于伽，周薇，陳娜，高青山，嚴昌國，李香子

（延邊大學農(nóng)學院，吉林延吉133000）

不同精粗比日糧添加α-亞麻酸對瘤胃體外發(fā)酵參數(shù)及生物氫化代謝產(chǎn)物的影響

于伽，周薇，陳娜，高青山，嚴昌國，李香子*

（延邊大學農(nóng)學院，吉林延吉133000）

本試驗通過體外培養(yǎng)法，研究在不同精粗比日糧中添加α-亞麻酸，對延邊黃牛體外瘤胃發(fā)酵模式及α-亞麻酸（ALA）氫化過程的影響。試驗設(shè)5個底物精粗比，即精料∶粗料分別為2∶8、4∶6、5∶5、6∶4和8∶2，各組均添加3.0% 的α-亞麻酸，每組3個重復。體外培養(yǎng)12 h，取3、6、9、12 h時間點培養(yǎng)液測定體外瘤胃發(fā)酵參數(shù)和脂肪酸含量。結(jié)果顯示∶在各時間點，隨著精料比例的增加，pH值呈上升趨勢，且8∶2組與其他4組比，分別高（3 h）3%、4%、4%、3%，（6 h）9%、6%、4%、3%，（12 h）5%、4%、3%、2%（P＜0.05）。添加α-亞麻酸條件下，不同粗精比對總揮發(fā)性脂肪酸（TUFA）無顯著影響。6 h和12 h，乙酸濃度與精料添加比例呈反比。6∶4組丙酸濃度分別比其他4組高（6 h）29%、24%、19%、15%，（12 h）19%、17%、4%、4%（P＜0.01）。8∶2組NH3-N濃度在各時間點分別比4∶6組高43%、30%、37%（P＜0.01）。隨精料比例升高，各時間點的CH4、CO2和產(chǎn)氣量均呈上升趨勢，CH4產(chǎn)量一直低于CO2的產(chǎn)量。t11-C18∶1濃度在整個培養(yǎng)時間內(nèi)隨粗料比例的下降而減少，在6 h時2∶8組比8∶2組高64%（P＜0.01）。6 h、12 h，各組共軛亞油酸（CLA）濃度無顯著差異。各時間點，c9，c12-C18∶2濃度隨粗料添加量下降而減少，在6 h、12 h，2∶8組比8∶2組分別高81%、93%（P＜0.01）；總ClnA的變化趨勢與之相同，各時間點2∶8組比8∶2組分別高32%（P＜0.05）、87%（P＜0.01）、119%（P＜0.01）。由此可見，不同精粗比日糧和α-亞麻酸影響體外瘤胃發(fā)酵參數(shù)，高精料日糧可以提高總產(chǎn)氣量和CO2產(chǎn)量，同時抑制CH4的生成。高精料日糧通過降低TVFA含量增加瘤胃pH值。試驗中添加α-亞麻酸，促進了氫化微生物對亞麻酸的氫化作用，同時抑制了亞油酸的氫化過程。

日糧配比；α-亞麻酸；生物氫化；體外發(fā)酵

瘤胃內(nèi)環(huán)境的改變是影響反芻動物瘤胃不飽和脂肪酸代謝的主要因素之一。瘤胃pH改變會引起微生物的菌群變化，從而導致瘤胃發(fā)酵模式改變（Van，1994）。Kopecny（1982）研究表明，隨著精飼料比率的增加，當pH值不低于6.0時，脂類分解和游離脂肪酸含量增加；日糧引起瘤胃微生態(tài)變化，從而會改變飼料中亞油酸、亞麻酸等代謝終產(chǎn)物（Polan等，1964）。大量研究表明，日糧精粗比可以影響瘤胃中亞油酸的生物氫化效率，從而影響共軛亞油酸（CLA）及t11-C18∶1等脂肪酸在瘤胃中的積累。日糧精料比例高，會使瘤胃pH值降低，從而引起瘤胃CLA的積累變化（Wang等，2002）。Wang等（2002）研究表明，瘤胃pH在6.1～6.9時，c9，t11-CLA生成量增加。

