根據(jù)萌發(fā)率和出苗率篩選高粱種子萌發(fā)期耐低溫材料

張麗霞+張靈敏+霍巖

摘要：將從全球收集的631份高粱材料進(jìn)行8 ℃低溫脅迫處理14 d，再統(tǒng)計(jì)種子相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率；再將相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率都達(dá)到一級(jí)的49份材料進(jìn)行6 ℃低溫處理，相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率都達(dá)到一級(jí)的材料有6份，隨后進(jìn)行4 ℃低溫處理。結(jié)果顯示，8 ℃低溫處理對(duì)相對(duì)出苗率影響較小，但加重了后續(xù)篩選工作壓力；4 ℃低溫處理對(duì)相對(duì)萌發(fā)率影響較大，大部分材料都不能萌發(fā)，篩選條件苛刻且容易遺漏部分優(yōu)良材料。因此，綜合考慮萌發(fā)率和出苗率時(shí)，初步篩選高粱種子萌發(fā)期耐低溫材料時(shí)選擇6 ℃低溫處理14 d較為適宜。

關(guān)鍵詞：高粱；種子萌發(fā)；低溫脅迫；相對(duì)萌發(fā)率；相對(duì)出苗率；耐低溫；種質(zhì)資源

中圖分類號(hào)：S514.02 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號(hào)：1002-1302（2017）01-0080-04

高粱是喜溫作物，生長發(fā)育的不同時(shí)期都容易遭受低溫的影響，給高粱生產(chǎn)帶來較大損失[1-2]。國內(nèi)外關(guān)于高粱低溫方面的研究報(bào)道較少且不夠深入，國內(nèi)的研究主要是關(guān)于高粱萌發(fā)期、芽期和苗期耐低溫材料的篩選和鑒定[3-8]，國外的研究更多的是關(guān)于高粱耐低溫QTLs的挖掘[9-11]。高粱在播種的早春階段經(jīng)常遭遇低溫，影響種子萌發(fā)導(dǎo)致出苗率低或在土壤中“粉種”、霉?fàn)€，這是造成高粱減產(chǎn)的重要因素之一[12-13]。前人的研究結(jié)果表明，高粱萌發(fā)的下限溫度在各品種間有很大差異，基本在4～8 ℃之間[3-4，14]。關(guān)于高粱萌發(fā)階段耐低溫材料篩選、鑒定的方法主要包括種子低溫脅迫下的萌發(fā)率以及種子低溫處理后統(tǒng)計(jì)出苗率。龔文娟等利用人工氣候箱對(duì)從黑龍江省省內(nèi)收集的407份高粱進(jìn)行種子萌發(fā)階段的篩選試驗(yàn)，將供試材料分別在<5、5、6、7、8、9、10、>10 ℃ 處理14 d后統(tǒng)計(jì)種子的萌發(fā)率[3]。陳香蘭等對(duì)黑龍江省471份高粱材料進(jìn)行種子萌發(fā)階段的低溫處理，將供試材料低溫冷水浸種24 h后置于4 ℃人工氣候箱中處理7 d，然后于25～30 ℃下處理3～5 d，統(tǒng)計(jì)萌發(fā)率[5-6]。馬世均等選取國內(nèi)外不同生態(tài)類型的高粱材料115份，分別置于8、6、4 ℃條件下處理，19 d后統(tǒng)計(jì)萌發(fā)率[4]。張桂香等將來自美國、印度和中國等不同地區(qū)的168份高粱材料種于小盆內(nèi)，置于1～2 ℃的智能培養(yǎng)箱中處理 5～8 d，然后調(diào)試溫度至 12～15 ℃，根據(jù)出苗率篩選種子萌發(fā)階段耐低溫材料[7，15]。雖然低溫條件下種子的萌發(fā)率是衡量耐低溫的重要指標(biāo)，但是最終的出苗率才是人們更關(guān)注的結(jié)果。因此，衡量萌發(fā)階段的耐低溫特性應(yīng)綜合考慮種子的萌發(fā)率和出苗率。因此，本研究利用人工氣候箱對(duì)從中國及其他世界各地收集的631份高粱材料進(jìn)行種子萌發(fā)階段耐低溫篩選、鑒定，綜合考慮相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率從中篩選出優(yōu)良的耐低溫材料，且提出適宜的高粱種子萌發(fā)期耐低溫材料篩選條件。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

