陶志英++鄧勇輝++李彩剛++張桂芳++丁立云++王慶志

doi：10.15889/j.issn.1002-1302.2016.10.088

摘要：顯微觀察并拍攝河蜆從受精卵到蜆苗發(fā)育過(guò)程的形態(tài)特征，河蜆的受精卵為黑色球形，卵內(nèi)徑約為 100 μm；3～7 h后擔(dān)輪幼蟲出膜，再經(jīng)面盤幼蟲到D形幼蟲，此時(shí)殼長(zhǎng)約200 μm；隨著內(nèi)部器官組織的生長(zhǎng)發(fā)育及外部形態(tài)的變化，30 d后成稚貝，50 d后可見(jiàn)蜆苗。

關(guān)鍵詞：受精卵；蜆苗；發(fā)育過(guò)程；形態(tài)特征

中圖分類號(hào)： S961.2文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A文章編號(hào)：1002-1302（2016）10-0305-03

收稿日期：2016-12-13

項(xiàng)目基金：江西省科技支撐計(jì)劃（編號(hào)：20132BBF60055）。

作者簡(jiǎn)介：陶志英（1983—），女，安徽桐城人，助理研究員，主要從事水產(chǎn)生態(tài)和繁養(yǎng)殖研究。

通信作者：鄧勇輝。E-mail：161628535538@qq.com。河蜆（Corbicula fluminea）為瓣鰓綱真瓣鰓目異齒亞目蜆科蜆屬雙殼類軟體動(dòng)物，其攝食底棲藻類、浮游生物、有機(jī)碎屑等。河蜆具有很強(qiáng)的耐饑和耐旱力，能很好地富集城市污泥、水體重金屬、水體富營(yíng)養(yǎng)化、農(nóng)藥等水體有機(jī)污染物，被作為生態(tài)修復(fù)生物而受到環(huán)境保護(hù)者的重視和開(kāi)發(fā)運(yùn)用。河蜆是理想的環(huán)境指示生物，對(duì)穩(wěn)定生態(tài)平衡起著重要作用，是生態(tài)系統(tǒng)中重要的一員。然而，近年來(lái)我國(guó)河蜆大量出口、水生物資源利用和漁業(yè)結(jié)構(gòu)不合理、過(guò)度捕撈、湖泊污染嚴(yán)重、盲目圍墾等問(wèn)題導(dǎo)致天然資源日趨枯竭，制約了河蜆產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，開(kāi)展河蜆的人工繁殖和苗種培育工作勢(shì)在必行。已有學(xué)者對(duì)河蜆人工繁殖中胚胎發(fā)育的特征進(jìn)行了報(bào)道，顧敏強(qiáng)等綜合了龔惠卿等的研究結(jié)果[1]，對(duì)河蜆胚胎發(fā)育分期報(bào)道了不同發(fā)育階段的特點(diǎn)[2]。王慶志等系統(tǒng)論述了大洋河河蜆性腺發(fā)育、生殖周期、胚胎發(fā)育的詳細(xì)內(nèi)容[3]。Kraemer等從性別機(jī)制與繁殖方式相關(guān)性的角度報(bào)道了河蜆的胚胎發(fā)育[4]。本試驗(yàn)在人工繁殖成功的基礎(chǔ)上，連續(xù)觀察河蜆胚胎發(fā)育及胚后發(fā)育的全過(guò)程，并以顯微拍照進(jìn)行記錄，詳細(xì)描述了各階段的特征，旨在為河蜆受精卵孵化和蜆苗培育提供依據(jù)。

1材料與方法

于2015年5—7月分批次對(duì)河蜆進(jìn)行人工繁殖。親本取自青嵐湖外湖，采用陰干、化學(xué)浸洗聯(lián)合流水沖洗刺激的方法誘導(dǎo)催產(chǎn)獲得受精卵，在pH值為6.22～8.03、室內(nèi)水溫為23.5～28.0 ℃的條件下連續(xù)充氧孵化；每天換水1次，每次換水量為1/3，投喂小球藻和過(guò)濾池塘水收集藻類，不定時(shí)取樣進(jìn)行顯微鏡觀察拍照并記錄。

