金連花 楊昭婷 玄延花 王麗強(qiáng)

(延吉市醫(yī)院病理科，延吉133000)

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CD138在宮頸病變組織中的表達(dá)及臨床病理學(xué)意義①

金連花 楊昭婷②玄延花②王麗強(qiáng)③

(延吉市醫(yī)院病理科，延吉133000)

目的：研究CD138在宮頸正常黏膜組織、上皮內(nèi)瘤變(CINⅠ/Ⅱ和CINⅢ)和宮頸鱗癌組織中的表達(dá)，探討CD138在宮頸鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、CD68表達(dá)、微血管密度和臨床分期中的臨床病理學(xué)意義。方法：采用免疫組織化學(xué)方法檢測CD138在120例宮頸鱗癌、106例CINⅢ、14例CINⅠ/Ⅱ、54例正常子宮黏膜組織中的表達(dá)情況。結(jié)果：CD138表達(dá)在宮頸癌組織最低，其次是正常宮頸黏膜組織、CINⅠ/Ⅱ和CINⅢ最高，其差異具有顯著性意義(P<0.001)。CD138表達(dá)率在未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P<0.05)。在宮頸癌早期(0期和Ⅰ期)CD138的表達(dá)率最高，在Ⅱ期表達(dá)率最低(P<0.001)。CD138表達(dá)率在宮頸癌組織中CD68呈陽性組明顯低于陰性組(P<0.05)。宮頸癌微血管密度在CD138表達(dá)呈陽性組明顯低于陰性組(P<0.05)。結(jié)論：CD138是宮頸鱗癌發(fā)生發(fā)展過程的抑制因素之一，尤其在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中作用明顯，因此可作為判定宮頸鱗癌進(jìn)程的參考指標(biāo)。

CD138；宮頸鱗癌；免疫組織化學(xué)

宮頸上皮內(nèi)瘤樣病變(CIN)，包括子宮頸異型增生和子宮頸原位癌。如果低級(jí)別上皮內(nèi)瘤變得到及時(shí)的治療，大多數(shù)CIN病變就可以逆轉(zhuǎn)或治愈。發(fā)展為CINⅢ和浸潤癌的幾率和所需時(shí)間與上皮內(nèi)瘤變的程度有關(guān)。病變級(jí)別越高，其轉(zhuǎn)化幾率越高，所需時(shí)間越短[1]。大約一半的CINⅠ，經(jīng)過 CINⅡ 轉(zhuǎn)變?yōu)?CINⅢ所需的時(shí)間為10年以上，而實(shí)際發(fā)展成浸潤癌的 CINⅠ占所有CINⅠ病變中不到2%，而 CIN Ⅲ在10年內(nèi)發(fā)展為浸潤癌的幾率則高達(dá)20%[2]，但目前為止并沒有有效的手段來預(yù)測癌變發(fā)生的幾率，以及阻止癌變的發(fā)生。

CD138是黏附分子黏結(jié)蛋白聚糖家族成員之一，功能主要是調(diào)節(jié)生長因子受體的激活；參與細(xì)胞-胞外基質(zhì)的黏附；促進(jìn)細(xì)胞-細(xì)胞間黏附。當(dāng)CD138表達(dá)異常時(shí)可降低細(xì)胞基質(zhì)間黏附力，加速細(xì)胞的移行[3]。本論文采用免疫組織化學(xué)方法，檢測CD138在宮頸正常黏膜、CIN病變及子宮頸鱗癌組織中的表達(dá)情況，探討了CD138在不同宮頸組織中的表達(dá)情況與宮頸鱗癌發(fā)生至演變的關(guān)系；以及在宮頸鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、微血管分布和臨床分期中的臨床病理學(xué)意義。

1 材料與方法

1.1 材料 收集延邊大學(xué)醫(yī)院病理科1998年1月～2005年12月期間診斷并錐形切除或子宮切除的120例宮頸鱗癌、106例CINⅢ、14例CINⅠ/Ⅱ、54例正常子宮黏膜組織存檔蠟塊標(biāo)本。所有組織切片、HE染色后，均經(jīng)顯微鏡檢查確診，并根據(jù)2002年AJCC(American Joint Committee on Cancer)腫瘤分期標(biāo)準(zhǔn)[3]，120例宮頸鱗癌分期：0期46例、Ⅰ期54例、Ⅱ期20例。無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移110例，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移10例。

