陳一鳴

(內(nèi)蒙古赤峰市獸藥監(jiān)察所,內(nèi)蒙古赤峰 024000)

標(biāo)記免疫分析在獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

陳一鳴

(內(nèi)蒙古赤峰市獸藥監(jiān)察所,內(nèi)蒙古赤峰 024000)

為探討分析標(biāo)記免疫分析技術(shù)在農(nóng)獸藥殘留監(jiān)測(cè)工作中的實(shí)踐應(yīng)用價(jià)值，筆者對(duì)當(dāng)下最為常用的幾種標(biāo)記免疫分析技術(shù)進(jìn)行簡(jiǎn)單地介紹、對(duì)比和分析。同時(shí)，對(duì)各種標(biāo)記免疫分析技術(shù)在獸藥殘留監(jiān)測(cè)的應(yīng)用方法與應(yīng)用價(jià)值展開(kāi)了討論。并最終認(rèn)為標(biāo)記免疫分析技術(shù)在農(nóng)獸藥殘留監(jiān)測(cè)的應(yīng)用中操作簡(jiǎn)單、特異性強(qiáng)，能有效保障農(nóng)獸產(chǎn)品的食用安全性，其實(shí)際應(yīng)用價(jià)值高，值得在相關(guān)領(lǐng)域內(nèi)推廣應(yīng)用。

標(biāo)記免疫分析 農(nóng)獸產(chǎn)品 藥殘留 食品安全

近年來(lái)，隨著人們生活水平的提高，人們對(duì)食品安全的關(guān)注度越來(lái)越高。而農(nóng)產(chǎn)品以及環(huán)境中的農(nóng)藥、獸藥殘留成分通常會(huì)成為影響人們身體健康的重要危害，是食品安全中的一項(xiàng)重要危害因素[1]。當(dāng)下對(duì)農(nóng)獸藥殘留的監(jiān)測(cè)手段較多，但實(shí)際應(yīng)用中主要還是以色譜、色質(zhì)以及光譜等理化手段進(jìn)行檢測(cè)。這種傳統(tǒng)的理化檢測(cè)手段存在檢測(cè)樣品少、檢測(cè)成本高、費(fèi)時(shí)等諸多弊端。同時(shí)在檢測(cè)過(guò)程中所產(chǎn)生的大量的有機(jī)溶液也會(huì)對(duì)環(huán)境產(chǎn)生污染。免疫分析法是近年出現(xiàn)的一中新生的藥殘分析技術(shù)，近年來(lái)在相關(guān)領(lǐng)域內(nèi)得到了廣泛的推廣應(yīng)用。為探討分析標(biāo)記免疫分析技術(shù)在對(duì)農(nóng)獸藥殘留的檢測(cè)中的應(yīng)用價(jià)值與應(yīng)用方法，本文對(duì)當(dāng)下應(yīng)用較廣的幾種標(biāo)記免疫分析技術(shù)進(jìn)行了總結(jié)和分析，其具體情況如下：

1 放射免疫分析技術(shù)

放射免疫分析技術(shù)是最早出現(xiàn)的標(biāo)記免疫檢測(cè)方法，可分為競(jìng)爭(zhēng)性放射免疫分析技術(shù)與非競(jìng)爭(zhēng)性放射免疫分析技術(shù)。這種標(biāo)記免疫技術(shù)出現(xiàn)最早，且早期主要是應(yīng)用于糖尿病患者的血漿胰島素含量的測(cè)定中[2]。競(jìng)爭(zhēng)性放射免疫分析技術(shù)也是較為傳統(tǒng)的放射免疫分析技術(shù)，該技術(shù)是應(yīng)用放射性核素標(biāo)記抗原與被檢測(cè)樣本中的未標(biāo)記抗原進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，然后通過(guò)測(cè)定復(fù)合物的放射性強(qiáng)度，來(lái)計(jì)算待測(cè)物抗原量。而非競(jìng)爭(zhēng)性放射免疫則是通過(guò)采用非競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的方式來(lái)檢測(cè)相關(guān)抗原量。近年來(lái)隨著磁性微粒子的發(fā)現(xiàn)和應(yīng)用，也可以通過(guò)磁性微粒子表面的活性基因，經(jīng)共價(jià)鍵結(jié)合抗體制做出相對(duì)穩(wěn)定的抗體，在放射性免疫分析應(yīng)用中，能簡(jiǎn)化其操作程序，同時(shí)也可有效縮短其反應(yīng)時(shí)間，同時(shí)也為放射性免疫分析的自動(dòng)化提供了技術(shù)支撐。通過(guò)大量的實(shí)踐研究證實(shí)，放射性免疫分析技術(shù)對(duì)DDT、馬拉硫磷、青霉素、氯霉素、克百威、百草枯等農(nóng)獸藥殘具有較高的檢測(cè)價(jià)值。

2 熒光免疫分析技術(shù)

