蔡奮忠　林雄哲

[摘要] 膠質(zhì)瘤是一種發(fā)生于神經(jīng)外胚層的常見原發(fā)性顱內(nèi)腫瘤。隨著分子生物學的發(fā)展，相關(guān)信號傳導通路特異分子靶向治療成為膠質(zhì)瘤治療的熱點并取得了一定的成果。近年來，大量研究揭示PI3K/AKT/mTOR信號通路在膠質(zhì)瘤發(fā)生及發(fā)展中發(fā)揮了重要的作用，因而針對該通路的靶向治療表現(xiàn)出較好的臨床應用前景。本文著重針對PI3K/AKT/mTOR信號通路在膠質(zhì)瘤中的作用及其相關(guān)抑制劑藥物的靶向治療效果進行綜述。

[關(guān)鍵詞] 膠質(zhì)瘤；PI3K/AKT/mTOR；靶向治療；抑制劑

[中圖分類號] R739.41 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2016）30-0165-04

膠質(zhì)瘤是一種臨床上常見的顱內(nèi)腫瘤，可占中樞神經(jīng)系統(tǒng)原發(fā)性惡性腫瘤的80%。其中，中間變性膠質(zhì)瘤以及膠質(zhì)母細胞瘤往往伴隨著較低的治愈率及較高的死亡率[1]。臨床上，膠質(zhì)瘤的治療主要是以外科手術(shù)結(jié)合放療、化療等措施為主，然而該類方案的治療效果仍不理想。隨著分子生物學的發(fā)展，針對影響膠質(zhì)瘤增殖、轉(zhuǎn)移及遷移相關(guān)信號傳導通路的靶向治療成為一種新的治療模式并取得較好的療效[2]。其中，由于其促腫瘤作用，PI3K/AKT/mTOR信號通路分子靶向治療備受關(guān)注。接下來，本文著重對PI3K/AKT/mTOR信號通路在膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展中的作用及相關(guān)分子靶向治療藥物進行綜述。

1 PI3K/AKT/mTOR信號通路與膠質(zhì)瘤

PI3K/AKT/mTOR信號通路主要由PI3K、AKT及mTOR三個關(guān)鍵因子組成。該通路的主要傳導機制如下：當PI3K受到受體酪氨酸激酶、Ras、整合素以及各種生長因子等多種因子作用而激活時，可通過磷酸化肌醇誘導3，4，5-三磷酸磷脂酰肌醇及3，4-二磷酸磷脂酰肌醇的生成[3]；接下來，激活的Akt可通過3-磷脂酰肌醇依賴性蛋白激酶1及3-磷脂酰肌醇依賴性蛋白激酶2磷酸化，進而將信號傳遞給mTOR[4]；而兩種復合體形態(tài)的mTOR（雷帕霉素敏感mTORC1，對雷帕霉素不敏感mTORC2）可進而對下游相關(guān)mRNA的轉(zhuǎn)錄進行調(diào)節(jié)，最終影響細胞增殖、凋亡、分化、遷移等多種生理過程[5]。

近年來，PI3K/AKT/mTOR信號通路在腫瘤發(fā)生及發(fā)展中作用的研究多有報道[6]。在腫瘤細胞中，AKT可以通過磷脂酰肌醇3-激酶磷酸化轉(zhuǎn)變?yōu)閜AKT，而pAKT可進一步通過磷酸化激活caspase 9、Bad、FOXO、GSK-3b及IKK等因子促進細胞增殖，抑制細胞凋亡。同時，pAKT還可以緩解TSC1/2和Rheb對mTOR的抑制，而激活的mTOR與RAPTOR結(jié)合后可以通過mTORC1磷酸化激活核糖體S6激酶，進而干預5-TOP結(jié)構(gòu)的mRNA翻譯，影響細胞的增殖。同時，pmTOR還可以與RICTOR結(jié)合并通過mTORC2磷酸化激活AKT，進一步促進細胞增殖。因此，PI3K/AKT/mTOR信號通路的激活表現(xiàn)出明顯的促腫瘤作用[7]。