1.2 免疫組化染色 免疫組化染色采用二步法，檢測試劑盒為中杉公司產(chǎn)品，CD138兔抗人單克隆抗體為Abcam(ab128936)公司產(chǎn)品。染色步驟按常規(guī)操作步驟進(jìn)行。為證明抗體免疫組化檢測的特異性，實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用了兔IgG代替一抗作為對(duì)照，結(jié)果為陰性。結(jié)果判定主要根據(jù)陽性細(xì)胞數(shù)的比例將染色結(jié)果分為陽性與陰性：即陽性細(xì)胞數(shù)0%～20%是陰性；陽性細(xì)胞數(shù)為20%以上是陽性。微血管密度檢查方法：在低倍鏡下查3個(gè)視野的微血管個(gè)數(shù)，其總數(shù)為該組織的微血管密度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0 統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)。多組間比較采用方差分析，LSD-t檢驗(yàn)，2組間比較用t檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 CD138蛋白在宮頸黏膜各種病變中的表達(dá) 在正常宮頸黏膜CD138的表達(dá)主要分布于基底層細(xì)胞膜，靠近表層其表達(dá)量減少。CD138在正常宮頸黏膜(61.1%)、CINⅠ/Ⅱ(64.3%)和CINⅢ(68.9%)表達(dá)水平相似，但在宮頸鱗癌組織最低(13.3%)，其差異具有顯著性意義(P<0.001)。見表1和圖1。

2.2 CD138表達(dá)水平與宮頸鱗癌臨床病理特征的關(guān)系 CD138表達(dá)率在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組(10.0%)低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組(57.3%)(P=0.003)。在宮頸鱗癌0期(56.5%)和Ⅰ期(68.5%)CD138的表達(dá)水平最高，在Ⅱ期表達(dá)最低(10.0%)(P<0.01)。CD68表達(dá)呈陽性組CD138表達(dá)率(44.7%)明顯低于陰性組(60.3%)(P=0.033)。見表2。在宮頸鱗癌組織，CD138呈陽性表達(dá)者微血管密度(35.55±33.32)明顯低于陰性者(52.77±46.75)(P=0.004)。見圖2。

表1 CD138蛋白在宮頸黏膜各種病變中的表達(dá)

Tab.1 Expression of CD138 protein in cervical lesions

CartegorynCD138positivecases(%)χ2PNormalcorvicalmucosa5433(61.1%)40.019<0.001CINⅠ/Ⅱ149(64.3%)CINⅢ10673(68.9%)Cervicalsquamouscellcarcinomas12016(13.3%)

圖1 CD138在宮頸病變組織中的表達(dá)(Envision二步法，×200)Fig.1 Expression of CD138 in cervical lesions(Envision Two step method，×200)Note: A.Normal cervical epithelium;B.CINⅠ/Ⅱ；C.CINⅢ；D.Cervical squamous cell carcinoma.

表2 宮頸鱗癌組織中CD138的表達(dá)與臨床指標(biāo)的關(guān)系

Tab.2 Relationship between CD138 expression and clinical indicators in cervical squamous cell carcinoma

CategoryCasesCD138positivecases(%)χ2PAge(years)≤508851(58.0%)0.4620.497>503217(53.1%)LymphnodalmetastasisNegative11063(57.3%)8.7160.003Positive101(10.0%)ClinicalstageT04626(56.5%)33.518<0.001T15437(68.5%)T2202(10.0%)CD68Negative7344(60.3%)4.5400.033Positive4721(44.7%)

圖2 CD138在宮頸癌組織中的表達(dá)與微血管密度之間相關(guān)關(guān)系Fig.2 Correlation between CD138 expression and microvessel density in cervical cancerNote: *.P<0.05.

3 討論

CD138主要存在于絕大多數(shù)上皮細(xì)胞表面，并調(diào)節(jié)有關(guān)腫瘤生物學(xué)進(jìn)展的許多過程[4]。研究表明[5,6]，CD138與腫瘤的惡性表型，如無限制生長、低分化、侵襲轉(zhuǎn)移等密切相關(guān)，而惡性表型決定著臨床病情的進(jìn)展，體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)CD138的胞外區(qū)能抑制腫瘤細(xì)胞的生長。CD138是能參與細(xì)胞黏附的受體，它的胞漿域可能與微肌動(dòng)蛋白有關(guān)[7]。

有文獻(xiàn)報(bào)道,CD138在成熟復(fù)層鱗狀上皮表達(dá)最為豐富，隨著腫瘤惡性程度的提高，其膜表達(dá)有逐漸減弱脫失的趨勢(shì)[8]。在CIN中出現(xiàn)CD138的表達(dá)缺失，說明在正常宮頸上皮轉(zhuǎn)變?yōu)镃IN時(shí)，即存在表達(dá)缺失，隨病變發(fā)生進(jìn)展，宮頸浸潤癌中陽性表達(dá)缺失更明顯，提示CD138表達(dá)缺失可能與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。宮頸CIN、早期浸潤癌和浸潤癌中的CD138蛋白的表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)CIN發(fā)展為宮頸早期浸潤癌的過程與CD138表達(dá)水平下降有關(guān)，提示CD138低表達(dá)是宮頸癌發(fā)生過程中的早期事件。采用免疫組化技術(shù)研究宮頸癌，認(rèn)為CD138的表達(dá)缺失與宮頸癌分化程度和病理類型有一定關(guān)系，但還不能用它來評(píng)估患者預(yù)后[9,10]。

