王　發(fā)，李　繼，王　莉

（陜西省食品藥品檢驗所，陜西 西安　710061）

頂空毛細(xì)管氣相色譜法測定伊曲康唑顆粒中乙醇和二氯甲烷殘留量

王發(fā)，李繼，王莉

（陜西省食品藥品檢驗所，陜西 西安710061）

目的 建立測定伊曲康唑顆粒中乙醇和二氯甲烷殘留量的頂空毛細(xì)管氣相色譜法。方法 使用Agilent DB-1301毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.32 mm，0.25 μm）及氫火焰離子檢測器（FID），進(jìn)樣口溫度為220℃，檢測器溫度為250℃；程序升溫，初始溫度為60℃，保持6 min，然后以20℃／min的速率升至220℃，保持2 min；頂空進(jìn)樣，平衡溫度為85℃，平衡時間為40 min。結(jié)果 乙醇和二氯甲烷分離度良好，線性關(guān)系良好（r=0.996 7），平均回收率分別為98.94%和96.29%，RSD分別為0.98%和1.47%（n=6）。結(jié)論 該方法簡便、準(zhǔn)確，適用于伊曲康唑顆粒中乙醇和二氯甲烷殘留量的測定。

伊曲康唑顆粒；乙醇；二氯甲烷；頂空進(jìn)樣法；毛細(xì)管氣相色譜法

伊曲康唑是人工合成的三氮唑類廣譜抗真菌藥物，對深部真菌感染療效好，具有較高的選擇性，良好的抗真菌活性，以及在皮膚黏膜的高蓄積性，臨床廣泛用于治療外陰陰道念珠菌病、花斑癬、皮膚真菌病、真菌性角膜炎和口腔念珠菌病、皮膚癬菌和甲真菌病、系統(tǒng)性真菌感染［1-3］。目前，市售常釋劑型有膠囊、分散片和顆粒，膠囊和分散片劑型標(biāo)準(zhǔn)中均對二氯甲烷殘留量進(jìn)行了檢測［4-5］，而顆粒劑標(biāo)準(zhǔn)［6］中未對二氯甲烷殘留量進(jìn)行控制，相關(guān)測定方法尚未見報道。本研究中結(jié)合顆粒劑的制劑工藝特點，參考文獻(xiàn)［7-10］，建立了伊曲康唑顆粒中乙醇和二氯甲烷的毛細(xì)管氣相色譜測定法，并進(jìn)行了方法學(xué)驗證，可用于其質(zhì)量控制。

1　儀器與試藥

1.1儀器

6890N型氣相色譜儀，氫火焰離子檢測器（FID），G1888型自動頂空進(jìn)樣器（安捷倫公司）；BBS-224S型電子分析天平（賽多利斯公司）。

1.2試藥

6批伊曲康唑顆粒均由A公司提供，根據(jù)其批號不同分別記作S1～S6；二氯甲烷；無水乙醇為分析純，水為高純水。

2　方法與結(jié)果

2.1色譜條件

色譜柱：AgilentDB-1301毛細(xì)管柱（30m×0.32mm，0.25μm）；檢測器：FID檢測器；程序升溫：初始溫度60℃，保持6 min，然后以20℃／min的速率升至220℃，保持2 min；進(jìn)樣口溫度：220℃；檢測器溫度：250℃；頂空進(jìn)樣：平衡溫度85℃，平衡時間40 min，進(jìn)樣時間1 min。

2.2溶液制備

對照品溶液：精密稱取乙醇101.7 mg、二氯甲烷13.10 mg，同置100 mL容量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，作為對照品貯備液。精密量取對照品貯備液10 mL，置100 mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，制成含乙醇和二氯甲烷質(zhì)量濃度分別為0.101 7，0.013 10 g／L的溶液，即得對照品溶液。

供試品溶液：取伊曲康唑顆粒0.10 g，精密稱定，置頂空瓶中，精密加入5 mL水，密封，即得。

2.3方法學(xué)考察

系統(tǒng)適用性試驗：取2.2項下對照品溶液和空白溶劑，按擬訂色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖（見圖1）。可見，各組分分離度均在2.0以上，空白溶劑對測定無干擾。

線性關(guān)系考察：精密量取對照品貯備液適量，用水稀釋成含乙醇0.050 85，0.076 28，0.101 7，0.127 1，0.1525g／L和二氯甲烷0.006550，0.009825，0.01310，0.016 38，0.019 65 g／L的溶液，取上述溶液各5 mL，置頂空瓶中，密封，85℃保持40 min，頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度（X）為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得乙醇、二氯甲烷的回歸方程及線性范圍，見表1。

圖1　高效液相色譜圖

表1　標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程及線性范圍（n=5）

精密度試驗：精密量取對照品溶液5 mL，共6份，置頂空瓶中，密封，頂空進(jìn)樣，記錄色譜圖，測量乙醇和二氯甲烷峰面積。結(jié)果乙醇、二氯甲烷峰面積的 RSD分別為1.20%和1.81%（n=6），表明儀器精密度良好。

