靜脈藥物配置中心配置過程中5-氟尿嘧啶殘留污染監(jiān)測(cè)

周利瓊，吳 艷，白 浩，萬 莉，羅葉昕，黃 也

（重慶市腫瘤醫(yī)院 藥學(xué)部靜脈配置中心，重慶400030）

靜脈藥物配置中心配置過程中5-氟尿嘧啶殘留污染監(jiān)測(cè)

周利瓊，吳 艷，白 浩，萬 莉，羅葉昕，黃 也

（重慶市腫瘤醫(yī)院 藥學(xué)部靜脈配置中心，重慶400030）

目的建立適合靜脈配置中心監(jiān)測(cè)配置5-氟尿嘧啶過程中藥物殘留的檢測(cè)方法，為制定細(xì)胞毒藥物集中配置的有效個(gè)人防護(hù)措施提供參考依據(jù)。方法本實(shí)驗(yàn)選取了手套（內(nèi)層和外層）、口罩（內(nèi)層和外層）、腹前紗布和配置環(huán)境空氣，采用甲醇-水混合溶劑洗滌吸收，通過旋轉(zhuǎn)蒸餾法提取濃縮，高效液相色譜法檢測(cè)。色譜柱為symmetry C18柱（150 mm×3.9 mm，5 μm）。檢測(cè)波長(zhǎng)為265 nm，流動(dòng)相為甲醇-水（體積比10:90），流速為1.0 mL/min。結(jié)果5-氟尿嘧啶的最低檢測(cè)限為0.1 μg/mL，峰面積與樣品濃度呈線性關(guān)系（R2=0.999），樣本回收率為97.88%。外層手套和口罩上5-氟尿嘧啶的殘留量隨配置的注射液支數(shù)的增加有增多趨勢(shì)，配置1 h（240支注射液）后，外層手套和口罩上的殘留量分別為3112 μg/雙和0.6781 μg/只，而內(nèi)層口罩、手套，腹前紗布和空氣中殘留濃度均低于檢測(cè)下限。結(jié)論本法穩(wěn)定性好、靈敏度高、干擾??；細(xì)胞毒藥物在靜脈配置中心集中配置能夠達(dá)到有效個(gè)人防護(hù)的目的，提示配置時(shí)間超過1 h需更換外層手套及口罩。

高效液相色譜法；旋轉(zhuǎn)蒸餾；5-氟尿嘧啶殘留量

5-氟尿嘧啶（5-FU）是常用抗腫瘤藥物之一。其活性成分在殺滅或抑制腫瘤細(xì)胞的同時(shí)，也對(duì)機(jī)體正常組織細(xì)胞有殺傷作用，直接威脅著相關(guān)醫(yī)務(wù)人員的身體健康。對(duì)類似藥物進(jìn)行集中配置是有效的職業(yè)防護(hù)手段[1]，隨著靜脈用藥調(diào)配中心（pharmacy intravenousadmixture service，PIVAS） 在我國(guó)醫(yī)院的逐步開展，提供建立健全相關(guān)的管理制度的支撐數(shù)據(jù)迫在眉睫。目前，國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)用薄層色譜法測(cè)定氟尿嘧啶的含量，費(fèi)時(shí)、靈敏度低，重現(xiàn)性差[2]。為此，本研究采用旋轉(zhuǎn)蒸餾濃縮、高效液相色譜，對(duì)靜脈用藥調(diào)配中心配置人員的醫(yī)務(wù)防護(hù)用品上的5-氟尿嘧啶殘留量進(jìn)行測(cè)定，以期為制定細(xì)胞毒藥物集中配置的有效個(gè)人防護(hù)措施提供參考依據(jù)。

1 儀器與試劑

儀器：HPLC1100高效液相色譜儀（德國(guó)Agilent公司）；RE 52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器 （上海亞榮生化儀器廠）；雷磁PHS-2F pH計(jì)（上海精科有限公司）；氣泡吸收管（北京華瑞博遠(yuǎn)科技有限公司）；微量移取器DGAGONMED 20-200 μl（上海大龍醫(yī)療設(shè)備有限公司）；氣體采樣器DDY-5（鹽城鑫寶科技有限公司）。

試劑：5-氟尿嘧啶對(duì)照品（含量＞99.5%，上海國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；氟尿嘧啶注射液（規(guī)格為10 mL：0.25 g/支，批號(hào)1412011，天津金耀氨基酸有限公司生產(chǎn)）；甲醇為色譜純（天津科密歐化學(xué)試劑有限公司）；水為超純水（自制）；醋酸、醋酸鈉為分析純（成都市科龍化工試劑廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 根據(jù)法定藥品說明書、中國(guó)藥典（2010年版）[3]，確定色譜條件如下。 色譜柱：symmetry C18 柱（150 mm×3.9 mm，5 μm）；流動(dòng)相：甲醇-水：（10:90）；檢測(cè)波長(zhǎng)：265 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10 μL。