α-亞麻酸（ALA；c9，c12，c15-C18∶3）是一種含有3個雙鍵的長鏈不飽和脂肪酸（Lourenco等，2010），主要從紫蘇籽、亞麻籽等的籽類及植物性油脂中獲取，是一種動物體不能合成的高級多不飽和全順式脂肪酸（李艷玲等，2006）。在反芻動物瘤胃中，α-亞麻酸在瘤胃微生物作用下，第一步cis-12雙鍵被異構(gòu)化為trans-11雙鍵，產(chǎn)生α-亞麻酸的異構(gòu)體cis-9，trans-11，cis-15，C18∶3 （CLnA）；第二步經(jīng)過微生物加氫作用，先被還原成反11，順15-亞油酸（t11，c15-C18∶2），再被還原為反11-油酸（t11-C18∶1）和硬脂酸（C18∶0）等代謝產(chǎn)物（Hafoot等，1998）。CLA具有抗癌、減輕動脈硬化、減肥、增強免疫力等作用（孫攀峰等，2007），是維持機體細胞構(gòu)成所必需的營養(yǎng)物質(zhì)。Choi等（2005）研究發(fā)現(xiàn)，ClnA對腫瘤細胞的毒性要比CLA更強。但是α-亞麻酸在瘤胃微生物作用下生成CLnA等代謝中間產(chǎn)物時，是否受到日糧影響尚不清楚，相關(guān)報道較少。因此，本試驗在不同精粗比日糧中添加α-亞麻酸，旨在研究其對瘤胃體外發(fā)酵參數(shù)及瘤胃微生物氫化對α-亞麻酸代謝產(chǎn)物的影響。

1　材料與方法

1.1試驗動物及瘤胃液采集選擇4頭安裝有永久性瘤胃瘺管的成年健康延邊黃牛為瘤胃液供體動物，平均體重為（350±12）kg，飼喂的羊草及精料比例為4∶6，每天飼喂兩次（7∶00和17∶30），自由飲水。在晨飼（7∶30）后2 h采集瘤胃內(nèi)容物，混合后通過4層及12層紗布過濾，收集在經(jīng)過預熱的保溫瓶內(nèi)，恒溫39℃，通入飽和CO2。

1.2試驗設(shè)計本試驗采用單因素試驗設(shè)計，根據(jù)培養(yǎng)底物精粗比不同分為5個處理組，每組3個重復，底物精粗比分別為2∶8、4∶6、5∶5、6∶4和8∶2 （m/m），在每組都添加3.0%的α-亞麻酸（m/m）。在培養(yǎng)12 h時間內(nèi)的各時間點3、6、12 h分別測定以下指標:pH值、產(chǎn)氣量、氨態(tài)氮（NH3-N）、揮發(fā)性脂肪酸（VFA）、長鏈脂肪酸含量及氫氣、甲烷和二氧化碳含量。

1.3培養(yǎng)方法采用體外批次培養(yǎng)法，分別準確稱取0.4 g精料、1.6 g粗料；0.8 g精料、1.2 g粗料；1 g粗料、1 g精料；1.2 g精料、0.8 g粗料；1.6 g精料、0.4 g粗料，混合均勻后分別加入各組培養(yǎng)瓶中；在晨飼后2 h從4頭牛瘤胃采集足量瘤胃內(nèi)容物，混合后依次通過4層和12層紗布過濾，收集至經(jīng)過預熱的收集瓶中，39.0℃水浴下通入飽和CO2，待用。將乳化后的亞麻酸液按相應(yīng)設(shè)定比例加入培養(yǎng)瓶；向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入緩沖液（Mc-Dougall，1984）和瘤胃液各45 mL混勻，通入CO2，用膠塞及鋁蓋密封；放在39℃恒溫振蕩培養(yǎng)箱（VS-8480SR）培養(yǎng)12 h，轉(zhuǎn)速為135 r/min。

1.4測定指標及方法用雷磁pHS-3 CpH計測定培養(yǎng)液pH值。參照Li等（2009）方法，使用安捷倫GC-7890A氣相色譜儀，采用外標法測定揮發(fā)性脂肪酸（VFA）濃度，F(xiàn)ID檢測器，進樣溫度170℃，柱溫120℃，檢測器溫度200℃，毛細管柱為Agilent 19091F-112（25 m×320 μm×0.5 μm）。在培養(yǎng)3、6、12 h分別取體外培養(yǎng)液1 mL，用靛酚藍比色法測定氨態(tài)氮含量。根據(jù)產(chǎn)氣壓力轉(zhuǎn)換成氣體體積，并通過空白對照校正，計算產(chǎn)氣量。使用4 mL采氣管采集氣體，參照T.R.Callaway等（1996）方法，采用外標法，使用島津GC-2014C氣相色譜儀測定H2、CO2和CH4含量，TCD檢測器，色譜柱型號:Hayesep Q 2 m×4 mm。