本研究結(jié)果顯示，CD138在宮頸鱗癌組織表達(dá)明顯低于正常宮頸黏膜組織和CINⅠ/Ⅱ和CINⅢ中的表達(dá),其差異具有顯著性意義，提示CD138的低表達(dá)與宮頸鱗癌發(fā)生密切相關(guān)，這與文獻(xiàn)報(bào)道相符[9,10]。而且CD138表達(dá)率在未發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸鱗癌組高于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組。目前研究認(rèn)為，CD138是一種細(xì)胞黏附分子，促進(jìn)細(xì)胞與細(xì)胞，細(xì)胞與間質(zhì)之間的黏附作用，控制腫瘤細(xì)胞生長、浸潤和轉(zhuǎn)移。故在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的浸潤性癌中其表達(dá)喪失更明顯。在宮頸鱗癌早期病變中CD138的表達(dá)率最高，在進(jìn)展期表達(dá)率最低，而且有癌相關(guān)巨噬細(xì)胞浸潤(CD68呈陽性)的病變中其表達(dá)率明顯低于無浸潤組。說明腫瘤越進(jìn)展，CD138的表達(dá)率越低，并且間接證實(shí)CD138作為上皮細(xì)胞間重要的黏附分子在腫瘤的侵襲與轉(zhuǎn)移等惡性行為方面起著重要的作用。

CD138在腫瘤診斷、病情進(jìn)展、轉(zhuǎn)移潛能和預(yù)后的評(píng)價(jià)等方面具有很大的潛在價(jià)值。CD138作為一種重要的細(xì)胞黏附分子，它在復(fù)雜多變的宮頸癌發(fā)生、發(fā)展整個(gè)過程中的機(jī)制和作用，還待進(jìn)一步研究。

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[收稿2015-10-16]

(編輯 張曉舟)

Expression and clinical pathological significance of CD138 in cervical lesiontissues

JIN Lian-Hua,YANG Zhao-Ting,XUAN Yan-Hua,WANG Li-Qiang.Department of Pathology,Yanji Hospital,Yanji 133000,China

Objective: To study the expression of CD138 in normal cervical mucosal tissue,cervical intraepithelial neoplasia(CINⅠ/Ⅱ and CINⅢ)and cervical squamous cell carcinoma.And to investigate the clinical pathologic significance of CD138 expression with lymph node metastasis,microvascular density(MVD),CD68 expression and clinical stage in cervical squamous cell carcinoma.Methods: To detected the expression of CD138 in 120 cases of cervical squamous cell carcinoma,106 cases of CINⅢ,14 cases of CINⅠ/Ⅱ and 54 cases of normal cervical mucosa tissues.Results: The expression of CD138 was lowest in cervical cancer tissue,followed by normal cervical mucosal tissue,CIN I/II and CINIII,that there had significant difference(P<0.001).The expression level of CD138 was higher in without lymph node metastasis group than in lymph node metastasis group(P<0.05).In cervical cancer,the expression level of CD138 was higher in early stage(stage 0 and Ⅰ) than in advanced stage(Ⅱ)(P<0.001);and higher in CD68 expression negative group than in positive group(P<0.05).Furthermore,MVD was higher in CD138 expression negative group than in positive group(P<0.05).Conclusion: CD138 play an important role in the process of development of cervical squamous cell carcinoma,especially for the role of lymph node metastasis is more obvious.CD138 could be used as a indicators for determinate the process of progress in cervical squamous cell carcinoma.

CD138;Cervical squamous cell carcinoma;Immunohistochemistry

10.3969/j.issn.1000-484X.2016.04.023

①本文受國家自然科學(xué)基金(81160315, 81460390)資助。

金連花(1981年-)，女，醫(yī)學(xué)碩士，主治醫(yī)師，主要從事女性生殖道、內(nèi)分泌病理及消化道等病理診斷及研究。

及指導(dǎo)教師：王麗強(qiáng)(1978年-)，女，醫(yī)學(xué)碩士，主治醫(yī)師，主要從事消化系統(tǒng)疾病和腫瘤的研究。

R737.33

A

1000-484X(2016)04-0553-03

②延邊大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理學(xué)教研部，延吉133002。

③吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院內(nèi)鏡中心，長春13003。