本試驗(yàn)收集了中國以及世界其他不同地區(qū)（非洲、亞洲、美洲和北美洲等）、不同類型（甜高粱、粒用高粱、草用高粱、帚用高粱和國內(nèi)農(nóng)家種）的高粱材料631份，其中包括國際熱帶半干旱地區(qū)作物研究所（ICRISAT）提供的微核心種質(zhì)243份，中國國家作物種質(zhì)庫中期庫提供國內(nèi)農(nóng)家種251份，遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新中心國家高粱改良中心提供甜高粱、草用高粱和國內(nèi)常規(guī)品種等136份和通遼市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院提供選育品種1份。

1.2 試驗(yàn)方法

利用國產(chǎn)MGC-350HP-2型人工氣候箱（上海一恒科學(xué)儀器有限公司），對(duì)收集到的631份高粱材料進(jìn)行8 ℃低溫脅迫處理，14 d后統(tǒng)計(jì)種子的相對(duì)萌發(fā)率，隨后置于25 ℃下統(tǒng)計(jì)相對(duì)出苗率。萌發(fā)以種子露白為標(biāo)準(zhǔn)，出苗以2張子葉完全展開為準(zhǔn)。

具體操作步驟為：選取籽粒飽滿、均勻一致且無病蟲害的風(fēng)干種子100粒，放在墊有毛巾的發(fā)芽盒中，加入一定量的無菌水，使毛巾保持濕潤的狀態(tài)。將發(fā)芽盒置于人工氣候箱進(jìn)行8 ℃低溫脅迫處理，14 d后統(tǒng)計(jì)種子的相對(duì)萌發(fā)率，隨后置于25 ℃人工氣候室的培養(yǎng)架上，5 d后統(tǒng)計(jì)相對(duì)出苗率。對(duì)照材料置于25 ℃培養(yǎng)架上3 d后統(tǒng)計(jì)種子的萌發(fā)率，萌發(fā) 5 d 后統(tǒng)計(jì)種子的出苗率。相對(duì)萌發(fā)率=（處理后種子的實(shí)際萌發(fā)率/對(duì)照種子萌發(fā)率）×100%；相對(duì)出苗率=（處理后種子的實(shí)際出苗率/對(duì)照種子出苗率）×100%。試驗(yàn)重復(fù) 2～3次，求平均值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)見表1。耐低溫級(jí)別達(dá)到一級(jí)的材料繼續(xù)進(jìn)行6、4 ℃的低溫篩選，14 d后統(tǒng)計(jì)相對(duì)萌發(fā)率，隨后統(tǒng)計(jì)相對(duì)出苗率。

2 結(jié)果與分析

2.1 相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率

2.1.1 相對(duì)萌發(fā)率 供試631份材料中相對(duì)萌發(fā)率達(dá)到一、二、三、四、五、六級(jí)的樣品數(shù)分別為91、120、102、88、78、152份，占總樣品比例分別為14.42%、19.02%、16.16%、13.95%、12.36%、24.09%，相對(duì)萌發(fā)率幾乎較均勻地分布在不同的等級(jí)中（表2）。

2.1.2 相對(duì)出苗率 供試631份材料中相對(duì)出苗率達(dá)到一、二、三、四、五、六級(jí)的樣品數(shù)分別為308、157、72、45、34、15份，所占總樣品比例分別為48.81%、24.88%、11.41%、7.13%、5.39%、2.38%，相對(duì)出苗率達(dá)到一級(jí)和二級(jí)的為465份，占總材料的73.69%。

綜上所述，8 ℃低溫處理對(duì)種子的相對(duì)萌發(fā)率有較大的影響，這也表明低溫脅迫下材料之間的差異顯著。但是，8 ℃低溫脅迫14 d后，大部分材料的相對(duì)出苗率較高，8 ℃低溫處理對(duì)種子的相對(duì)出苗率影響較小。為了進(jìn)一步說明相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率的關(guān)系，利用DPS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)分析了8 ℃低溫脅迫處理14 d后相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率的相關(guān)性，結(jié)果表明兩者之間并沒有相關(guān)性，即低溫脅迫條件下，種子相對(duì)萌發(fā)率高的材料相對(duì)出苗率不一定高，種子不萌發(fā)或相對(duì)萌發(fā)率低的材料相對(duì)出苗率不一定低。