培養(yǎng)液脂肪提取參照Folch等（1957）的方法；脂肪酸甲基化參照Lepage等（1986）的方法，內(nèi)標為十三碳酸（C13∶0，美國Sigma公司）；使用安捷倫氣相色譜儀（GC-7890A）測定脂肪酸含量，毛細管柱（Supelco SPTM-2560，100 m×0.25 mm× 0.2 μm，film thickness，USA），進樣口溫度240℃，檢測器溫度250℃，分流比1∶100，初始溫度140℃，運行2 min，4℃/min階升至240℃，運行40 min。CLA異構(gòu)體采用c9，t11-CLA（91396 Fluka，美國）、t10，c12-CLA（美國Fluka公司）標準品進行定量分析；其他脂肪酸標準品均購自美國Supelco公司。c9，t11，c15-ClnA（75%）標準品由Chouinard教授（STELA:INAF-Université Laval，加拿大）贈送。

1.5統(tǒng)計分析基本數(shù)據(jù)采用Excel 2007處理，然后采用SPSS 17.0中的方差、線性分析和多重比較法進行分析。結(jié)果以“平均值±標準差”表示。

2　結(jié)果

2.1不同精粗比日糧添加α-亞麻酸對pH和NH3-N的影響從表1可以看出，各時間點隨精料比例增加，pH值呈上升趨勢，8∶2組與其他4組比分別高（3 h）3%、4%、4%、3%，（6 h）9%、6%、4%、3%，（12 h）5%、4%、3%、2%（P＜0.05）。在3～6 h，隨精料比例增加，各組pH值下降幅度逐漸變小；在6～12 h，隨精料比例增加，各組pH值下降幅度逐漸增大。在各時間點，8∶2組NH3-N濃度比2∶8組分別高34%、43%、48%（P＜0.01），比4∶6組分別高43%、30%、37%（P＜0.01）；在3 h，6∶4組比2∶8組、4∶6組分別高19%、27.6%（P＜0.05），在6 h比2∶8組、4∶6組分別高28%、16%（P＜0.05）。

表1不同精粗比日糧添加α-亞麻酸對pH和NH3-N的影響

2.2不同精粗比日糧添加α-亞麻酸對VFA的影響由表2看出，各時間點TVFA含量隨精料比例增加而下降。3 h，2∶8組乙酸濃度比4∶6組高17%（P＜0.05），比其他3組分別高23%、44%、86%（P＜0.01）；6 h和12 h，乙酸濃度一直與精料添加量呈反比。各組丙酸濃度隨時間變化遲緩；6∶4組丙酸濃度比其他組分別高（3 h）14%、12%、7%、6%，（6 h）29%、24%、19%、15%，（12 h）19%、17%、4%、4%（P＜0.01）。6 h和12 h，6∶4組乙酸/丙酸最低；各時間點乙酸/丙酸變化趨勢與乙酸變化趨勢相同。

表2不同粗精比日糧添加α-亞麻酸對VFA的影響mmol/mL

2.3不同粗精日糧比添加α-亞麻酸對產(chǎn)氣參數(shù)的影響從表3可以看出，隨精料比例增加，各時間點產(chǎn)氣量均呈增加趨勢。8∶2組比其他4組分別高（3 h）38%、27%、21%、15%，（9 h）36%、18%、14%、12%，（12 h）36%、20%、14%、11%（P＜0.01）；在6 h，比2∶8、4∶6、5∶5組分別高29%、17%、7%（P＜0.01）。各時間點6∶4組比2∶8組分別高19%、24%、22%、23%（P＜0.01）。2∶8組H2含量比其他4組分別高（9 h）83%、77%、89%、61%，（12 h）241%、241%、191%、168%（P＜0.01）。各時間點，CO2含量隨精料比例增加呈上升趨勢，且8∶2組比2∶8、4∶6、5∶5組分別高（3 h）46%、31%、27%，（6 h）77%、25%、17%，（9 h）62%、26%、13%（P＜0.05）。各時間點隨精料比例增加CH4含量也不斷增加，其中2∶8組比其他4組分別低（9 h）57%、65%、67%、63%，（12 h）43%、56%、54%、73%（P＜0.01）；在6 h比4∶6組低56%（P＜0.05），比其他3組分別低71%、73%、78% （P＜0.01）；在3 h，比5∶5、6∶4、8∶2組分別低45%、57%、71%（P＜0.01）。

