豬繁殖與呼吸綜合征疫苗對(duì)豬血液指標(biāo)的影響

孫 雪，沈國(guó)順，趙一霏，李 帥，郭士琪，董 燁，劉麗霞

(沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110866)

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豬繁殖與呼吸綜合征疫苗對(duì)豬血液指標(biāo)的影響

孫 雪，沈國(guó)順，趙一霏，李 帥，郭士琪，董 燁，劉麗霞*

(沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng) 110866)

為確定豬繁殖與呼吸綜合征疫苗對(duì)豬血液指標(biāo)的影響，制定科學(xué)有效的疫苗免疫程序，選取42頭未免健康斷奶仔豬，隨機(jī)分為4組，對(duì)照組(A組)、弱毒苗免疫組(B組)、滅活苗免疫組(C組)和弱毒苗+滅活苗聯(lián)合免疫組(D組)。分別于免疫前、免疫后14、28、42、56、70 d以前腔靜脈采血進(jìn)行血常規(guī)分析。結(jié)果顯示，免疫后，D組白細(xì)胞數(shù)始終高于B組，并于免疫42 d后顯著高于其他3組(P<0.01)；免疫28 d后，D組淋巴細(xì)胞數(shù)顯著高于B組(P<0.01)；各組紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白濃度、中性粒細(xì)胞數(shù)及中值細(xì)胞數(shù)均呈現(xiàn)緩慢上升趨勢(shì)，且D組的高于其他3組(P>0.05)。表明同時(shí)免疫弱毒苗+滅活苗能夠更好的刺激豬血液細(xì)胞增殖。

豬繁殖與呼吸綜合征；疫苗；淋巴細(xì)胞；白細(xì)胞

豬繁殖與呼吸綜合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)由豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起，在世界范圍內(nèi)流行，不同年齡、品種和性別的豬均可感染，以妊娠母豬和1月齡以內(nèi)的仔豬最易感[1]，臨床主要引起仔豬呼吸障礙和懷孕母豬繁殖障礙，主要表現(xiàn)為流產(chǎn)、木乃伊胎和死胎[2]。該病于19世紀(jì)80年代末出現(xiàn)在美國(guó)，我國(guó)最早于1991年在臺(tái)灣出現(xiàn)該病，1996年首次報(bào)道該病，2006年暴發(fā)高致病性PRRS(HP-PRRSV)。PRRSV主要感染豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAMs)[3]，影響 PRRSV的遞呈和清除，使動(dòng)物體免疫力下降，引發(fā)免疫抑制，并誘發(fā)繼發(fā)感染，給養(yǎng)豬業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。該病免疫預(yù)防仍是最有效的途徑之一[4-5],但疫苗使用過程中也存在一定的問題，防控效果不是很理想[6]，在外源感染方面疫苗效力不夠，且PRRSV疫苗株已經(jīng)被分離，表明疫苗可能會(huì)引起豬的疾病[7]。近年來許多研究者致力于新型疫苗的開發(fā)，包括病毒重組載體疫苗、DNA疫苗和植物制備的亞單位疫苗[8-10]。本試驗(yàn)通過對(duì)不同PRRS疫苗免疫后豬血液指標(biāo)的影響進(jìn)行研究，旨在探索該病最佳的免疫程序，為PRRS的有效防控提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)用動(dòng)物與疫苗 35日齡未免疫健康斷奶仔豬42頭，由沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)科研豬場(chǎng)提供，平均體重8.87 kg。PRRS弱毒疫苗由勃林格殷格翰動(dòng)物保健(美國(guó))有限公司生產(chǎn)；高致病性PRRS滅活疫苗(NVDC-JXA1株)由杭州薦量獸用生物制品有限公司生產(chǎn)。

1.1.2 主要儀器 Uritest-3000型全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 將42頭未免疫健康斷奶仔豬隨機(jī)分為A、B、C、D 4組，A為對(duì)照組，B～D為試驗(yàn)組且各設(shè)一個(gè)重復(fù)，A組(6)肌注生理鹽水2 mL/頭份 ；B1組(6)、B2組(6)肌注PRRS弱毒疫2 mL/頭份 ；C1組(6)、C2組(6)肌注PRRS滅活疫苗2 mL/頭份 ；D1組(6)、D2組(6)肌注PRRS弱毒+PRRS滅活疫苗弱毒疫苗，1 mL/頭份+滅活疫苗1 mL/頭份 ；均為35日齡首免，首免28 d后加強(qiáng)免疫。分別于免疫前、免疫后14、28、42、56、70 d時(shí)對(duì)所有試驗(yàn)豬前腔靜脈采血，采用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀對(duì)白細(xì)胞數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、淋巴細(xì)胞數(shù)(LY)、中性粒細(xì)胞數(shù)(GR)、血紅蛋白濃度(HGB)、中值細(xì)胞數(shù)(MID)等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。

2 結(jié)果

2.1 疫苗免疫對(duì)豬血液白細(xì)胞數(shù)的影響

免疫后14 d，B組白細(xì)胞數(shù)顯著低于其他3組(P<0.05)；免疫后28 d，D組顯著高于A、C組(P<0.05)，與B組差異性不顯著；免疫后42 d，B組的顯著低于C組(P<0.01)；免疫后56 d和70 d，D組的均顯著高于A、B、C 3組(P<0.01)(圖1)。

圖1 免疫后白細(xì)胞數(shù)變化

2.2 疫苗免疫對(duì)血液淋巴細(xì)胞數(shù)的影響

免疫后14 d，C組淋巴細(xì)胞數(shù)最高，但各組間差異性不顯著(P>0.05)；免疫后28 d，B、C、D 3組的均顯著高于A組(P<0.01)；42 d時(shí)，B組顯著低于C、D兩組(P<0.01)；免疫后56 d和70 d，D組顯著高于A、B、C 3組(P<0.01)(圖2)。