至今為止，大量研究證實PI3K/AKT/mTOR信號通路可以促進膠質(zhì)瘤的發(fā)生與發(fā)展。據(jù)報道，PI3K的陽性表達率與膠質(zhì)瘤的分級、分期及KPS評分密切相關(guān)，還與膠質(zhì)瘤較差的預后明顯相關(guān)[8，9]；AKT的表達與膠質(zhì)瘤的惡性程度正相關(guān)，抑制AKT可以有效地抑制膠質(zhì)瘤細胞的增殖及侵襲能力[10，11]；此外，mTOR對細胞周期有著明顯的調(diào)控作用，其高表達不僅會加速腫瘤細胞的增殖，還會抑制腫瘤細胞發(fā)生自噬，最終促進膠質(zhì)瘤的發(fā)生與進展[12]。

2 PI3K /AKT/mTOR信號通路抑制劑

2.1 PI3K抑制劑

PI3K抑制劑最初主要以LY294002及渥曼青霉素為主。大量研究證實該兩種物質(zhì)不僅具有明顯的抗瘤作用，還體現(xiàn)出對化療和放療敏感性的增強上。研究發(fā)現(xiàn)，LY294002可以通過促進p-AKT及Bcl-2的表達降低膠質(zhì)瘤對替莫唑胺的耐藥性，并可以通過下調(diào)PI3K/AKT通路增加替莫唑胺對膠質(zhì)瘤的細胞毒性，因而LY294002合并替莫唑胺可以有效地抑制膠質(zhì)瘤細胞的增殖[13]。然而，由于其較短的半衰期，LY294002單獨使用往往不能有效地抑制膠質(zhì)瘤細胞的生長[14]。同時，放療誘導的端粒酶活性上調(diào)可以逃避LY294002對PI3K的抑制，說明在膠質(zhì)瘤放療時還需注意對端粒酶活性的抑制[15]。對于渥曼青霉素，研究證實該藥物可以通過抑制PI3K有效地阻礙膠質(zhì)瘤的發(fā)展，并增強膠質(zhì)瘤細胞對放療的敏感性[16]。然而，渥曼青霉素因毒副作用大、水溶性差及選擇性低等特征限制了其在臨床上的應用[17，18]。隨著分子生物學的發(fā)展，許多新型的PI3K抑制劑逐漸顯露并應用于膠質(zhì)瘤的臨床研究中。作為渥曼青霉素的一種衍生物，PX-866可以明顯抑制膠質(zhì)瘤細胞體外的侵襲力，而動物模型中的研究發(fā)現(xiàn)PX-866可以有效地抑制膠質(zhì)瘤的生長并延長中位生存期[19]。BKM120是一種可以通過血腦屏障的PI3K抑制劑，表現(xiàn)出對腫瘤增殖抑制以及促進凋亡的作用。研究證實，BKM120可以劑量依賴性地抑制小鼠體內(nèi)膠質(zhì)瘤的生長，并提高生存期[20]；I期臨床試驗發(fā)現(xiàn)患者可以耐受BKM120聯(lián)合貝伐單抗的治療，該方案將進入Ⅱ期臨床試驗階段。此外，GDC-0032、BYL719及INK1117等一系列新型的PI3K抑制劑逐漸顯現(xiàn)，并有望成為高穩(wěn)定性、低毒副作用的抗癌藥物。

2.2 AKT抑制劑

哌立福新和MK-2206是最常用的AKT抑制劑，均已進入Ⅱ期臨床試驗階段。在細胞中，哌立福新可以有效地通過阻礙AKT在細胞膜上的易位抑制AKT磷酸化。研究發(fā)現(xiàn)，哌立福新聯(lián)合mTOR抑制劑西羅莫司（CCI-779）可以有效地抑制小鼠體內(nèi)膠質(zhì)瘤的生長，并誘導凋亡；哌立福新聯(lián)合替莫唑胺表現(xiàn)出較強的抗腫瘤活性，但未能提高膠質(zhì)瘤細胞對放療的敏感性。然而，較大的分子量使哌立福新不易通過血腦屏障，且其使用時往往伴有嚴重的胃腸道反應，因而限制了其臨床應用[20]。同樣作為AKT抑制劑，MK-2206表現(xiàn)出較好的抗腫瘤作用。據(jù)報道，MK-2206可以誘導膠質(zhì)瘤LN-229和T98G細胞株自噬；MK-2206聯(lián)合吉非替尼可以促進小鼠體內(nèi)膠質(zhì)瘤的自噬與凋亡。鑒于AKT在PI3K/AKT/mTOR信號通路中既可以接受上游信號，也可以調(diào)控下游底物，AKT抑制劑在應用時建議與其他抑制劑聯(lián)合使用，以發(fā)揮更理想的抗腫瘤效果。