2.2 8 ℃低溫處理下相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率維恩比較分析

在8 ℃低溫條件下，種子萌發(fā)率和出苗率之間的變化關(guān)系復(fù)雜，同樣存在萌發(fā)率高、出苗率也高的材料。如表2所示，根據(jù)相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)，已經(jīng)將631份材料分別劃分到6個(gè)不同的等級(jí)中，利用維恩圖的形式將每個(gè)等級(jí)相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率的材料進(jìn)行歸類分析，一、二、三、四、五、六級(jí)相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率共有的材料分別是49、39、20、7、2、5份，總計(jì)122份（圖1）。8 ℃處理后，相對(duì)萌發(fā)率較均勻地分布在6個(gè)等級(jí)中，而8 ℃低溫對(duì)最終的相對(duì)出苗率影響較小，相對(duì)出苗率主要集中在前3個(gè)等級(jí)中，占總材料的85.1%（表2）， 前3個(gè)等級(jí)中相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率共有材料108份，占總共有材料的88.52%。

低溫條件下，種子的相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率相關(guān)性較差，以相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率都達(dá)到一級(jí)的材料為例（圖2）， 相對(duì)萌發(fā)率達(dá)到一級(jí)的材料共91份，但相對(duì)出苗率差異卻很大，其中相對(duì)出苗率達(dá)到一級(jí)49份、二級(jí)23份、三級(jí)10份、四級(jí)5份、五級(jí)4份，分別占相對(duì)萌發(fā)率達(dá)到一級(jí)材料的53.85%、25.27%、10.99%、5.49%、4.40%，分析結(jié)果表明，91份一級(jí)材料相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率之間沒有相關(guān)性（圖2-A）。相對(duì)出苗率達(dá)到一級(jí)的材料共308份，相對(duì)萌發(fā)率差異更大，其中相對(duì)萌發(fā)率達(dá)到一級(jí)49份、二級(jí)44份、三級(jí)32份、四級(jí)44份、五級(jí)34份、六級(jí)105份，分別占相對(duì)出苗率達(dá)到一級(jí)材料的15.92%、14.29%、10.39%、14.29%、11.04%、34.09%（圖2-B）。308份一級(jí)材料相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率進(jìn)行相關(guān)性分析，相關(guān)系數(shù)r為-0.192 5、P值為0.000 7（相關(guān)系數(shù)臨界值α=0.05時(shí)，r=0.111 8；α=0.01 時(shí)，r=0.146 6），達(dá)到極顯著負(fù)相關(guān)，表明即使低溫處理后相對(duì)萌發(fā)率較低或者根本暫不萌發(fā)的材料待溫度適宜時(shí)都有較高的相對(duì)出苗率。

2.3 6、4 ℃低溫處理下相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率比較分析

篩選較優(yōu)良的耐低溫材料應(yīng)綜合考慮萌發(fā)率和出苗率，

因此重點(diǎn)關(guān)注相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率都達(dá)到一級(jí)的49份材料（圖1和圖2）。將這49份材料進(jìn)行6 ℃低溫處理，14 d后統(tǒng)計(jì)相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率，相對(duì)萌發(fā)率達(dá)到一級(jí)16份、二級(jí)6份、三級(jí)6份、四級(jí)6份、五級(jí)1份、六級(jí)14份，相對(duì)出苗率達(dá)到一級(jí)14份、二級(jí)24份、三級(jí)7份、四級(jí)3份、五級(jí)1份（表3），其中兩者共有的材料分別為一級(jí)6份、二級(jí)2份、其他級(jí)別為0（圖3）。將6 ℃低溫處理下相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率都達(dá)到一級(jí)的材料置于4 ℃低溫處理，14 d后統(tǒng)計(jì)相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率，只有來自中國的1份農(nóng)家種材料萌發(fā)，相對(duì)萌發(fā)率僅為4.13%。即使種子在4 ℃低溫條件下沒有萌發(fā)，但2份來自南非的材料相對(duì)出苗率也達(dá)到75%以上，另外4份材料的相對(duì)出苗率在40%～50%之間，其中3份材料來自中國，1份材料來自美國（表4）。