2.2 最低檢測(cè)限 精密稱取5-氟尿嘧啶對(duì)照品2.5 mg，加水制成10 μg/mL的溶液，搖勻，作為儲(chǔ)備液。臨用前精密量取500 μL置50 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度、搖勻。進(jìn)樣10 μL，記錄譜圖（見圖1），在保留時(shí)間為2.8 min處有明顯譜峰，積分面積為3，滿足積分要求。因此，最低檢測(cè)限為0.1 μg/mL，可滿足本試驗(yàn)檢測(cè)要求。

圖1 最低檢測(cè)限色譜圖

圖2 空白手套色譜圖

2.3 線性關(guān)系的考察 根據(jù)氟尿嘧啶注射液配置過程中手套、口罩等醫(yī)務(wù)用品上的殘留量，并參考有關(guān)文獻(xiàn)[4-5]，需檢測(cè)到0.1 μg/mL。精密量取5-氟尿嘧啶對(duì)照品 10 μg/mL 儲(chǔ)備液 25 mL、5 mL、2.5 mL、500 μL，分別置50 mL容量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度、超聲搖勻，按上述色譜條件，取10 μL注入液相色譜儀測(cè)定。保留時(shí)間在2.80 min，以積分峰面積Y為縱坐標(biāo)、5-氟尿嘧啶濃度X為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程：Y=26.32X+0.994（R2=0.999），表明5-氟尿嘧啶在0.1~10 μg/mL濃度內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.4 干擾實(shí)驗(yàn) 為評(píng)估手套、口罩醫(yī)用物品本身含有成分對(duì)5-氟尿嘧啶濃度測(cè)定的干擾，將一雙未使用的手套排氣扎口，置燒杯中，加0.2 mol/L、pH=8.00醋酸-醋酸鈉緩沖溶液至沒過手套，超聲30 min，將溶液倒入蒸發(fā)瓶，相同方法洗滌手套2次后，溶液一起并入蒸發(fā)瓶。旋蒸濃縮至4 mL左右。按上述色譜條件，測(cè)得色譜圖（見圖2），在5-氟尿嘧啶的保留時(shí)間處無譜峰出現(xiàn)，表明空白醫(yī)用物品對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果無干擾。

2.5 回收率試驗(yàn) 精密取200 μL氟尿嘧啶注射液至50 mL容量瓶，逐級(jí)稀釋配置5 FU為40 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。用注射器量取5 mL，仔細(xì)涂抹在1雙未使用的手套上，自然晾干。采用與2.4節(jié)中的回收殘留5-氟尿嘧啶相同的方法，測(cè)得1雙手套上5-氟尿嘧啶的含量為195.76 μg，回收率為97.88%。

2.6 手套上5-氟尿嘧啶殘留量測(cè)試

2.6.1 配置不同數(shù)量單位注射液 為了考察配置不同數(shù)量單位注射液對(duì)手套藥品殘留量的影響，收集分別配置不同數(shù)量的靜脈注射液后密封保存的手套， 配置注射液數(shù)量分別為 13、20、30、50、60、70、80、160、240支。采用2.4節(jié)中同樣的方法處理上述手套。按設(shè)定的色譜條件，測(cè)定峰面積，計(jì)算5-氟尿嘧啶殘留量結(jié)果如表1所示。在60支前，殘留量與配置藥物數(shù)量呈線性相關(guān)，之后出現(xiàn)正相關(guān)。

表1 配置不同數(shù)量單位注射液外層手套上5-氟尿嘧啶殘留量

2.6.2 內(nèi)層手套對(duì)比實(shí)驗(yàn) 對(duì)配置了不同支數(shù)的內(nèi)層手套采用與2.4節(jié)中相同的方法進(jìn)行5-氟尿嘧啶殘留量的測(cè)試，結(jié)果顯示包括配置了240支注射液（圖3）在內(nèi)的內(nèi)層手套，在保留時(shí)間為2.8 min附近未有吸收峰，表明內(nèi)層手套上5-氟尿嘧啶的殘留量未達(dá)到檢測(cè)限。

2.7 口罩上5-氟尿嘧啶殘留量測(cè)試

2.7.1 配置不同數(shù)量單位注射液 考慮到口罩上5-氟尿嘧啶的殘留量較少，本研究?jī)H測(cè)試配置80支、160支和240支注射液口罩外層上的殘留量。將使用過的外層口罩用剪刀剪碎于燒杯中，采用與2.4中相同的方法進(jìn)行氟尿嘧啶殘留量的濃縮和測(cè)試。測(cè)試結(jié)果見表2。