重復(fù)性試驗：取編號為S4的樣品6份，各0.10 g，置頂空瓶中，精密加入5 mL水，密封，頂空進(jìn)樣測定。結(jié)果本品中乙醇的含量為0.24%，RSD為1.63%（n=6），二氯甲烷未檢出。

定量限和檢測限試驗：取對照品溶液適量，用水逐步稀釋，按擬訂色譜條件進(jìn)樣測定，記錄色譜圖。以信噪比為10∶1時的對照品質(zhì)量濃度為定量限，乙醇、二氯甲烷的質(zhì)量濃度分別為0.017，0.002 2 g／L。以信噪比為3∶1時的對照品質(zhì)量濃度為檢測限，乙醇、二氯甲烷的質(zhì)量濃度分別為0.008 5和0.001 1 g／L。

耐用性試驗：嘗試了Agilent DB-1301柱（30 m× 0.32 mm，0.25 μm）和 DB-624柱（30 m×0.32 mm，1.8 μm），采用同樣的色譜條件進(jìn)行試驗。結(jié)果，各色譜峰分離度均可達(dá)到要求。

加樣回收試驗：精密稱取已測得乙醇、二氯甲烷殘留量的編號為S4的樣品6份，各0.10 g，分別置頂空瓶中，各精密加入對照品溶液5 mL，密封，頂空進(jìn)樣，測定，記錄色譜圖，計算回收率，結(jié)果見表2。

2.4樣品含量測定

按2.2項下方法，分別制備對照品溶液和供試品溶液，按擬訂色譜條件進(jìn)行測定，按外標(biāo)法計算供試品中乙醇和二氯甲烷的含量。結(jié)果見表3。

3　討論

3.1頂空平衡溫度選擇

在相同質(zhì)量濃度和其他條件不變的情況下，考察了80，85，90℃ 3個頂空溫度對測定的影響。結(jié)果乙醇的峰面積隨頂空溫度的升高而逐漸增大，但二氯甲烷的峰面積在90℃時開始減小，為保證乙醇和二氯甲烷均有較高的檢出限，選擇85℃作為頂空平衡溫度。

3.2色譜柱選擇

在試驗中，比較了不同極性的色譜柱，如中等極性的DB-1301色譜柱和極性的DB-WAX色譜柱。在相同初始溫度條件下，二氯甲烷和乙醇在DB-1301色譜柱上的分離度比DB-WAX色譜柱上高，因此選擇DB-1301色譜柱。

3.3檢測結(jié)果說明

由檢測結(jié)果可見，6批樣品均檢出了乙醇，且有1批樣品已超出了限度，故有必要對其進(jìn)行控制，以確保藥品質(zhì)量的穩(wěn)定可控。

表2　加樣回收試驗結(jié)果（n=6）

表3　伊曲康唑顆粒中乙醇和二氯甲烷含量測定結(jié)果（%）

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［4］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（二部）［M］.北京：

中國醫(yī)藥科技出版社，2010：275.

［5］YBH04232009，國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)［S］.

［6］YBH03922009，國家食品藥品監(jiān)督管理局標(biāo)準(zhǔn)［S］.

［7］張宇佳，鄭穩(wěn)生，方夏琴.氣相色譜法測定伊曲康唑傳遞體有機(jī)溶劑殘留量［J］.醫(yī)藥導(dǎo)報，2013，32（8）：1 075-1 077.

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Content Determination of Ethanol and Dichloromethanein Itraconazole Granulesby Headspace Capillary GC

Wang Fa，Li Ji，Wang Li
（Shaanxi Province Institute for Food and Drug Control，Xi′an，Shaanxi，China710061）

ObjectiveTo establish an Headspace Capillary GC method for the content determination of ethanol and dichloromethane in itraconazole granules.MethodsAgilent DB-1301 capillary column（30 m×0.32 mm，0.25 μm）was used.The inlet temperature was 220℃and the FID detector temperature was 250℃.The oven temperature was initially held at 60℃for 6 min and was then programmed to 220℃ at 20℃／min andheld for 2 min.The head-space sampling was used at heated temperature 85℃ for 40 min.ResultsThe separation for ethanol and dichloromethane was good，with the linear correlation coefficients of 0.996 7.The average recovery rate were 98.94%and 96.29%，RSD=0.98%，1.47%（n=6）.ConclusionThemethod is simple，accurate，and is suitable for the contentdetermination of ethanol and dichloromethane in itraconazole granules.

itraconazole granules；ethanol；dichloromethane；head-space injecting method；capillary GC

R927.12；R978.5

A

1006-4931（2016）20-0047-03

（2015-10-14；

2016-05-26）