行常規(guī)的高效液相色譜法檢測(cè)時(shí)，需要有相應(yīng)的對(duì)照品，若是缺少對(duì)照品，就很難進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。而使用液相色譜-質(zhì)譜法，通過實(shí)驗(yàn)得到的質(zhì)譜信息就能夠通過質(zhì)核比對(duì)各組分的離子峰進(jìn)行推斷，從而推斷其分子量，將得到的分子量的信息和相關(guān)資料進(jìn)行比較，從中得到具有幫助意義的信息。在事實(shí)上，色譜質(zhì)譜的在線聯(lián)用方法主要作為高效液相色譜的檢測(cè)器。將液相色譜-質(zhì)譜法聯(lián)合起來，對(duì)復(fù)雜混合物進(jìn)行準(zhǔn)確地定性分析，這樣不僅簡(jiǎn)化了樣品的前處理過程，也使得樣品的分析過程更加簡(jiǎn)便。

2 具體藥物的應(yīng)用

（一）止咳平喘類藥物制劑的檢查

劉起中等人通過使用XTerra柱（2.1mm×150mm），其柱的孔隙度為5μm，使用甲醇—醋酸銨（10mmol/L）為流動(dòng)相對(duì)該色譜柱進(jìn)行沖洗，并采用梯度洗脫的方法進(jìn)行洗脫。通過實(shí)驗(yàn)得到的保留時(shí)間、相對(duì)分子質(zhì)量和二級(jí)質(zhì)譜信息與對(duì)照品進(jìn)行比較，能夠檢測(cè)到醋酸氫化可的松、沙丁胺醇、茶堿、醋酸潑尼松等主要的化學(xué)物質(zhì)，但是車保全、張喆等人通過液相色譜-質(zhì)譜法檢查出部分藥物中含有糖皮質(zhì)激素，將提出后的樣品溶液采用DiamondC18柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相為水—四氫呋喃以100：1的體積比和乙腈—水—四氫呋喃以80：20：1的體積比進(jìn)行梯度洗脫，通過實(shí)驗(yàn)得到的保留時(shí)間、相對(duì)分子質(zhì)量和二級(jí)質(zhì)譜信息與對(duì)照品進(jìn)行比較，從而做出定性。應(yīng)用該方法，在供試品的溶液中檢查出了醋酸潑尼龍）等多種糖皮質(zhì)激素。

（二）降糖類制劑的檢查

鐘大放、董宇等人采用液相色譜—離子阱質(zhì)譜法的聯(lián)用方法，選用DiamondC18柱進(jìn)行分離，流動(dòng)相選用乙腈—水—甲酸（60：40：0.1）的混合物，對(duì)藥物制劑進(jìn)行提取，然后通過液相色譜—離子阱質(zhì)譜法進(jìn)行研究和分析。將得出的結(jié)果與對(duì)照品的色譜和質(zhì)譜進(jìn)行比較，然后對(duì)檢測(cè)藥物中的非法摻入的降糖藥進(jìn)行定性鑒別，接受檢查的四類藥物中，有兩種藥物被檢測(cè)出摻有格列本脲和苯乙雙胍，有一種藥物被檢測(cè)出含有格列本脲。

（三）抗風(fēng)濕類藥物的檢查

謝元超、劉艷福等人通過使用AgilentC18柱（150mm×4.6mm），其柱的孔隙度為5μm，實(shí)驗(yàn)使用0.02mmol/L醋酸銨—1%醋酸溶液—甲醇以（32：3：65）為流動(dòng)相，將流速確定為0.4mL/min，分離柱的溫度為30℃。在實(shí)驗(yàn)過程中采用電噴霧離子化檢測(cè)器，核質(zhì)比范圍為100—400amu，干燥器的溫度為350℃，氣流的流速為10L/min，氣壓為276KPa。以上的實(shí)驗(yàn)條件能夠?qū)ΡＡ魰r(shí)間、一級(jí)和二級(jí)質(zhì)譜碎片等信息進(jìn)行檢查，從而能夠確定出被檢測(cè)的藥物中是否含有非法添加物。在對(duì)6批抗風(fēng)濕類藥物的檢測(cè)過程中，發(fā)現(xiàn)3批藥物有萘普生，2批具有吲哚美辛。

（四）降壓類藥物制劑的檢查

車保全、張喆等人采用Waters Sunfire C18色譜柱進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，采用流動(dòng)相20mmol/L醋酸銨溶液和甲醇—乙腈（2：1）為兩種不同的流動(dòng)相，實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm、流速保持在1mL/min。通過正負(fù)離子全掃描的方式對(duì)降壓藥物進(jìn)行檢測(cè)，并通過相關(guān)文獻(xiàn)對(duì)上述降壓藥物的質(zhì)譜破裂規(guī)律進(jìn)行研究，比較對(duì)照物的色譜峰和樣品的色譜峰的一級(jí)、二級(jí)質(zhì)譜的質(zhì)核比進(jìn)行比較，從而確定樣品中摻雜的化學(xué)藥物。

（五）減肥類藥物的檢查

黃曉君、張喆采用Utimates XB—C18色譜柱進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以0.1%醋酸—20mmol/L醋酸銨溶液和甲醇為流動(dòng)相，采用梯度洗脫的方式，流速為1mL/min，通過正負(fù)離子全掃描的方式對(duì)臨床10種減肥藥進(jìn)行檢測(cè)，比較對(duì)照物的色譜峰和樣品的色譜峰的一級(jí)、二級(jí)質(zhì)譜的質(zhì)核比進(jìn)行比較，從而確定樣品中摻雜的化學(xué)藥物。

3 結(jié)束語

藥物的種類繁多，成分復(fù)雜，在對(duì)藥物本身質(zhì)量的確定和控制上就存在比較高的難度，并且由于部分商販存在制假行為，在對(duì)藥物的質(zhì)量檢測(cè)中的難度就會(huì)加大。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，檢測(cè)技術(shù)向著更加科學(xué)化、靈敏度和準(zhǔn)確性提高的方向發(fā)展，藥學(xué)和化學(xué)工作者在傳統(tǒng)分析的基礎(chǔ)之上，對(duì)現(xiàn)代分析技術(shù)進(jìn)行不斷研究，對(duì)儀器的檢測(cè)度的要求也不斷上升，隨著液相色譜-質(zhì)譜法的應(yīng)用和普及，使得在對(duì)藥物的檢測(cè)過程中，能夠得出更加準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，并且鑒別方法更加快速、廉價(jià)和簡(jiǎn)便，具有非常高的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

參考文獻(xiàn)

[1]董宇，孔璋，鐘大放.液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)中藥降糖制劑中非法摻入的苯乙雙胍和格列本脲.《沈陽藥科大學(xué)學(xué)報(bào)》.2005年1期

[2]鐘大放，顧景凱，初大豐.新型抗炎鎮(zhèn)痛劑SFZ-47及其代謝物的電噴霧離子阱質(zhì)譜研究.《高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào)》.2002年2期

[3]朱青霞，曹永兵，曹穎瑛.TLC-SERS法快速檢測(cè)降壓類中藥中非法添加的四種化學(xué)成分.《光譜學(xué)與光譜分析》.2014年4期

[4]劉蕓，丁濤，廖雪晴.高效液相色譜-四極桿/靜電場(chǎng)軌道阱高分辨率質(zhì)譜法快速篩查中成藥和保健食品中非法添加的42種化學(xué)藥物.《分析化學(xué)》.2016年3期