熒光免疫分析技術(shù)是以熒光物質(zhì)作為標(biāo)記物，根據(jù)其免疫反應(yīng)對(duì)檢測(cè)樣本做出檢測(cè)結(jié)果。熒光免疫有熒光偏振免疫分析、熒光增強(qiáng)免疫分析、時(shí)間分辨熒光免疫分析、熒光猝滅免疫分析等多種分析方法[3]。熒光免疫分析最早應(yīng)用于對(duì)蛋白的定性與跟蹤應(yīng)用中。但近年來(lái)隨著相關(guān)技術(shù)的成熟，該技術(shù)對(duì)小分子化合物的定量測(cè)定也具有較高的應(yīng)用價(jià)值。在幾種熒光免疫分析技術(shù)中，主要以時(shí)間分辨熒光免疫分析法應(yīng)用最多，其靈敏度也相對(duì)更高。時(shí)間分辨熒光免疫分析法主要以熒光壽命較長(zhǎng)的三價(jià)鑭系稀土離子作為熒光標(biāo)記物，利用時(shí)間分辨熒光技術(shù)的時(shí)間延長(zhǎng)效應(yīng)，將其特異性與非特異性熒光進(jìn)行分開(kāi)檢測(cè)。這種分開(kāi)檢測(cè)的方式可有效降低背景熒光的干擾，再加上鑭系熒光光譜較窄，也可促進(jìn)其進(jìn)其進(jìn)一步降低本地，從而提高其靈敏度與線性范圍。該檢測(cè)技術(shù)主要對(duì)敵草隆、沙丁胺醇、甲草胺等農(nóng)獸藥的檢測(cè)應(yīng)用多，而較少有對(duì)其他農(nóng)獸藥的應(yīng)用報(bào)道。而其他幾種熒光免疫分析技術(shù)也對(duì)部分的農(nóng)獸藥應(yīng)用較多，如磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺二甲基嘧啶等，對(duì)其農(nóng)獸藥檢測(cè)的應(yīng)用較少。

3 酶免疫分析技術(shù)

酶免疫分析技術(shù)主要是在抗體或抗原上標(biāo)記特定的酶，并依據(jù)抗體或抗原的反應(yīng)特異性以及酶催化顯色反應(yīng)對(duì)相關(guān)農(nóng)獸藥殘留進(jìn)行檢測(cè)。酶聯(lián)免疫吸附分析法是當(dāng)下應(yīng)用最為廣泛的一種酶免疫分析技術(shù)。其主要是采用間接競(jìng)爭(zhēng)和包被抗體或抗原直接競(jìng)爭(zhēng)方式進(jìn)行酶聯(lián)免疫吸附測(cè)試。直接競(jìng)爭(zhēng)法是將抗體或抗原包被在固相載體中表面，加入被檢測(cè)物和酶標(biāo)記的抗原或抗體。待被檢測(cè)物與酶標(biāo)抗體或抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合到固相載體上后，通過(guò)洗滌去除多余的游離物質(zhì)，根據(jù)固相載體上酶催化特定的底物顯色確定待測(cè)物質(zhì)的量。而間接競(jìng)爭(zhēng)法是將人工抗原固相，用同一酶標(biāo)二抗，通過(guò)改變包被抗原對(duì)相應(yīng)的待測(cè)抗體進(jìn)行檢測(cè)。酶免疫標(biāo)記法可對(duì)有機(jī)磷、擬除蟲(chóng)菊酯、三嗪類(lèi)、磺胺類(lèi)、氟喹諾酮等多種農(nóng)獸藥殘留進(jìn)行檢測(cè)，其應(yīng)用范圍相對(duì)較廣、敏感性較強(qiáng)。

4 討論

食品安全問(wèn)題關(guān)乎廣大人民群眾的身體健康與生命安全，杜絕食品安全問(wèn)題不僅需要相關(guān)部門(mén)在源頭上做好監(jiān)督、管控，同時(shí)也需要通過(guò)科學(xué)可靠的檢測(cè)技術(shù)，確保相關(guān)產(chǎn)品農(nóng)獸藥殘留滿足要求。雖然當(dāng)下檢測(cè)農(nóng)獸藥殘留的相關(guān)技術(shù)較多，但也均存在一定的局限性[4]。標(biāo)記免疫分析技術(shù)作為一種超微量測(cè)定術(shù)，其在農(nóng)獸藥檢測(cè)的靈敏度、特異性、操作性、實(shí)用性、安全性以及環(huán)保性能方面均具有更大優(yōu)勢(shì)。標(biāo)記免疫分析法，種類(lèi)較多，應(yīng)用范圍廣，當(dāng)下標(biāo)記免疫分析法在農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)的應(yīng)用已經(jīng)開(kāi)始推廣，市場(chǎng)上也開(kāi)始有各類(lèi)標(biāo)記免疫分析的試劑盒以及試紙條產(chǎn)品[5]。但該技術(shù)在農(nóng)獸藥殘檢測(cè)領(lǐng)域的研究尚有較大的深入研究空間，還值得我們進(jìn)一步進(jìn)行開(kāi)發(fā)和完善。

[1] 楊代鳳，劉騰飛，鄧金花，等.標(biāo)記免疫分析在農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28（30）：218-225..

[2] 田瑋.基于量子點(diǎn)的熒光免疫分析在農(nóng)獸藥殘留檢測(cè)中的應(yīng)用研究[J].吉林農(nóng)業(yè)C版，2012，11（9）：79-80.

[3] 金茂俊，王靜，楊麗華，等.化學(xué)發(fā)光免疫分析方法在食品安全檢測(cè)中的研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測(cè)學(xué)報(bào)，2014，5（3）：840-845.

[4] 金茂俊，杜鵬飛，楊麗華，等.基于磁性納米粒子的免疫分析方法在食品安全檢測(cè)中的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2013，14（22）：9431-9432，9439.

[5] 薩仁托雅，張峰，鄭有虎，等.化學(xué)發(fā)光免疫分析與酶聯(lián)免疫分析法檢測(cè)水產(chǎn)品藥物殘留的比較研究[J].大連海洋大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，7（5）：486-491.