表3不同粗精比日糧添加α-亞麻酸對產(chǎn)氣參數(shù)的影響

2.4不同粗精比日糧添加α-亞麻酸對瘤胃微生物生物氫化的影響由表4看出，2∶8組C18∶0 在3 h比其他4組分別高23%、32%、30%、29% （P＜0.01）；在6 h，比6∶4、8∶2組分別高22%、29%（P＜0.01），4∶6組比6∶4、8∶2組分別高14%、21%（P＜0.05），5∶5組比6∶4、8∶2組分別高9%、16%（P＜0.05）。各時間點t11-C18∶1隨粗料添加量降低而減少，2∶8組在6 h比5∶5、6∶4、8∶2組分別高33%、54%、64%（P＜0.01）；在12 h，2∶8、4∶6組比8∶2組分別高40%、23%（P＜0.01），5∶5、6∶4組比8∶2組分別高15%、4%（P＜0.05）。各組t9-C18∶1在6 h、12 h兩個時間點隨精料比例升高而增加。c9-C18∶1在各時間點隨精料比例升高而增加。在3 h，2∶8組和4∶6組c9，t11-CLA比其他3組分別高（2∶8）17%、42%、29%，（4∶6）4%、26%、14%（P＜0.05）；t10，c12-CLA比其他3組分別高（2∶8）5%、25%、33%，（4∶6）5%、25%、33%（P＜0.05）。c9，c12-C18∶2濃度隨粗料比例下降而減少，在6 h、12 h，2∶8比8∶2組分別高81%、93% （P＜0.01）。C18∶3n3濃度與粗料添加量呈正比，C18∶3n6與粗料添加量呈反比。隨粗料比例下降總ClnA濃度顯著降低，各時間點2∶8組濃度比8∶2組分別高32%（P＜0.05）、87%（P＜0.01）、119%（P＜0.01）。

表4不同粗精比日糧添加α-亞麻酸對瘤胃體外發(fā)酵十八碳脂肪酸濃度的影響mg/dL

3　討論

3.1不同粗精比日糧添加α-亞麻酸對瘤胃發(fā)酵

參數(shù)的影響Nocek等（1991）認為，日糧淀粉比例大時，淀粉分解菌在微生物群落中占主要優(yōu)勢，使得丙酸含量增加；反之，粗料比例大時纖維分解菌含量更大，使得乙酸增加。本試驗中TVFA含量隨培養(yǎng)時間延長不斷增加，可以看出乙酸控制著TVFA的變化趨勢。試驗中，隨精料比例增加，乙酸濃度逐漸降低，丙酸濃度逐漸增大，說明高精料情況下瘤胃發(fā)酵模式主要是丙酸型，而低精料情況下瘤胃發(fā)酵模式為乙酸型。而各時間點乙丙比也隨精料比例增加而下降，驗證了上面的結(jié)論。但6、12 h，2∶8組與4∶6組相比丙酸濃度略有下降，可能是由于精料含量過高引起瘤胃內(nèi)微生物發(fā)酵抑制。試驗中丙酸趨勢與TVFA變化趨勢相反，而乙酸與之相同，說明TVFA變化主要受乙酸影響。

隨培養(yǎng)時間延長，pH下降可能是由于TVFA在培養(yǎng)液內(nèi)累積，以及緩沖液的緩沖能力隨時間不斷減弱造成的。Bargo等（2002）認為，在日糧粗飼料比例高時，纖維素、半纖維素含量較高，難以發(fā)酵，pH較高；與之相比日糧中淀粉含量高時，日糧可以被快速發(fā)酵，pH則較低。而魏宏陽等（2004）在體外法研究添加不飽和游離脂肪酸混合物和植物油對pH的調(diào)控試驗中發(fā)現(xiàn)，亞麻油組pH上升，進而認為在添加亞麻油情況下，pH變化主要受VFA產(chǎn)量影響。從本試驗結(jié)果中可以看出，pH變化趨勢與精料比例呈正比，TVFA變化與之相同，說明在添加α-亞麻酸條件下pH變化主要受TVFA累積影響，與魏宏陽等（2004）結(jié)論相符。

