董 偉 徐 福史紅斐

（浙江中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院·310053）

平衡法針刺對于黃褐斑豚鼠皮膚MCI的研究

董 偉 徐 福*史紅斐**

（浙江中醫(yī)藥大學(xué)第一臨床醫(yī)學(xué)院·310053）

目的：探討陰陽平衡針刺治療黃褐斑的機(jī)理。方法：檢測陰陽平衡針刺方法對于色素沉著的抑制作用。采取紫外線照射棕背豚鼠造“黃褐斑”模型，測定皮膚黑色素水平，比較造模前后及治療前后的變化。結(jié)果：陰陽平衡針法能顯著抑制色素沉著，降低黃褐斑皮膚中黑色素指數(shù)（melanin content index，MCI），P<0.01，具有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論：陰陽平衡針法能抑制色素沉著，降低黑色素指數(shù)，對黃褐斑治療作用顯著。

平衡法針刺 黃褐斑 黑色素指數(shù) 實驗研究

黃褐斑中醫(yī)稱為黧黑斑、肝斑，是一種獲得性色素沉著性皮膚病?；颊呔植繜o自覺癥狀，是臨床上常見且難以治愈的皮膚病之一，其發(fā)病率有逐年增加的趨勢。本病多發(fā)于中青年女性，對其心理健康造成巨大的影響[1]。目前臨床上多以藥物及物理治療為主，但一般的藥物副作用較大，物理治療也相應(yīng)的留有深層的色素沉著，效果不理想。近年來針灸對于黃褐斑的臨床應(yīng)用越來越多，平衡法針刺在臨床應(yīng)用上有良好的治療效果，今為探討其作用機(jī)制，進(jìn)行了實驗研究。

1 材料

1.1 儀器及試劑

儀器:MA-200型電子天平(上海第二天平制造廠)，MPA9型皮膚多功能生理測試儀（Courage Khazaka，德國）皮膚共聚焦激光掃描顯微鏡(Lucid美國，Vivascope 1500型），無菌針灸針（蘇州醫(yī)療用品廠有限公司）。

1.2 實驗動物

選取21只健康雄性棕背豚鼠，由浙江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供，普通級，體重在220～250g之間。

2 試驗方法

2.1 實驗分組

健康普通級雄性棕背豚鼠21只正常飼養(yǎng)1周，實驗前和實驗時自由飲水及攝食。采取隨機(jī)對照方法分為對照組、針刺組、空白組3組，每組7只。

2.2 動物造模

空白組未經(jīng)任何干預(yù)，正常飼養(yǎng)。對照組及針刺組豚鼠均背部去毛，露出約2.5*2.5cm的皮膚，3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉（劑量40mg/Kg）后，308nm單頻準(zhǔn)分子光療儀照射，每次照射總量為0.6J/cm2，燈管距豚鼠背部距離15～20cm，每周1次，共3次，總劑量1.8J/cm2。每日觀察豚鼠皮膚顏色變化，造模時間為21天，造模完成后，觀察皮膚色素沉著情況及黑色素指數(shù)改變。

2.3 針刺治療

造模成功1周后，針刺組豚鼠選取合谷（左）、太沖（左）、尺澤（右）、陽陵泉（右）、天樞（雙）、中脘穴位（穴位參照江蘇省中醫(yī)研究所的＜豚鼠針灸穴位圖譜的研制＞），合谷、太沖、尺澤、陽陵泉留針15分鐘，天樞、中脘淺刺不留針，局部皮膚針叩刺，以充血為度，針刺順序為合谷、太沖、尺澤、陽陵泉、天樞、中脘，針刺結(jié)束后再予局部叩刺，操作者意念貫穿針刺始終。針刺每3天1次，共4周。陽性對照組不予任何治療。

2.4 樣本的收集及指標(biāo)的檢測

黑色素指數(shù)造模前、后，治療2周、4周后用MPA9型皮膚多功能生理測試儀（Courage Khazaka，德國）檢測2組豚鼠黑色素指數(shù)，并于空白組豚鼠黑色素指數(shù)進(jìn)行對比。

2.5 統(tǒng)計學(xué)分析

所有數(shù)據(jù)采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。實驗結(jié)果進(jìn)行方差分析和T檢驗，數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，p＜0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

3 結(jié)果

皮膚生理測試造模前組間均衡性分析，P＞0.05，說明隨機(jī)分組是有均衡性。造模前MCI與造模后比較，針刺組和對照組的黑色素指數(shù)明顯升高（P＜0.01），具有非常明顯的差異，表明造模成功，空白組則無明顯差異（P＞0.05）。

表1 造模前后皮膚MCI變化表（±s）

表1 造模前后皮膚MCI變化表（±s）

注：*與造模前比較，P＜0.01；

劑量(J/cm2）造模前造模后針刺組35.8333±4.1596540.8667±3.08783*陽性對照組37.6333±3.7564245.1500±6.32985*空白組35.7667±5.7249235.7833±5.01295