3 討論

高粱是世界第五大重要的糧食作物，具有高產(chǎn)、抗旱、耐瘠薄、耐鹽堿、耐高溫、耐寒冷和抗?jié)车忍攸c(diǎn)[16]，深入挖掘高粱抗逆基因?qū)μ骄扛吡桓呖鼓嫘缘姆肿訖C(jī)制及大田實(shí)踐生產(chǎn)應(yīng)用都具有非常重要的意義。目前，已經(jīng)在高粱中應(yīng)用全基因組關(guān)聯(lián)分析方法（genome-wide association studies，GWAS）定位不同農(nóng)藝性狀基因[17]。水稻[18]、玉米[19]、小麥[20]和番茄[21]等作物對(duì)耐低溫資源的挖掘利用、耐冷相關(guān)基因的定位以及耐低溫種質(zhì)在生產(chǎn)和育種上的應(yīng)用都有較深入的研究。陳亮等通過珍汕97B與多年生水稻種質(zhì)AAV002863構(gòu)建的DH群體，QTL定位分析檢測(cè)到2個(gè)與低溫發(fā)芽力相關(guān)的基因座[22]。本研究詳細(xì)統(tǒng)計(jì)了631份高粱材料的相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率且筆者所在的實(shí)驗(yàn)室已獲得這些群體材料的簡化基因組測(cè)序結(jié)果，利用全基因組關(guān)聯(lián)分析方法可以檢測(cè)到與低溫萌發(fā)力和出苗相關(guān)的SNP，為定位和克隆高粱種子萌發(fā)期耐低溫基因奠定基礎(chǔ)。

低溫條件下，如何真實(shí)統(tǒng)計(jì)種子的萌發(fā)率和出苗率敘述不一[3，15]，一種方法直接以實(shí)際萌發(fā)（出苗）種子數(shù)/萌發(fā)種子總數(shù)，這種方法簡單、工作量少，尤其能針對(duì)大批材料進(jìn)行初步篩選，大部分材料在正常條件下萌發(fā)率都比較高，達(dá)到95%以上，低溫脅迫后即使采用這種方法統(tǒng)計(jì)萌發(fā)率、出苗率與實(shí)際出入較??；另一種方法是處理后種子實(shí)際萌發(fā)（出苗）率/對(duì)照種子萌發(fā)（出苗）率，有部分材料即使是當(dāng)年的新種，在正常的條件下萌發(fā)率較低，有的只有80%左右，在低溫脅迫后采用這種方法統(tǒng)計(jì)能夠比較客觀地反映出低溫對(duì)種子萌發(fā)的影響。但是，篩選耐低溫優(yōu)良的種質(zhì)材料時(shí)，正常條件下萌發(fā)率較低的材料應(yīng)舍棄，否則在大田生產(chǎn)中會(huì)加大種子的使用量和成本。

篩選種子萌發(fā)期耐低溫材料時(shí)，研究人員通常以種子的萌發(fā)勢(shì)、萌發(fā)率或者最終的出苗率為指標(biāo)去篩選耐低溫材料[3，7，15]。以種子萌發(fā)勢(shì)和萌發(fā)率為指標(biāo)篩選耐低溫材料時(shí)，有時(shí)會(huì)遺漏較優(yōu)良的材料。經(jīng)過以上的研究發(fā)現(xiàn)，低溫處理后，萌發(fā)率較低或根本不萌發(fā)的種子在溫度適宜時(shí)又重新萌發(fā)、出苗。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)利用發(fā)芽盒進(jìn)行種子萌發(fā)時(shí)，即使種子長菌也很少發(fā)生爛種的情況，低溫（8、6、4 ℃）處理14 d后，溫度越低對(duì)相對(duì)萌發(fā)率的影響越大，4 ℃時(shí)大部分種子難以萌發(fā)，但都有較高的相對(duì)出苗率。這種情況和大田實(shí)際有所不同，大田播種后遭遇低溫低濕后極易產(chǎn)生爛種的危險(xiǎn)，出苗率往往很低。實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬低溫處理，僅以種子的出苗率為標(biāo)準(zhǔn)篩選耐低溫種子也存在一定的風(fēng)險(xiǎn)性，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)種子萌發(fā)率低或未萌發(fā)的種子雖然出苗率很高，但在大田中容易出現(xiàn)爛種現(xiàn)象。大田中大規(guī)模篩選耐低溫材料受氣候的影響和限制，很難重復(fù)、穩(wěn)定進(jìn)行。因此，建議實(shí)驗(yàn)室內(nèi)篩選耐低溫材料時(shí)，應(yīng)綜合考慮萌發(fā)率和出苗率。

