■ 韓璐璐 宋先忱 孫亞波 叢玉艷

（1.沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)畜牧獸醫(yī)學(xué)院，遼寧沈陽(yáng)110866；2.白城市畜牧獸醫(yī)技術(shù)指導(dǎo)中心，吉林白城137000；3.遼寧省畜牧科學(xué)研究院，遼寧遼陽(yáng)111000）

日糧養(yǎng)分在瘤胃內(nèi)的降解是反芻動(dòng)物消化的一個(gè)關(guān)鍵過(guò)程，日糧粗蛋白水平可能通過(guò)影響瘤胃內(nèi)環(huán)境和微生物種類(lèi)及數(shù)量進(jìn)而影響?zhàn)B分的瘤胃降解率。然而，目前在這方面的研究結(jié)論不盡一致[1-3]。為了進(jìn)一步明晰不同粗蛋白水平日糧養(yǎng)分在瘤胃中的降解情況，本試驗(yàn)借助體外模擬培養(yǎng)技術(shù)，研究日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)羊養(yǎng)分瘤胃降解率的影響，為優(yōu)化羊的日糧粗蛋白質(zhì)水平提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

瘤胃液：采自6月齡健康的小尾寒羊。

主要試劑：①中性洗滌液：十二烷基硫酸鈉、乙二酸四乙酸二鈉、十水合四硼酸鈉、無(wú)水磷酸氫二鈉、三甘醇、Alpha-淀粉酶、無(wú)水亞硫酸鈉。②酸性洗滌溶液：硫酸、十六烷基三甲基溴化銨。上述試劑均購(gòu)自北京鼎國(guó)昌盛生物技術(shù)有限責(zé)任公司。

主要儀器：體外模擬培養(yǎng)箱（ANKOM DAISY II）、凱氏定氮儀（KjelFlex K-360）、纖維分析儀（ANKOM A2000i）。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)日糧

采用單因素4水平試驗(yàn)設(shè)計(jì)，設(shè)置4個(gè)日糧粗蛋白質(zhì)水平（12%、14%、16%、18%），日糧精粗比為60∶40。各試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 試驗(yàn)日糧組成與營(yíng)養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.3 指標(biāo)測(cè)定

利用體外模擬培養(yǎng)箱，每種粗蛋白質(zhì)水平日糧25個(gè)濾袋（外加一個(gè)空白樣），連續(xù)培養(yǎng)24 h，分別在3、6、9、12、24 h時(shí)取出濾袋，清水沖洗，烘干，稱(chēng)重，測(cè)定干物質(zhì)（DM）、粗蛋白質(zhì)（CP）、中性洗滌纖維（NDF）、酸性洗滌纖維（ADF）的降解率。利用凱氏定氮儀測(cè)定CP含量，利用纖維測(cè)定儀測(cè)定NDF和ADF含量。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示。采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析（One-way ANOVA），多重比較采用Duncan's法。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同粗蛋白質(zhì)水平日糧的DM累計(jì)降解率

各培養(yǎng)時(shí)間不同粗蛋白質(zhì)水平日糧間DM累計(jì)降解率差異均不顯著（P＞0.05，見(jiàn)表2）。可見(jiàn)，日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)DM降解率沒(méi)有顯著影響。

2.2 不同粗蛋白質(zhì)水平日糧的CP累計(jì)降解率

日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)培養(yǎng)9 h內(nèi)的CP降解率影響顯著(P＜0.05，見(jiàn)表3)。培養(yǎng)3～9 h內(nèi)，16%和18%水平的CP降解率顯著高于12%和14%水平(P＜0.05)，14%水平顯著高于12%水平(P＜0.05)，16%和18%水平差異不顯著(P＞0.05)；培養(yǎng)12 h時(shí)，18%水平的CP降解率顯著高于其他水平(P＜0.05)，14%和16%水平顯著高于12%水平(P＜0.05)，14%和16%水平差異不顯著(P＞0.05)；培養(yǎng)24 h時(shí)，各水平之間差異不顯著(P＞0.05)?？梢?jiàn)，提高日糧粗蛋白質(zhì)水平有利于CP降解，16%和18%粗蛋白質(zhì)水平對(duì)提高CP降解率較為有利。

表2 不同粗蛋白質(zhì)水平日糧培養(yǎng)24 h內(nèi)的DM累計(jì)降解率（%）

表3 不同粗蛋白質(zhì)水平日糧培養(yǎng)24 h內(nèi)的CP累計(jì)降解率（%）

2.3 不同粗蛋白質(zhì)水平日糧的NDF累計(jì)降解率

培養(yǎng)3～9 h內(nèi)和24 h時(shí)，日糧粗蛋白質(zhì)16%和18%水平顯著高于12%和14%水平（P＜0.05，見(jiàn)表4），12%和14%水平與16%和18%水平的NDF降解率差異均不顯著（P＞0.05）；培養(yǎng)12 h時(shí)，18%水平顯著高于12%和14%水平（P＜0.05），12%、14%和16%水平與16%和18%水平差異均不顯著（P＞0.05）?？梢?jiàn)，提高日糧粗蛋白質(zhì)水平有利于NDF降解，16%和18%粗蛋白質(zhì)水平對(duì)提高NDF降解率較為有利。