日糧中的蛋白質(zhì)，多肽及非蛋白氮在瘤胃中可以降解為NH3-N。而NH3-N是瘤胃微生物生長繁殖的主要氮源，是合成菌體蛋白的主要原料（Nolan，1975）。瘤胃中的NH3-N濃度反映了微生物分解含氮物質(zhì)產(chǎn)生NH3-N與瘤胃微生物對其利用的情況（劉宗柱等，1998）。本試驗中高精料組NH3-N濃度比低精料組濃度高，隨精料比例提升NH3-N濃度增加，這可能是由于精料含有比粗料更多的可溶性蛋白，瘤胃降解速度快，使得飼料蛋白中分解NH3-N的速率大于其利用速率，NH3-N在培養(yǎng)液中累積。

3.2不同粗精比日糧添加α-亞麻酸對產(chǎn)氣參數(shù)的影響反芻動物可以利用單胃動物不能利用的纖維素、半纖維素等結(jié)構(gòu)性碳水化合物，瘤胃微生物將碳水化合物分解為可用能量物質(zhì)的同時產(chǎn)生了大量的CO2和H2。本試驗中，產(chǎn)氣量隨精料添加量升高而增加，這可能是由于高精料組中含有較多的瘤胃微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)，有益于微生物的生長和繁殖，使得發(fā)酵作用更劇烈（王滿紅等，2012）。CO2產(chǎn)量隨精料添加量升高而增加，可能是由于高精料中含有大量的可溶性淀粉，微生物對其代謝速率遠大于纖維素和半纖維素，使得高精料培養(yǎng)液中的CO2累積量在同一時間點大于低精料組含量。H2的含量并不與CO2和CH4呈現(xiàn)正相關(guān)，這可能是由于添加了α-亞麻酸，其生物氫化作用競爭消耗了氫，而且氫化程度與粗精比例也有一定關(guān)系。Getachew等（2005）認為，CH4的產(chǎn)生與日糧（結(jié)構(gòu)性碳水化合物）的緩慢消化代謝有很大關(guān)系。Van等（1996）認為，日糧粗精比對CH4產(chǎn)量的影響主要是通過改變發(fā)酵模式使之向丙酸模式轉(zhuǎn)變，以及瘤胃pH對甲烷菌的影響。Russell（1998）研究表明，在體外培養(yǎng)時，培養(yǎng)液pH值低于6.3，CH4產(chǎn)量急劇下降。本試驗中CH4產(chǎn)量與丙酸含量沒有呈現(xiàn)負相關(guān)，而與瘤胃pH呈現(xiàn)正相關(guān)，可能是低pH對甲烷菌產(chǎn)生抑制作用。因此認為在添加α-亞麻酸的情況下粗精比例變化時，CH4產(chǎn)生主要受培養(yǎng)液pH的影響，低pH可以抑制CH4產(chǎn)生。

3.3不同粗精比日糧添加α-亞麻酸對瘤胃微生物生物氫化的影響Fuentes等（2009）研究表明，日糧中的脂肪酸氫化為飽和脂肪酸主要是日糧中粗飼料的作用。本研究中高粗料組與其他組相比產(chǎn)生了更多的飽和脂肪酸。這可能由于瘤胃微生物的氫化作用中起主要作用的是纖維分解菌類，粗料中含有更多的纖維素和半纖維素，有益于此類微生物的繁殖，使得氫化速率更快（Hafoot等，1998）。此外高粗日糧可以為微生物提供更多的食糜微粒，有利于氫化微生物附著，為生物氫化提供場所。t11-C18∶1是亞麻酸和亞油酸氫化過程中產(chǎn)出的主要單不飽和脂肪酸。Harfoot等（1998）認為，在瘤胃功能正常時，c9，c12-C18∶2的主要氫化中間體是單不飽和脂肪酸t(yī)11-C18∶1。瘤胃pH值下降可以抑制生物加氫的最后一步，導致t-C18∶1脂肪酸積累。然而，這種抑制程度要比他們對水解的抑制程度低得多。Kalscheur等（1997）認為，瘤胃中低pH的條件下，可以抑制t-C18∶1的生成。本試驗中高精料日糧通過降低TVFA含量使瘤胃pH值升高，進而增加了c9-C18∶1濃度，同時降低t11-C18∶1濃度，這與Kalscheur等（1997）得出的結(jié)論相似。

