井 菲（南水北調中線建管局渠首分局，河南省南陽市473000）

水質環(huán)境監(jiān)測的微生物質控措施研究

井 菲（南水北調中線建管局渠首分局，河南省南陽市473000）

隨著人們環(huán)保與安全意識的增強，水質監(jiān)測中微生物樣品的檢測與管理越來越受到廣泛關注。近些年來，供水安全問題逐漸增多，對人們的生命健康造成了嚴重威脅。我們要對水質安全有足夠重視，加強水質微生物樣品實驗室監(jiān)測，規(guī)范實驗室微生物監(jiān)測程序，提高水質環(huán)境監(jiān)測質量，確保供水安全。本文主要從水質微生物樣品采集、水質微生物樣品監(jiān)測、實驗室控制以及樣品監(jiān)測后的處理等方面對水質環(huán)境監(jiān)測微生物質控方法進行了分析，希望對相關研究領域提供借鑒經驗。

水質；環(huán)境監(jiān)測；微生物

水質在監(jiān)測的過程中，在實驗室內微生物的檢測常常會出現一些問題，比如：在分析微生物檢測標準、已經知道的加入量以及參比的樣品等等，有些實驗室不具備這些條件，或者不知道，所以，個人的判斷是必要。切實有效的質量保證程序一定可以控制好從采樣一直到報告數據的整個過程，盡量避免檢驗結果受到影響。一般來說，可以影響到檢測結果的因素主要有：采樣技術；實驗設備和器材；工作人員的業(yè)務水平；材料的質量；培養(yǎng)基；分析測試的步驟等等。

1 水質微生物樣品采集

在采集微生物樣品之前，需要準備采樣玻璃瓶。為了保證容器無菌性，需要對玻璃進行180℃的高溫殺菌消毒處理，時間保持在2h左右。在樣品采集時，要選取具有代表性的樣品。通常情況下，在同一水源處，如果同時需要采集幾類檢測指標的水樣時，首先應該采集可供微生物學指標檢測的水樣。

1.1 水質微生物樣品監(jiān)測

一般來說，水質量檢測微生物的實驗室一定要先準備齊全采集微生物樣品無菌的采樣玻璃瓶，隨著時間與空間的變化，許多水體會發(fā)生很大的變化，因此，一定早制定出科學合理的水質微生物采樣的規(guī)劃。為了保證所采集水樣具有代表性，采樣的時候必須固定取水的地點，同一個時間段；所采集的水樣一般為瓶容量的80%左右，在檢驗的時候一定要混勻充分；采集樣品時一定要直接采集，已經滅菌采樣瓶不能用樣水沖刷，避免手指與其他物品對采樣瓶口造成玷污；在采樣的時候嚴禁攪動水樣底部的沉積物。在采集水管里的水樣之前，一定要對水龍頭消毒，其消毒的方法為：在龍頭的表面用火焰燒灼大約3～5s，然后再放水5～10min。農村的生活用水樣的采集為蓄水池，要準備一個干凈水桶，將水桶放入到儲水池里面幾分鐘，盡量不要采取表面水，然后把樣水灌到無菌瓶里面，要注意的是手一定不要接觸到無菌的瓶口與瓶塞。

當取完微生物水樣后，相關人員需要把水樣送到質檢實驗室，采樣員需要把與水樣有關的信息匯報給實驗室工作人員，接樣員需要編輯水樣編號。在對水質微生物檢測之前，需要對無菌實驗室進行消毒處理，通常采用紫外線消毒方法。

1.2 水樣的保存達到減緩微生物繁殖的作用

采用低溫冷藏箱來保存水樣，水樣全部采集后立即送回實驗室；在運輸中，玻璃容器要防止破裂，須有固定措施，防止樣品容器傾倒和樣品溢出。檢測人員要對培養(yǎng)基配置和驗證情況進行記錄，同時也要記錄標準菌株培養(yǎng)、儲存和繁殖等情況，表1為培養(yǎng)基與標準菌株的指標內容。