表2 配置不同數(shù)量單位注射液外層口罩上5-氟尿嘧啶殘留量

2.7.2 內(nèi)層手套對(duì)比實(shí)驗(yàn) 對(duì)配置了不同支數(shù)的內(nèi)層口罩采用與2.4節(jié)相同的方法進(jìn)行5-氟尿嘧啶殘留量的測(cè)試，結(jié)果顯示：包括配置了240支注射液在內(nèi)的內(nèi)層口罩提取濃縮液，未出現(xiàn)特征吸收峰。見圖4。

圖3 配置240支注射液內(nèi)層手套色譜圖

圖4 配置240支注射液內(nèi)層口罩色譜圖

2.8 腹前5-氟尿嘧啶殘留量測(cè)試 考慮到在配置中心工作時(shí)，配置醫(yī)護(hù)人員的腹部最靠近生物安全柜，此處5-氟尿嘧啶含量最高[6]。因此，本研究在醫(yī)護(hù)人員防護(hù)服內(nèi)層腹部位置貼20 cm×30 cm醫(yī)用紗布作為監(jiān)測(cè)點(diǎn)，探究配置240支注射液的殘留量?；厥蘸蜐饪s方法同2.4，測(cè)得液相色譜圖見圖5。在保留時(shí)間為2.80 min左右無明顯吸收峰，表明腹前的5-氟尿嘧啶含量極少，達(dá)不到檢測(cè)限。

2.9 空氣中5-氟尿嘧啶殘留量測(cè)試 本研究采用氣體采樣器進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)采樣，取10 mL的0.2 mol/L、pH=8.00醋酸-醋酸鈉緩沖溶液至氣泡吸收管，根據(jù)說明書進(jìn)行調(diào)試和標(biāo)定。采樣時(shí)首先開啟生物安全柜通風(fēng)30 min。然后以1.2 L/min的流速采集配置1 h（配置240支注射液）過程中的空氣，為保證采樣的有效性，在采樣期間選擇配置醫(yī)護(hù)人員周圍5個(gè)采樣點(diǎn)循環(huán)采樣。收集吸收液直接進(jìn)行測(cè)定，5-氟尿嘧啶殘留量未達(dá)到檢測(cè)限。結(jié)果見圖6。

圖5 配置240支注射液腹部殘留量色譜圖

圖6 配置240支注射液空氣色譜圖

3 討論

3.1 測(cè)試方法的適用性 通過對(duì)該方法的線性關(guān)系、最低檢測(cè)限、回收率考察,結(jié)果表明本實(shí)驗(yàn)所建立的HPLC可用于測(cè)定氟尿嘧啶注射液配置過程藥物殘留量的檢測(cè)。同時(shí)所建立的方法運(yùn)行成本低、方便準(zhǔn)確，干擾小，線性關(guān)系良好，重現(xiàn)性好，回收率高，滿足對(duì)藥品殘留量的監(jiān)控。

3.2 殘留量結(jié)果分析 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，連續(xù)配置注射液 240支（1 h）后，外層口罩殘留量為 0.7 μg/只，而內(nèi)層口罩、防護(hù)服內(nèi)層腹部及空氣中5-氟尿嘧啶提取濃縮液的色譜圖無明顯特征峰，表明其殘留量均達(dá)不到檢測(cè)限。外層手套隨配置的注射液支數(shù)的增加有增多趨勢(shì)，但線性關(guān)系不明顯。分析原因是由于外層手套上殘留量直接來自于配置過程中注射液濺出，并且存在較大的偶然性，因此結(jié)果線性較差。連續(xù)配置達(dá)240支時(shí)，殘留量達(dá)3 mg/mL，而標(biāo)準(zhǔn)注射液為25 mg/mL，濺出量符合常理。因此要求配置人員熟練操作，配置過程中盡量減少藥液濺出，出現(xiàn)藥液濺出或配置時(shí)間超過1 h及時(shí)更換外層手套及口罩。研究表明，5-氟尿嘧啶中毒量與治療量相接近[7]，實(shí)驗(yàn)測(cè)得的殘留量結(jié)果，遠(yuǎn)低于中毒量，且在外層防護(hù)用品上的殘留，不會(huì)與人體直接接觸，因此提示在生物安全柜內(nèi)帶雙層無粉橡膠手套及雙層普通口罩，穿防滲透防護(hù)服能有效避免配置人員的職業(yè)接觸[8]。同時(shí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)要加強(qiáng)醫(yī)務(wù)人員細(xì)胞毒藥物職業(yè)暴露和規(guī)范配置操作的培訓(xùn)，配置人員嚴(yán)格按規(guī)范著裝，嚴(yán)格遵守操作規(guī)范，管理人員合理安排人力資源，盡量減少配置時(shí)間，同時(shí)定期監(jiān)測(cè)生物安全柜各項(xiàng)指標(biāo)，確保運(yùn)行正常。

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R47

B

10.16460/j.issn1008-9969.2016.14.045

2016-03-13

周利瓊（1968-），女，重慶人，本科學(xué)歷，主管護(hù)師。

陳伶俐]