王曉曉　傅燕　高瑜

摘要：以大五星枇杷幼果為試材，在自然低溫脅迫下，研究不同遮陽(yáng)率的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)處理后枇杷幼果的凍害指數(shù)、抗氧化酶活性、細(xì)胞膜透性及丙二醛（MDA）含量。結(jié)果表明，各處理對(duì)誘導(dǎo)枇杷幼果超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）、抗壞血酸過(guò)氧化物酶（APX）和過(guò)氧化物酶（POD）活性的作用不盡相同，但均能在一定程度上降低MDA含量，減小細(xì)胞膜透性。在試驗(yàn)處理范圍內(nèi)，遮陽(yáng)率為70%的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)對(duì)大五星枇杷幼果抗寒防凍效果最佳。關(guān)鍵詞：低溫脅迫；枇杷；遮陽(yáng)網(wǎng)；抗氧化酶

枇杷（Eriobotryajaponica lindl）為薔薇科（Rosaceae）枇杷屬（Eriobotrya）常綠小喬木植物，原產(chǎn)于亞洲東南部，主要分布于亞洲溫帶及亞熱帶地區(qū)。枇杷秋冬開(kāi)花，繼而坐果，其幼果發(fā)育受氣候環(huán)境影響形成了對(duì)低溫敏感的特性。近年來(lái)，福建、江西、四川等我國(guó)枇杷主栽區(qū)屢受?chē)?yán)重凍害，造成枇杷連年減產(chǎn)，果園受損嚴(yán)重。由此可見(jiàn)，低溫脅迫已成為制約枇杷產(chǎn)量和影響枇杷產(chǎn)業(yè)的一項(xiàng)重要因素。

遮陽(yáng)網(wǎng)是一種以聚乙烯烴樹(shù)脂為原料，經(jīng)紫外線(xiàn)穩(wěn)定劑及防氧化處理加工制作而成的輕量、耐久、高強(qiáng)的農(nóng)用塑料覆蓋材料，其遮陽(yáng)降溫效果已被國(guó)內(nèi)外眾多文獻(xiàn)所記述。目前，遮陽(yáng)網(wǎng)抗寒防凍栽培措施在蔬菜、臍橙、龍眼中有所應(yīng)用，且效果明顯。為提高遮陽(yáng)網(wǎng)利用率，筆者將其作為防寒保溫材料用于枇杷抗寒防凍栽培試驗(yàn)，旨在為枇杷栽培提供抗寒防凍的理論與實(shí)踐依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

本試驗(yàn)在四川省雅安市石棉縣紅旗村枇杷園區(qū)內(nèi)進(jìn)行。試驗(yàn)以露地栽培長(zhǎng)勢(shì)基本一致的5年生大五星枇杷為材料，株行距為3m×4m，平均株高3.5m，干周36cm，冠幅3m×3.3m，栽培管理方式一致。

各型號(hào)遮陽(yáng)網(wǎng)規(guī)格均為15m×8m，由成都市紅順?biāo)芰嫌邢薰咎峁?/p>

1.2方法

1.2.1試驗(yàn)設(shè)計(jì)。試驗(yàn)用樹(shù)共18株，分別以遮陽(yáng)率50%（黑A）、70%（黑B）、90%（黑C）的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)作為3個(gè)處理，以3株為小區(qū)，3次重復(fù)。對(duì)照用樹(shù)10株，對(duì)照組1（c K1）均為凍害發(fā)生前采樣的幼果；對(duì)照組2（CK2）均為凍害發(fā)生后采樣的幼果。

于2014年1月2日下午3～5時(shí)采用戴帽式進(jìn)行覆蓋，2014年3月1日上午9～10時(shí)揭開(kāi)遮陽(yáng)網(wǎng)。

1.2.2采樣方法。凍害發(fā)生前，分別從10株對(duì)照用樹(shù)樹(shù)冠東西南北中5個(gè)方位，隨機(jī)摘取無(wú)損枇杷幼果5顆，共50顆幼果，當(dāng)天帶回實(shí)驗(yàn)室。凍害后，采用同樣方法，對(duì)試驗(yàn)用樹(shù)和對(duì)照用樹(shù)再一次采樣。