表1 標準菌株觀察指標

在水質微生物樣品檢測過程中，檢測人員需要根據水質檢測標準來進行檢測，每當樣品檢測完之后，需要與培養(yǎng)基空白進行對照，并要隨機抽取樣品，再做平行樣品檢測，以此來保證檢測結果準確性。為了保證水樣菌落總數的檢測質量，首先要充分搖勻水樣，使細菌在水體中均勻分布；在稀釋水樣時，要沿著管壁謹慎加入，不要觸碰到管內部的稀釋液，防止水樣被污染；把水樣注入器皿時，要從器皿的側面加入，不能把器皿蓋揭開，最后要把吸管直立放置，使其內部水流空，并且要在器皿底部的干燥處插入吸管尖部，使其剩余液體全部排出。為了避免出現片狀菌落，當把水樣加入到器皿中后，在加分鐘內，可以向其中倒入一定量的瓊脂培養(yǎng)基，并要立即攪勻，使其完全混合。當培養(yǎng)基凝固以后，要在幾分鐘之內，翻轉器皿，防止菌落蔓延。

2 實驗室檢測系統(tǒng)的質量控制

2.1 實驗室環(huán)境控制

實驗室環(huán)境主要有無菌間、冰箱、生物安全箱等設施的衛(wèi)生整潔度和安放位置，這些因素能夠對監(jiān)測質量造成影響。因而在實驗室的管理中，需要對實驗設施進行維護，使其處于良好狀態(tài)，并要定期對實驗儀器進行清理維護，校準質控。對于無菌實驗室，則要對平皿、儀器等實驗設備進行密封處理，在使用刻度吸管時，需要在管口處放置棉塞，防止洗耳球清潔度不夠，而影響實驗結果。另外，由于微生物實驗操作性和主觀性較強，因而微生物實驗操作，對實驗檢測人員提出了較高要求。檢測人員需要不斷學習，掌握專業(yè)檢測技能，熟練操作，提高檢驗水平和處理實驗結果異常等情況的能力。實驗室要統(tǒng)一檢驗方法，并要制定相關的規(guī)章制度，明確規(guī)定各級管理人員的職責與權限，加強對水質監(jiān)測工作的監(jiān)管力度，確保實驗檢測結果精確度。

2.2 實驗室設備控制

當完成水質微生物樣品檢測與培養(yǎng)，而且檢測結果確認后，檢測實驗室就可以清洗培養(yǎng)器皿，可以對檢測后的微生物水質樣品進行處理，清洗采樣玻璃瓶，要對實驗過程中使用的器皿、吸管等實驗器具進行高溫消毒處理。并且要對使用過的實驗室進行消毒，在消毒液中加入75%的酒精、5%的甲酚溶液及0.1%的新潔爾滅溶液，使用此混合溶液對實驗室進行熏蒸消毒殺菌處理，從而為下次實驗做好準備。

3 水質微生物樣品監(jiān)測后控制

3.1 檢測菌落總數的質量控制

在接種前應將水樣充分搖勻，使得水中微生物均勻的分布在水中，水樣在稀釋的時候一定要沿著管壁加入，千萬不要接觸到管里面的稀釋液，用來預防吸管尖外側的部分粘附的檢測液混入到里面，把水樣注入到器皿內的時候，要從器皿的一側加入水樣，一定不能揭來器皿蓋，把吸管直立起來使水流空，在器皿底部干燥的地方再擦拭一下吸管并且把剩余的液體排出，千萬不要吹出來。為了預防片狀的菌落，把水樣加入到器皿中后20min內朝器皿里面倒入營養(yǎng)瓊脂的培養(yǎng)基，要馬上混合均勻，等到器皿里面的瓊脂凝固之后幾分鐘內進行翻轉培養(yǎng)，這樣可以避免菌落生長。

3.2 檢測水樣大腸菌群質量的控制

在接種之后，搖動試管使水樣和乳糖發(fā)酵混勻，在乳糖發(fā)酵的試驗中常常伴有少量的氣體，或者產酸不產氣，有時候倒管里面雖然沒有氣體，但是，在液體表面與管壁可以看到慢慢上浮的小氣泡，在這個時候千萬不要放棄，繼續(xù)往下做下一步證實的實驗。若開始發(fā)酵為陽性的話，還需要進行革蘭染色以及繼續(xù)接種培養(yǎng)觀察。挑選出菌落數，并且與大腸菌群檢出率有著密切的關系，要挑取出典型的菌落，一般多挑選幾個預防假性陰性。

4 結束語

總而言之，供水安全，關乎國計民生，影響著國民經濟建設，而水質檢測是飲用水安全的重要保障。因而我們要對水質環(huán)境監(jiān)測有足夠重視，加強水質微生物樣品的檢測與管理，嚴格控制微生物檢測質量。

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2016-11-1