2結(jié)果與分析

2.1胚胎發(fā)育膜內(nèi)階段

受精卵：于2015年6月1日傍晚刺激誘導(dǎo)，于6月2日11：00左右見(jiàn)到白色涕狀物（圖1-A），顯微鏡下呈球形、黑色，外表包被1層膠質(zhì)卵膜即為受精卵，卵內(nèi)徑（不含卵膜）約為100 μm（圖1-B）。

桑椹期：受精后5～7 h，受精卵經(jīng)細(xì)胞裂殖呈桑椹形狀（圖1-C）。

擔(dān)輪幼蟲期：受精后8～14 h，早、中期見(jiàn)倒錐形，頂端有1束漸細(xì)長(zhǎng)纖毛，最長(zhǎng)的形似長(zhǎng)鞭毛被稱為頂毛，在膜內(nèi)旋轉(zhuǎn)，鞭毛不斷撞擊卵膜，帶同膜作旋轉(zhuǎn)運(yùn)動(dòng)。后期中上端有纖毛環(huán)，破膜而出，清晰可見(jiàn)。在水中形似桃子、蘑菇云或陀螺，并作滾動(dòng)式運(yùn)動(dòng)（圖1-D）。

2.2胚胎發(fā)育出膜后階段

面盤幼蟲期：受精后24～48 h呈圓盤狀，面盤外形閉合但不能完全閉合，趨向D形，頂毛和纖毛環(huán)逐漸消失（圖1-E、圖1-F）。

D形幼蟲期：受精后48～72 h可見(jiàn)D形幼蟲。早期殼呈D形，薄而透明，可見(jiàn)內(nèi)部結(jié)構(gòu)，殼長(zhǎng)約為200 μm，棒狀足快速向前伸縮，帶動(dòng)D形殼作運(yùn)動(dòng)（圖1-G、圖1-H）。 中、后期頂部殼腺清晰可見(jiàn)，殼形趨向卵圓形。可見(jiàn)內(nèi)部不停擺動(dòng)的胃，內(nèi)有食物呈綠色，透明的心臟持續(xù)跳動(dòng)，殼邊緣可見(jiàn)放射狀外套膜雛形，隱約可見(jiàn)同心生長(zhǎng)紋與殼面放射肋，進(jìn)水口已形成（圖1-I、圖1-J）。鏡檢殼長(zhǎng)、殼寬分別為374、335 μm（圖1-J）。

殼頂幼蟲期：受精后7～11 d，早期腸、胃、心臟的內(nèi)部結(jié)構(gòu)更清晰，可見(jiàn)胃部褐色晶桿攪動(dòng)，圍心腔心室有規(guī)則地收縮，圍心腔由透明膜包裹；可見(jiàn)殼頂部、絞合部雛形（圖1-K）。中期殼頂部凸出，殼形趨向三角卵圓形，進(jìn)水口、出水口器官清晰明顯且易區(qū)分。足變扁平，足前段似三角形，伸縮劃動(dòng)作匍匐運(yùn)動(dòng)（圖1-L）。后期可見(jiàn)足基部的眼點(diǎn)，足更加扁平，伸縮足似三角形刀片，呈純白色，其邊緣薄而透明；進(jìn)出口、出水口器官與外套膜逐漸融合，只見(jiàn)口邊纖毛裸露，外套

膜及鰓清晰可見(jiàn)，絞合部清晰，殼頂顯著凸出，同心生長(zhǎng)紋與殼面放射肋更清晰，殼形呈明顯三角卵圓形（圖1-M至圖1-O）。鏡檢殼長(zhǎng)、殼寬分別為2 523、2 114 μm（圖1-O）。

2.3埋棲階段

稚貝：受精后30～37 d，足更扁、更大，與成年蜆斧足一致；同心生長(zhǎng)紋與殼面放射肋顯著，殼后端近殼頂處只可見(jiàn)胃部晶桿擺動(dòng)；進(jìn)出水口、外套膜合入殼內(nèi)，殼頂膨凸，貝殼呈金黃色（圖1-P至圖1-R）。

蜆苗（幼蜆）：受精后50～57 d，殼頂、絞合部更加結(jié)實(shí)，整體趨向等邊三角形，殼面出現(xiàn)斑點(diǎn)和斑紋，與成年蜆一致（圖1-S）。