1.2.3指標(biāo)測(cè)定。相對(duì)電導(dǎo)率、SOD活性、POD活性測(cè)定參照王學(xué)奎的方法；MDA含量測(cè)定采用湯章誠(chéng)的方法；CAT活性參照楊蘭芳，龐靜等的方法測(cè)定；APX活性參照孔祥生的方法測(cè)定。以上實(shí)驗(yàn)測(cè)定重復(fù)3次。

2結(jié)果與分析

2.1低溫脅迫下不同遮陽(yáng)率的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)處理后枇杷幼果的凍害指標(biāo)

由表1可知，低溫脅迫下不同遮陽(yáng)率黑色遮陽(yáng)網(wǎng)處理后，枇杷幼果相對(duì)電導(dǎo)率、MDA含量與凍害指數(shù)間呈顯著正相關(guān)，回歸方程分別為：y=0.6322x+8.0660、Y=0.0256x+3.5928；相關(guān)系數(shù)分別為：0.9513、0.9158。說(shuō)明隨著凍害指數(shù)的增加，相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量也分別提高。遮陽(yáng)率70%的凍害指數(shù)最低，分別比CK₂、遮陽(yáng)率50%和90%的低41.75%、10.42%和21.25%。而遮陽(yáng)率70%的相對(duì)電導(dǎo)率和MDA含量分別比CK2低55.22%和20.04%，差異均達(dá)到極顯著水平（P<0.01）。

2.2不同遮陽(yáng)率的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)處理對(duì)枇杷幼果抗氧化酶活性的影響

2.2.1對(duì)SOD活性的影響。植物在逆境下受到的傷害以及植物對(duì)逆境的抵抗能力往往與體內(nèi)SOD活性水平有關(guān)。由圖1可知低溫脅迫會(huì)抑制枇杷幼果SOD的活性，其脅迫后的幼果（CK₂）活性比正常生長(zhǎng)狀態(tài)下的幼果（CK₁）活性降低20.51%。不同遮陽(yáng)率的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)均能明顯提高枇杷幼果SOD活性，分別比CK₂高64.50%、105.28%、45.44%，差異達(dá)極顯著水平（P<0.01）。遮陽(yáng)率為70%的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)提高幼果SOD活性的效果最為明顯。

2.2.2對(duì)CAT和APX活性的影響。CAT和APX可以清除H₂O₂、維持活性氧代謝平衡、保護(hù)膜結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，從而使植物在一定程度上忍耐、減緩或抵抗逆境的脅迫。由圖3、圖4可知，低溫脅迫對(duì)幼果CAT和APX活性均有抑制作用。與CK₂相比，在遮陽(yáng)率為50%和70%的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)處理下，CAT活性分別提高了13.99%、19.45%：APX活性分別提高215.37%、233.87%。

2.2.3對(duì)POD活性的影響。POD廣泛存在于植物體內(nèi)不同組織中，它作為活性較高的適應(yīng)性酶，能夠反映植物生長(zhǎng)發(fā)育的特點(diǎn)、體內(nèi)代謝狀況以及對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)性。由圖5可知，經(jīng)遮陽(yáng)網(wǎng)處理的幼果POD活性分別比CK2上升64.01%、101.76%和10.91%。遮陽(yáng)率為50%的和遮陽(yáng)率為70%的POD活性與CK₂的POD活性差異均達(dá)極顯著性水平（P<0.01）。

3討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，低溫脅迫下，不同遮陽(yáng)率的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)處理對(duì)提高枇杷幼果抗氧化酶活性的作用不盡相同，但均能在一定程度上降低MDA含量，減小細(xì)胞膜透性。而70%遮陽(yáng)率的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)處理下SOD、CAT、APX、POD 4種抗氧化酶的活性均達(dá)到最高?？寡趸富钚噪S遮陽(yáng)率的遞增而呈現(xiàn)先增大后減小的趨勢(shì)，這可能是因?yàn)檎陉?yáng)率過(guò)大會(huì)對(duì)葉片的光合作用產(chǎn)生一定影響，而抗氧化酶中所需蛋白質(zhì)需要在光合作用下合成，所以光合作用在一定程度上也影響了抗氧化酶活性。

本試驗(yàn)中，70%遮陽(yáng)率的黑色遮陽(yáng)網(wǎng)在試驗(yàn)處理范圍內(nèi)抗寒防凍效果最好。下一步可擬用雙層或多層遮陽(yáng)網(wǎng)覆蓋，探究在不同遮陽(yáng)率下其抗寒防凍效果。