表4 不同粗蛋白質(zhì)水平日糧培養(yǎng)24 h內(nèi)的NDF累計(jì)降解率（%）

2.4 不同粗蛋白質(zhì)水平日糧的ADF累計(jì)降解率

培養(yǎng)3 h時(shí)，日糧粗蛋白質(zhì)18%水平ADF降解率顯著高于其他水平（P＜0.05，見(jiàn)表5），16%水平顯著高于12%和14%水平（P＜0.05），12%和14%水平差異不顯著（P＞0.05）；培養(yǎng)6 h時(shí)，16%和18%水平顯著高于12%和14%水平（P＜0.05），12%和14%與16%和18%之間差異不顯著（P＞0.05）；培養(yǎng)9 h時(shí)，18%水平ADF降解率顯著高于其他水平（P＜0.05），14%和16%水平顯著高于12%水平（P＜0.05），14%和16%水平差異不顯著（P＞0.05）；培養(yǎng)12 h時(shí)，18%顯著高于其他水平（P＜0.05），16%顯著高于12%和14%水平（P＜0.05），12%和14%水平差異不顯著（P＞0.05）；培養(yǎng)24 h時(shí)，16%和18%水平顯著高于12%、14%水平（P＜0.05），12%和14%與16%和18%水平差異均不顯著（P＞0.05）?？梢?jiàn)，提高日糧粗蛋白質(zhì)水平有利于ADF降解，16%和18%粗蛋白質(zhì)水平對(duì)提高ADF降解率較為有利。

表5 不同粗蛋白質(zhì)水平日糧培養(yǎng)24 h內(nèi)的ADF累計(jì)降解率（%）

3 討論

3.1 日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)DM降解率的影響

Yuangklang等[4]和Chen等[5]通過(guò)體外發(fā)酵試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，日糧蛋白質(zhì)水平對(duì)肉牛瘤胃DM降解率影響不顯著，Ghorbani等[6]和Norrapoke等[7]利用奶牛瘤胃液進(jìn)行的體外發(fā)酵試驗(yàn)也得到相似的結(jié)論。本試驗(yàn)利用體外發(fā)酵試驗(yàn)同樣發(fā)現(xiàn)，日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)綿羊瘤胃DM降解率沒(méi)有顯著影響。由此可見(jiàn)，日糧粗蛋白質(zhì)水平升高時(shí)，DM的降解量提高，但不足以提高它的降解率。

3.2 日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)CP降解率的影響

張永發(fā)研究發(fā)現(xiàn)，飼喂粗蛋白質(zhì)水平為8%、10%、12%、14%的四種顆粒日糧，綿羊CP降解率差異不顯著[1]。而本試驗(yàn)卻發(fā)現(xiàn)，隨著日糧粗蛋白質(zhì)水平的升高，CP降解率增大。這可能由于日糧蛋白質(zhì)含量增加可使瘤胃氨態(tài)氮含量升高，這為微生物的合成提供大量氮源，韓璐璐等[8]研究表明，瘤胃內(nèi)的微生物數(shù)量增加，促進(jìn)CP降解。

3.3 日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)NDF降解率的影響

張永發(fā)[1]研究指出，粗蛋白質(zhì)水平（8%、10%、12%、14%）對(duì)綿羊的NDF瘤胃降解率影響不顯著；趙智華等[2]研究發(fā)現(xiàn)，粗蛋白質(zhì)水平（8.23%、10.42%、12.52%）對(duì)山羊的NDF瘤胃降解率沒(méi)有顯著影響；然而徐俊等[3]報(bào)道表明，在體外培養(yǎng)條件下日糧粗蛋白質(zhì)水平（14%、16%、18%）可顯著提高奶牛NDF降解率。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，日糧粗蛋白含量升高，瘤胃NDF降解率顯著增大，這與徐俊等報(bào)道的結(jié)論相一致。上述各研究結(jié)果間存在的差異可能是由試驗(yàn)日糧粗蛋白質(zhì)水平、試驗(yàn)動(dòng)物和試驗(yàn)條件的差異所導(dǎo)致的。

3.4 日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)ADF降解率的影響

本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，隨日糧蛋白質(zhì)水平提高ADF降解率增加，這與Broderick[9]與孔祥浩等[10]的研究結(jié)果一致。這可能是由于日糧粗蛋白質(zhì)水平升高導(dǎo)致瘤胃微生物對(duì)纖維利用能力增強(qiáng)的結(jié)果。

4 結(jié)論

日糧粗蛋白質(zhì)水平對(duì)羊瘤胃DM降解率沒(méi)有顯著影響，但對(duì)CP、NDF和ADF降解率影響顯著。提高羊日糧的粗蛋白質(zhì)水平有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在瘤胃中降解，16%粗蛋白質(zhì)水平對(duì)提高日糧養(yǎng)分瘤胃降解率較為適宜。