本試驗中c9，c12-C18∶2（亞油酸）和α-亞麻酸的濃度與粗料添加量呈正比，其原因是試驗所用的粗料中含有豐富的α-亞麻酸和亞油酸，二者可以從粗料中不斷消化水解產(chǎn)生，使得培養(yǎng)液中濃度不斷升高。亞油酸在氫化第一步可以生成兩種CLA（c9，t11-CLA、t10，c12-CLA），試驗中兩種CLA組間基本無差異，且整個培養(yǎng)過程中濃度無明顯變化，可能是由于培養(yǎng)底物中添加了α-亞麻酸，促進了大部分氫化微生物對亞麻酸的氫化，余下較少部分的氫化微生物氫化亞油酸，從而抑制了對亞油酸的氫化過程。同時本試驗結(jié)果可以看出，日糧組成對總CLA濃度無顯著影響。α-亞麻酸隨粗料比例上升而增加，可能是羊草不斷水解產(chǎn)生的。同時總ClnA變化趨勢也與之相似，在0～6 h濃度快速升高，在6～12 h小幅度降低，說明在添加α-亞麻酸的情況下，有利于亞麻酸異構(gòu)為CLnA，并且與日糧組成有密切關(guān)系。

4　結(jié)論

在添加α-亞麻酸條件下，日糧中粗料比例升高可以使瘤胃發(fā)酵向乙酸型發(fā)酵轉(zhuǎn)變，降低丙酸和NH3-N含量，pH變化主要受TVFA累積影響。精料比例升高可以提高體外瘤胃產(chǎn)氣參數(shù)，在添加α-亞麻酸條件下，抑制了CH4的生成，其產(chǎn)量約為CO2的1/2。添加3.0%α-亞麻酸，可以促進氫化微生物對亞麻酸的氫化作用，并降低氫化微生物對亞油酸的氫化過程。

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DOI∶10.15906/j.cnki.cn11-2975/s.20162005

This study was conduced to determine the effects of different diets added α-linolenic acid on rumen fermentation patterns and α-linolenic acid hydrogenation process，in vitro culture was applied.The trial were allocated to5 groups，the ratio of concentrate:roughage were 8∶2，6∶4，5∶5，4∶6 and 2∶8（m/m）respectively，each group added 3.0%αlinolenic acid（m/m）.Each group had three replicates.Culture for 12 h in vitro，take 3，6，9 and 12 h sample to measure rumenal fermentation parameters and fatty acid contents.The results showed that:at each time point，with the increase of concentrate，pH value is on the rise，and 8∶2 group was higher than the other four groups for（3 h）3%，4%，4%，3%，（6 h）9%，6%，4%，3%，（12 h）5%，4%，3%，2%（P＜0.05）respectively.On condition that add α-linolenic acid，the effects of different diets on TVFA were not significant.At 6h and 12 h，the concentration of acetic acid has been inversely proportional to the concentrate，propionate concentrations of 6∶4 group were higher than other groups for（6 h）29%，24%，19%，15%，（12 h）19%，17%，4%，4%（P＜0.01）.NH3-N concentration of 8∶2 group were higher than 4∶6 group 43%，30%，37%（P＜0.01）.With the increase of concentrate，CH4，CO2and gas production showed an increasing trend at each time point，CH4production has been lower than CO2.The concentration of t11-C18:1 in the whole culture process decreased with coarse reduced.At 6 h，2∶8 group were higher than 8∶2 group 64%（P＜0.01）.6 h，12 h，the CLA concentration had no significant difference.At each time point，c9，c12-C18∶2 concentrations decreased with coarse reduced，at 6 h and 12 h，2∶8 group were higher than 8∶2 group 81%，93%（P＜0.01）；total ClnA have the same change trend，at each time point 2:8 group were higher than 8∶2 group 32%（P＜0.05），87%（P＜0.01），119%（P＜0.01）.Thus different diets added α-linolenic acid hasinfluenced rumen fermentation parameters in vitro，high concentrate could increase the total gas production and CO2production，while inhibit the CH4production.High concentrate increased pH value by reducing TVFA.Add α-linolenic acid could promote the hydrogenation of linolenic acid and inhibit the hydrogenation of linoleate.

different diets；α-linolenic acid；bio-hydrogenation；in vitro fermentation

S816.7

A

1004-3314（2016）20-0017-06

吉林省科技發(fā)展計劃項目（20140414056GH）