經(jīng)過治療，同治療前相比，針刺組治療2周和4周時MCI均有顯著降低，經(jīng)統(tǒng)計均有非常顯著性差異（P＜0.01），對照組無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；空白組治療前后均無統(tǒng)計學(xué)差異（P＞0.05）。

表2 針刺治療前后皮膚MCI變化表（±s）

表2 針刺治療前后皮膚MCI變化表（±s）

注：△與造模后比較，P＜0.01；△與治療2周比較，p＜0.01；

劑量(J/cm2）造模后治療2周治療4周針刺組40.8667±3.0878339.0667±2.13417*34.8833±3.21585△陽性對照組45.1500±6.3298544.3500±5.9845642.6833±5.59229空白組35.7833±5.0129535.9167±6.1385435.8500±5.28119

4 討論

黃褐斑中醫(yī)又稱“黧黑斑”，是皮膚科常見的一類疾病，表現(xiàn)為色素對稱性沉著，呈蝶翅狀，輕者淡黃色或淺褐色；重者呈深褐色或淺黑色[2-3]，是色素代謝障礙性皮膚病。其發(fā)病原因很多，如紫外線、內(nèi)分泌失調(diào)、劣質(zhì)化妝品、藥物、各種炎癥性疾?。ㄖ饕獮槠つw炎癥性疾?。⑷焉锏榷际浅Ｒ娬T發(fā)色素沉著的因素。由于黃褐斑病因復(fù)雜，其發(fā)病機(jī)理現(xiàn)不甚明確，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的發(fā)展，醫(yī)療領(lǐng)域及美容保健領(lǐng)域?qū)τ邳S褐斑的治療手段也越來越多，除了常規(guī)的藥物治療外，非藥物治療也逐漸興起，其中以物理治療最多見，如美容色素激光（調(diào)紅寶石激光，調(diào)綠寶石激光，調(diào)激光等）治療、其他還有激光磨削、點陣銀激光磨削等，可作為輔助性療法，短期內(nèi)都能得到比較好的效果，但是長此以往，后遺癥也會越來越多，皮膚下色素沉著不易消除，也有高發(fā)炎癥后色素沉著的報道。

祖國醫(yī)學(xué)認(rèn)為黃褐斑是全身性疾病的一種局部反應(yīng)，與陰陽、氣血、臟腑、經(jīng)絡(luò)的失調(diào)有關(guān)?！吨T病源候論》中記載：“面黑軒者，……皆令氣血不調(diào)，致生黑軒。人或痰飲漬臟，或腆理受風(fēng)，致血氣不和……故變生黑軒”。中醫(yī)對于治療黃褐斑自成體系，主要有中藥的內(nèi)服、外敷法，針灸療法等。黃褐斑的針灸治療在祖國醫(yī)學(xué)上有很多記載，明代《醫(yī)學(xué)綱目》記載：“胃足陽明之脈……顏黑?！闵訇幹}……面如漆柴”，“面塵皆取肝膽二經(jīng)……肝足厥陰之脈……益干面塵脫色”指出治療面塵主取肝、腎、胃、膽經(jīng)腧穴。其根據(jù)辨證論治的原則，取相應(yīng)穴位進(jìn)行針刺等操作，以達(dá)到疏肝解郁、健脾益氣、滋補(bǔ)肝腎的目的，調(diào)整改善內(nèi)分泌系統(tǒng)，通過經(jīng)絡(luò)的感傳到達(dá)病所，達(dá)到臟腑陰陽氣血調(diào)和，疏通經(jīng)絡(luò)，祛斑養(yǎng)顏的目的。《四圣心源》曰：“一氣周流，土樞四象”，故選取合谷（左）、太沖（左）、尺澤（右）、陽陵泉（右），通過針刺實現(xiàn)氣血調(diào)和及機(jī)體的陰陽平衡。

本研究選用棕背豚鼠用于黃褐斑造模，誘導(dǎo)豚鼠皮膚色素沉著的實驗動物模型已被國內(nèi)外成功應(yīng)用[4-5]，本實驗采用局部雙倍最小紅斑量的紫外線多次照射棕色豚鼠的方法制作動物模型。檢測皮膚MCI變化判斷造模成功與否[6-7]，是本實驗具有統(tǒng)計意義的前提，本實驗結(jié)果顯示,造模后豚鼠皮膚MCI明顯高于空白組，呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。豚鼠造模結(jié)束后3周（即治療2周）黑色素達(dá)到頂峰，故治療2周后MCI下降不明顯，治療4周后，MCI明顯下降，本實驗用此方法針刺豚鼠黃褐斑模型取得了很好的效果，推測平衡法針刺能通過抑制黑色素細(xì)胞的增生及炎癥反應(yīng)減輕黃褐斑癥狀，促進(jìn)皮膚功能的恢復(fù)，改善皮膚形態(tài)。該方法不僅操作方便，無毒副作用，而且具有雙向調(diào)節(jié)的作用，從多方面保護(hù)受損皮膚組織，在臨床上也取得了良好的療效，應(yīng)用越來越廣泛，值得發(fā)展及推廣。

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（2016-04-11 收稿）

* 浙江省中醫(yī)院·杭州 310006

** 浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院城站院區(qū)·310006