實(shí)驗(yàn)室內(nèi)模擬低溫條件下篩選高粱種子萌發(fā)期耐低溫種質(zhì)資源時(shí)與大田實(shí)際有所偏差，選擇低溫處理?xiàng)l件時(shí)應(yīng)慎重考慮。如表2和圖1所示，8 ℃低溫處理14 d后，對(duì)種子的相對(duì)萌發(fā)率影響較大，631份材料較均勻地分布在6個(gè)不同的等級(jí)中。然而對(duì)相對(duì)出苗率影響較小，主要集中在前3個(gè)等級(jí)中。這樣初步篩選到的較優(yōu)良材料數(shù)量較多，增加了進(jìn)一步篩選的工作量。4 ℃低溫處理14 d后，對(duì)種子的相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率影響都非常大，大部分材料種子都不能萌發(fā)，條件過于苛刻可能會(huì)遺漏優(yōu)良的材料。因此，綜合考慮相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率時(shí)，初步篩選高粱種子萌發(fā)期耐低溫材料時(shí)選擇6 ℃低溫處理14 d為宜。

4 結(jié)論

利用從中國以及世界其他地區(qū)收集的631份高粱材料進(jìn)行8 ℃低溫脅迫處理，14 d后統(tǒng)計(jì)種子的相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率，相對(duì)萌發(fā)率達(dá)到一、二、三、四、五、六級(jí)的樣品數(shù)分別為91、120、102、88、78、152份，所占總樣品比例分別為 14.42%、19.02%、16.16%、13.95%、12.36%、24.09%；相對(duì)出苗率達(dá)到一、二、三、四、五、六級(jí)的樣品數(shù)分別為308、157、72、45、34、15份，所占總樣品比例分別為48.81%、24.88%、11.41%、7.13%、5.39%、2.38%；其中相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率都達(dá)到一、二、三、四、五、六級(jí)的樣品數(shù)分別是49、39、20、7、2、5份，共計(jì)122份。

對(duì)8 ℃低溫處理達(dá)到一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的49份材料進(jìn)行6 ℃低溫處理，14 d后統(tǒng)計(jì)相對(duì)萌發(fā)率和相對(duì)出苗率，相對(duì)萌發(fā)率達(dá)到一級(jí)16份、二級(jí)6份、三級(jí)6份、四級(jí)6份、五級(jí)1份、六級(jí)14份；相對(duì)出苗率達(dá)到一級(jí)14份、二級(jí)24份、三級(jí)7份、四級(jí)3份、五級(jí)1份，其中兩者共有的材料分別為一級(jí)6份、二級(jí)2份。對(duì)6 ℃低溫處理達(dá)到一級(jí)標(biāo)準(zhǔn)的6份材料進(jìn)行 4 ℃ 低溫處理，其中只有1份材料萌發(fā)，且6份材料相對(duì)出苗率與8、6 ℃相比顯著降低。8 ℃低溫處理對(duì)相對(duì)出苗率影響較小，加重了后續(xù)篩選壓力。4 ℃低溫處理對(duì)相對(duì)萌發(fā)率影響較大，大部分材料都不能萌發(fā)，容易遺漏部分優(yōu)良的材料。因此，綜合考慮萌發(fā)率和出苗率時(shí)，初步篩選高粱種子萌發(fā)期耐低溫材料時(shí)選擇6 ℃低溫處理14 d較為適宜。

致謝：對(duì)本研究材料的提供方遼寧省農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新中心國家高粱改良中心、國際熱帶半干旱地區(qū)作物研究所、中國國家作物種質(zhì)庫中期庫和通遼市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院表示感謝。材料收集過程中得到了國家高粱產(chǎn)業(yè)體系首席專家鄒劍秋老師的大力支持，特此感謝！

參考文獻(xiàn)：

[1]Major D J，Hamman W M，Rood S B. Effects of short-duration chilling temperature exposure on growth and development of sorghum[J]. Field Crops Research，1982，5：129-136.

