羅紅波
摘 要: 紅棗含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),是上等的滋補(bǔ)食品,同時(shí)在中醫(yī)藥學(xué)上有很高實(shí)用價(jià)值。我國(guó)是全球最大的棗樹種植國(guó),也是棗及棗制品的主要產(chǎn)地,開發(fā)紅棗制品對(duì)于新常態(tài)下實(shí)現(xiàn)縣域經(jīng)濟(jì)的發(fā)展具有重要意義。本文主要研究制得棗醋的粗提物對(duì)·OH 自由基和O2-·自由基均具有明顯的清除作用,具有較好的抗氧化性。
關(guān)鍵詞:紅棗醋 抗氧化性 研究
中圖分類號(hào):TS27 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1003-9082(2016)09-0010-01
紅棗采用發(fā)酵工藝制得的紅棗香醋酸味柔和,香氣優(yōu)雅、飽滿,回味悠長(zhǎng)。發(fā)酵過程不僅將果實(shí)中的淀粉、糖類轉(zhuǎn)化成有機(jī)酸類物質(zhì)等,果膠、有機(jī)酸、色素、維生素、芳香物質(zhì)等其他成分也發(fā)生一系列的生化反應(yīng),另外棗醋還具有一定的抗氧化作用,對(duì)于自由基的清除具有重要作用。因此,在本文,主要研究紅棗醋的抗氧化特性,以更全面的了解紅棗醋的功能與特性。
一、實(shí)驗(yàn)材料與儀器
1.實(shí)驗(yàn)材料
紅棗醋。
2.實(shí)驗(yàn)試劑
本試驗(yàn)所用主要試劑見表1:
3.實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備
本試驗(yàn)所用儀器與設(shè)備除表2:
二、棗醋抗氧化性能的測(cè)定
本試驗(yàn)主要通過考察棗醋多酚對(duì)自由基的清除作用來(lái)檢驗(yàn)棗醋抗氧化性能,主要實(shí)驗(yàn)方法如下:
1.試劑配制
2mol/L HCl溶液:取濃鹽酸 42mL,用去離子水定容至 500mL。
45mol/L 鄰苯三酚溶液:準(zhǔn)確算取預(yù)經(jīng)升華純化的分析純級(jí)鄰苯三酚 56.8mg,用0.05mol/L,于 4℃冰箱中備用,測(cè)定前于 25℃水溶液中預(yù)熱 20min。
Tris-HCl 緩沖液:取 Tris30.3g,溶于 300mL 蒸餾水中,加 2mol/L HCl 62mL 和100mol/L 二乙烯三胺五乙酸 50mL,加水定容至 500mL,再用去離子水稀釋 10 倍。
0.75mol/L 的鄰二氮菲溶液:取鄰二氮菲 1.487g,溶于 100mL 無(wú)水乙醇中,使用時(shí)用重蒸水稀釋 100 倍。
2.棗醋對(duì)羥基·OH 自由基清除能力測(cè)定
2.1取 0.75mol/L 的鄰二氮菲溶液 1mL 于試管中,依次加入磷酸鹽緩沖液(pH7.4)液 2mL 和蒸餾水 1mL,充分混合后,加 0.75mmol/L 硫酸亞鐵液 1mL,混勻后加0.01% H2O2 1mL,于 37℃下 60min,于 536nm 下測(cè)定吸光值(Ap);
2.2按以上同樣方法將 1mL 蒸餾水代替 1mL H2O2,測(cè)定吸光值(Ab);
2.3按以上同樣方法,將 1mL 樣液代替 1 中得 1mL 蒸餾水測(cè)定吸光值(As)計(jì)算·OH 自由基清除率:
清除率=[(As-Ap)/(Ab -Ap)] ×100% (1)
3.棗醋多酚對(duì)超氧陰離子O2-·自由基清除能力測(cè)定
3.1量取 4.5mL 的 Tris-HC(l三羥甲基氨基甲烷-鹽酸) 緩沖溶液 50mmol/L(pH8.2)和棗醋多酚提取液 4.2mL 于試管中,混合均勻后放置室溫 10 min 后,在 325 nm 處測(cè)定吸光度(B)。
3.2量取 4.5mL Tris-HCl 緩沖溶液和 3mL 鄰苯三酚(7mmol/L),再加入 4.2mL 蒸餾水,使其混合均勻后馬上倒入比色皿中,此時(shí)開始計(jì)時(shí),每隔 30s 測(cè)定鄰苯三酚在 325 nm的吸光度(Ao),記錄 3 min。
3.3根據(jù)上述方法,量取 4.5mL Tris-HCl 緩沖溶液和 4.2mL 棗醋多酚提取液,混合均勻后放置室溫 10 min 后,馬上加 3mL 鄰苯三酚,此時(shí)開始計(jì)時(shí),每隔 30s 測(cè)定鄰苯三酚在 325 nm 測(cè)樣品與鄰苯三酚反應(yīng)后的吸光度(A),此實(shí)驗(yàn)同樣重復(fù) 3 次,求平均值。其中空白管以 10mmol/L HCl 代替 3mL 鄰苯三酚。以上測(cè)得的平均值都按式5.2來(lái)計(jì)算超氧陰離子自由基清除率:
清除率(%)={1-[(A-B)/Ao]}×100% (2)
三、棗醋的抗氧化性能結(jié)果
1.對(duì)·OH 自由基的清除作用
測(cè)定 100mL 棗醋提取物中多酚對(duì)清除羥自由基的能力,棗醋提取物對(duì)羥自由基的清除作用結(jié)果見表3:
根據(jù)公式1,代入表3中的數(shù)據(jù),可得對(duì)·OH 自由基的清除率為80.20%,清除效果比較明顯。
2.對(duì) O2-·自由基的清除作用
測(cè)定 100mL 棗醋提取物中多酚對(duì)清除羥自由基的能力,棗醋提取物對(duì)超氧陰離子的清除作用結(jié)果見表4。
根據(jù)公式2,代入表4中的數(shù)據(jù),可得對(duì)O2-·自由基的清除率為54.34%,清除效果比較明顯。
3.棗醋多酚濃度對(duì)自由基的清除作用
根據(jù) 100mL 棗醋提取物中多酚含量,采用稀釋的方法得到不同多酚含量,測(cè)得多酚含量(棗醋多酚的約等值)在 5mg、11mg、15mg、23mg、28mg 時(shí),對(duì)自由基的清除率結(jié)果見圖1。
如圖1所示,為不同含量棗醋提取物對(duì)·OH自由基和O2-·自由基的清除情況。圖中數(shù)據(jù)表明,隨著樣品含量的增高,對(duì)兩種自由基的清除作用均顯著增強(qiáng)。
四、總結(jié)
本文對(duì)經(jīng)最佳發(fā)酵工藝生產(chǎn)的棗醋抗氧化性進(jìn)行了研究。研究發(fā)現(xiàn)棗醋粗提物對(duì)·OH 自由基和O2-·自由基均具有明顯的清除作用,清除率分別可達(dá)到80.20%和54.34%;通過考察棗醋多酚濃度對(duì)自由基的清除作用發(fā)現(xiàn),多酚類物質(zhì)有較好的還原能力和清除·OH 自由基、O2-·自由基能力,不同含量的棗醋提取物,隨著多酚含量的增加,清除自由基能力有所升高,驗(yàn)證了棗醋的抗氧化性。