受精后60～67 d，鏡檢殼長(zhǎng)、殼寬分別為669～1 050、565～938 μm（圖1-T）。受精后90 d，鏡檢殼長(zhǎng)、殼寬、兩殼膨脹處分別約為4、3、1.5 mm（圖2-Ⅰ至圖2-Ⅲ）。受精后 110 d，鏡檢殼長(zhǎng)、殼寬、兩殼膨脹處分別約為5、3、2 mm（圖2-Ⅳ至圖2-Ⅵ）。受精后156 d，鏡檢殼長(zhǎng)、殼寬分別約為8、7 mm，距殼寬為16 mm的成年蜆需幾個(gè)月的生長(zhǎng)（圖2-Ⅶ、圖2-Ⅷ）。活動(dòng)中的蜆苗見(jiàn)圖2-Ⅸ、圖2-Ⅹ。

3結(jié)論與討論

3.1受精卵到D形幼蟲所需時(shí)間

本研究于受精后48～72 h見(jiàn)到D形幼蟲，與顧敏強(qiáng)等報(bào)道的36～72 h[1]相近，與王慶志等報(bào)道的80～100 h[3]相差較多。造成差異的原因可能為水溫不同，顧敏強(qiáng)等的研究中水溫為23～26 ℃[1]，王慶志等的研究中水溫為20～22 ℃[3]，本研究中水溫為23.5～28.0 ℃。

3.2青嵐湖外湖河蜆的繁殖方式

本研究中河蜆卵排出后受精為白色涕狀黏連物，很快沉底散開(kāi)并消失。卵裂階段在膜內(nèi)進(jìn)行，至擔(dān)掄幼蟲出膜，在水中到處游動(dòng)，逐漸沉底長(zhǎng)成D形幼蟲?？梢?jiàn)，青嵐湖外湖河蜆將成熟精卵直接排出，在體外完成受精和胚胎發(fā)育，因此其繁殖方式為非孵育型[5]。吳小平研究發(fā)現(xiàn)，陳家湖河蜆內(nèi)鰓腔未見(jiàn)幼蟲，因此其繁殖方式為非孵育型[6]，本研究結(jié)論與之一致。

3.3蜆苗生長(zhǎng)的影響因素

常亞青等研究發(fā)現(xiàn)，河蜆胚胎經(jīng)15～30 d可發(fā)育為幼蜆，3個(gè)月蜆苗殼長(zhǎng)達(dá)1.1 cm[7]。在本研究中，河蜆胚胎發(fā)育30～37 d見(jiàn)稚貝，50～57 d見(jiàn)幼蜆，3～4個(gè)月蜆苗殼長(zhǎng)僅為0.4～0.5 cm，可能的原因?yàn)樵囼?yàn)中餌料不足。由研究結(jié)果可知，殼頂幼蟲后期殼長(zhǎng)大于蜆苗殼長(zhǎng)，蜆苗殼長(zhǎng)也各不相同，這是發(fā)育不同步的結(jié)果。河蜆胚胎從D形幼蟲到幼苗殼長(zhǎng)的生長(zhǎng)及其影響因素，以及胚胎發(fā)育所需的有效積溫有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn)：

[1]龔惠卿，王眾，孫金福，等. 河蜆Corbicula fluminea（Müller）人工繁殖技術(shù)研究[J]. 現(xiàn)代漁業(yè)信息，2001，16（1）：22-23，37.

[2]顧敏強(qiáng)，王眾. 河蜆胚胎發(fā)育觀察及分期的探討[J]. 現(xiàn)代漁業(yè)信息，2001，16（10）：28-29.

[3]王慶志，常亞青. 大洋河河蜆的繁殖生物學(xué)研究[J]. 大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2010，25（1）：8-13.

[4]Kraemer R L，Galloway M L. Larval development of Corbicula fluminea（Müller）（Bivalvia：Corbiculacea）：an app raisal of its heterochrony[J]. American Malacological Bulletin，1986，4（1）：61-79.

[5]劉月英，張文珍，王躍先，等. 中國(guó)淡水經(jīng)濟(jì)動(dòng)物志：淡水軟體動(dòng)物[M]. 北京：科學(xué)出版社，1979：120-123.

[6]吳小平. 河蜆（Corbicula fluminea）和江蜆（C.fluminslis）的種群生態(tài)學(xué)比較[M]//貝類學(xué)論文集. 北京：科學(xué)出版社，1990：54-61.

[7]常亞青，沈和定，鐘幼平，等. 貝類增養(yǎng)殖學(xué)[M]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社，2007：140-141.