圖2 免疫后淋巴細(xì)胞數(shù)變化

2.3 疫苗免疫后對(duì)紅細(xì)胞數(shù)的影響

各組紅細(xì)胞數(shù)均緩慢上升。免疫14 d后D組紅細(xì)胞數(shù)高于其他3組(P>0.05)，免疫42 d后，A組高于B組(P>0.05)，試驗(yàn)組(B、C、D組)紅細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組紅細(xì)胞數(shù)(A組)無顯著性差異(P>0.05)(圖3)。

2.4 疫苗免疫對(duì)血紅蛋白濃度的影響

各組血紅蛋白濃度均緩慢上升。免疫14 d后D組血紅蛋白濃度高于其他3組(P>0.05)，70 d時(shí)，D組的低于B組，試驗(yàn)組(B、C、D組)血紅蛋白濃度與對(duì)照組(A組)血紅蛋白濃度無顯著性差異(P>0.05)(圖4)。

2.5 疫苗免疫后對(duì)中性粒細(xì)胞數(shù)影響

各組中性粒細(xì)胞數(shù)均緩慢上升。免疫后D組中性粒細(xì)胞數(shù)高于其他3組(P>0.05)，70 d時(shí)，B組的高于D組(P>0.05)。免疫后試驗(yàn)組(B、C、D組)中性粒細(xì)胞數(shù)高于對(duì)照組(A組)中性粒細(xì)胞數(shù)，但差異不顯著(P>0.05)(圖5)。

圖3 免疫后紅細(xì)胞數(shù)變化

圖4 免疫后血紅蛋白濃度變化

圖5 免疫后中性粒細(xì)胞數(shù)變化

2.6 疫苗免疫對(duì)中值細(xì)胞數(shù)影響

免疫14 d后D組中值細(xì)胞數(shù)高于其他3組(P>0.05)。70 d時(shí)，D組的高于A組和C組，但差異不顯著(P>0.05)(圖6)。

圖6 免疫后中值細(xì)胞數(shù)變化

3 討論

PRRS已成為危害養(yǎng)豬業(yè)最嚴(yán)重的疫病之一[11]。為防控該病，除快速準(zhǔn)確的診斷外，做好仔豬的免疫接種也是預(yù)防該病最重要的途徑之一。血液是機(jī)體抵御感染的第一道防線，起主要作用的是血液中白細(xì)胞，如巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞[12]。它們通過吞噬和產(chǎn)生抗體等方式來抵御和消滅入侵的病原微生物。本研究首免后，D組白細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)始終高于A組和B組，且免疫后42 d白細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)顯著高于其他3組(P<0.01)，表明同時(shí)免疫豬藍(lán)耳病滅活苗和弱毒苗組，能夠更好的刺激機(jī)體白細(xì)胞的增殖與分化。在免疫28 d后，弱毒苗免疫組(B組)白細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)均顯著低于C組和D組(P<0.01)，且免疫后42 d時(shí)B組淋巴細(xì)胞數(shù)與免疫后28 d時(shí)相比顯著下降(P<0.05)。這可能是接種PRRSV活疫苗毒力偏強(qiáng)所致，因?yàn)槊庖邷缁蠲缃M(C組)白細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)變化不明顯(P>0.05)。免疫后試驗(yàn)組(B、C、D組)的紅細(xì)胞數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)、中值細(xì)胞數(shù)及血紅蛋白濃度與A組無明顯差異(P>0.05)，表明PRRS疫苗免疫并沒有對(duì)豬機(jī)體造成損傷，這與張韜[13]的報(bào)道一致。本研究中D組的白細(xì)胞數(shù)和淋巴細(xì)胞數(shù)等血液指標(biāo)高于B組和C組，表明PRRS弱毒苗和滅活苗同時(shí)免疫能夠更有效地刺激機(jī)體免疫細(xì)胞的增殖。

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Effect of PRRS Vaccines on Blood Indexes in Swine

SUN Xue,SHEN Guo-Shun,ZHAO Yi-Fei,LI Shuai,GUO Shi-Qi,DONG Ye,lIU Li-Xia

(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,ShenyangAgriculturalUniversity,Shenyang，Liaoning,110161,China)

In order to determine the effect of the different vaccines of PRRS on blood indexes in swine,to make more scientific and effective immune programs of PRRS,42 healthy and weaned piglets were randomly divided into 4 groups,control group(group A ),immunization of attenuated vaccine in group B,immunization of inactivated vaccine in group C,immunization of attenuated and inactivated vaccines in group D.Blood samples were taken from cranialvenacavaon the 14th,28th,42th,56th,70th day after immunization for blood analysis.The results showed:the average number of leukocytes of group D in the 70th day was significantly higher than that of group B (P<0.01),after 42th day the average number of leukocytes of group D was significantly higher than that of other groups(P<0.01); after immunization 28th day,lymphocyte count of group D was significantly higher than that of group B (P<0.01); the number of erythrocytes and hemoglobin concentration,the neutrocytes and median cells in each group showed a slow upward trend, and the values in group D was higher than that in other three groups (P>0.05).It showed that the immunization of attenuated vaccines and inactivated could better stimulate the porcine blood cell proliferation.

PRRS；vaccine；lymphocyte；leukocyte

2016-05-08

遼寧省農(nóng)業(yè)公關(guān)及產(chǎn)業(yè)化項(xiàng)目(2014202004)

孫 雪(1991-)，女，遼寧盤錦人，碩士，主要從事預(yù)防免疫研究。*通訊作者

S852.659.6

B

1007-5038(2016)11-0123-03