[2]Yu J M，Tuinstra M R. Genetic analysis of seedling growth under cold temperature stress in grain sorghum[J]. Crop Science，2001，41（5）：1438-1443.

[3]龔文娟，鄒恒榮，楊玉梅. 高粱、玉米等幾種作物種子萌發(fā)階段的抗寒性鑒定[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，1980（4）：14-18.

[4]馬世均，石玉學(xué)，隋麗君. 高粱種子萌發(fā)階段耐寒性研究簡報(bào)[J]. 遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，1981（6）：32-35.

[5]陳香蘭，孫振東. 高粱耐冷性材料篩選鑒定研究[J]. 作物品種資源，1986（2）：29-31.

[6]陳香蘭，孫振東，楊樹存，等. 高粱耐冷性材料篩選鑒定研究總結(jié)[J]. 黑龍江農(nóng)業(yè)科學(xué)，1985（5）：24-26.

[7]張桂香，史紅梅，張海燕. 高粱耐冷性鑒定方法及指標(biāo)的研究[J]. 天津農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，18（2）：137-139.

[8]李淑芬. 高粱品種資源苗期和灌漿期的抗冷性研究——Ⅰ.抗冷性指標(biāo)及鑒定結(jié)果[J]. 遼寧農(nóng)業(yè)科學(xué)，1992（4）：23-26.

[9]Bekele W A，F(xiàn)iedler K，Shiringani A A，et al. Unravelling the genetic complexity of sorghum seedling development under low-temperature conditions[J]. Plant Cell and Environment，2014，37（3）：707-723.

[10]Knoll J，Ejeta G. Marker-assisted selection for early-season cold tolerance in sorghum：QTL validation across populations and environments[J]. Theoretical and Applied Genetics，2008，116（4）：541-553.

[11]Knoll J，Gunaratna N，Ejeta G. QTL analysis of early-season cold tolerance in sorghum[J]. Theoretical and Applied Genetics，2008，116（4）：577-587.

[12]成慧娟，嚴(yán)福忠，馬尚耀，等. 影響高粱種子出苗率下降的原因及預(yù)防措施[J]. 內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)科技，2011（4）：112.

[13]呂云生. 高粱粉種原因及其預(yù)防措施[J]. 農(nóng)村實(shí)用科技信息，1998（6）：4.

[14]盧慶善. 高粱學(xué)[M]. 北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1999：148-151.

[15]張桂香，史紅梅，張海燕. 高粱耐冷種質(zhì)的鑒定及利用評(píng)價(jià)[J]. 中國農(nóng)學(xué)通報(bào)，2012，28（36）：87-91.

[16]Menezes C B，Ticona-Benavente C A，Tardin F，et al. Selection indices to identify drought-tolerant grain sorghum cultivars[J]. Genetics and Molecular Research，2014，13（4）：9817-9827.

[17]Morris G P，Ramu P，Deshpande S P，et al. Population genomic and genome-wide association studies of agroclimatic traits in sorghum[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2013，110（2）：453-458.

[18]Ma Y，Dai X Y，Xu Y Y，et al. COLD1 confers chilling tolerance in rice[J]. Cell，2015，160（6）：1209-1221.

[19]Silva-Neta I C，Pinho E V，Veiga A D，et al. Expression of genes related to tolerance to low temperature for maize seed germination[J]. Genetics and Molecular Research，2015，14（1）：2674-2690.

[20]Nejadsadeghi L，Maali-Amiri R，Zeinali H A，et al. Membrane fatty acid compositions and cold-induced responses in tetraploid and hexaploid wheats[J]. Molecular Biology Reports，2015，42（2）：363-372.

[21]Yu L，Yan J，Yang Y J，et al. Overexpression of tomato mitogen-activated protein kinase SlMPK3 in tobacco increases tolerance to low temperature stress[J]. Plant Cell Tissue and Organ Culture，2015，121（1）：21-34.

[22]陳 亮，樓巧君，孫宗修，等. 水稻低溫發(fā)芽力的QTL定位[J]. 中國水稻科學(xué)，2006，20（2）：159-164.周棱波，汪 燦，張國兵，等. 播期、密度和施肥水平對(duì)糯高粱黔高7號(hào)產(chǎn)量及構(gòu)成因素的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2017，45（1）：84-88.