2.3 mTOR抑制劑

至今為止，大量的研究證實mTOR與腫瘤的增殖、凋亡以及耐藥性密切相關(guān)，因而mTOR抑制劑成為腫瘤靶向治療的熱點之一。鑒于PTEN缺失膠質(zhì)瘤對mTOR抑制劑更為敏感，mTOR抑制劑在PTEN高頻率異常的情況下表現(xiàn)出更好的前景[6]。根據(jù)mTOR的兩種形態(tài)，研究較多的mTOR抑制劑主要包括mTORC1和mTORC1/2抑制劑。目前，研究較多的mTORC1抑制劑主要為雷帕霉素及相關(guān)類似物（如西羅莫司、依維莫司及AP23573等）。臨床上，雷帕霉素是移植時常用的免疫抑制劑，而依維莫司及西羅莫司多用于抗腫瘤的治療并已進入臨床試驗階段。據(jù)報道，雷帕霉素可以有效地阻滯細胞周期于G1期，抑制星形細胞膠質(zhì)瘤的增殖，并誘導其凋亡及自噬；西羅莫司可以有效地抑制對雷帕霉素耐藥膠質(zhì)瘤細胞的生長；依維莫司在膠質(zhì)瘤細胞和動物模型中均表現(xiàn)出了較好的抗腫瘤作用。雖然大量研究表明這些藥物在臨床治療中表現(xiàn)出較好的耐受性，但單一藥物的干預往往無法有效地治療惡性膠質(zhì)瘤。研究證實，西羅莫司單一治療復發(fā)性膠質(zhì)母細胞瘤表現(xiàn)出較低的無進展生存期及中位生存期[21]；相比單用西羅莫司，西羅莫司聯(lián)合細胞毒藥物在膠質(zhì)瘤的治療中表現(xiàn)出更好的效果；依維莫司聯(lián)合替莫唑胺及放療治療多形性膠質(zhì)母細胞瘤患者表現(xiàn)出較好的耐受性以及較長的中位生存期；依維莫司聯(lián)合替莫唑胺、貝伐單抗及放療治療惡性膠質(zhì)瘤的有效率可達61%。然而，還有報道稱雖然西羅莫司聯(lián)合放療可以明顯提高膠質(zhì)瘤小鼠的生存期，但由于對免疫系統(tǒng)的抑制，該方案會提高膠質(zhì)母細胞瘤患者感染的風險；西羅莫司聯(lián)合索拉非尼治療膠質(zhì)瘤表現(xiàn)出血小板減少的副作用。此外，一些交叉信號轉(zhuǎn)導通路及反饋回路的干擾也限制了這些藥物的臨床應用。另一方面，mTORC1/2雙重抑制劑主要為一些小分子的ATP競爭抑制劑，如Ku0063794、pp242、AZD8055、AZD2014及Torin等。除對mTORC1的抑制，mTORC1/2抑制劑還可以通過干預AKT磷酸化抑制mTORC2。據(jù)報道，Ku0063794可以通過抑制AKT磷酸化誘導膠質(zhì)瘤自噬[22]；pp242可以誘導膠質(zhì)母細胞瘤發(fā)生自噬；I期臨床試驗表明AZD8055可以通過阻滯細胞周期于G1期抑制腫瘤細胞的增殖；小鼠體內(nèi)模型實驗發(fā)現(xiàn)AZD2014可以增強膠質(zhì)母細胞瘤對放療的敏感性，進而延長生存期。

3 PI3K/mTOR 雙重抑制劑

鑒于mTOR相關(guān)抑制劑臨床活性的限制主要歸結(jié)于mTOR-p70S6K-PI3K反饋回路，因而同時作用于PI3K及mTOR抑制劑的開發(fā)展現(xiàn)出更為遠大的前景。通過大量的研究，人們發(fā)現(xiàn)許多PI3K/mTOR雙重抑制劑，并表現(xiàn)出較好的抗腫瘤作用，其中包括PI-103、SF-1126、NVP-BEZ235及XL765等。研究發(fā)現(xiàn)，PI-103對體內(nèi)及體外膠質(zhì)瘤模型均表現(xiàn)出較好的抑制效果；低濃度的PI-103可以通過阻滯細胞周期于G0-G1期有效地抑制膠質(zhì)瘤細胞的增殖[23]；PI-103可以有效地抑制膠質(zhì)瘤在體內(nèi)模型中的生長，并未表現(xiàn)對細胞的明顯毒性。同時，SF-1126能夠明顯抑制動物模型中膠質(zhì)瘤細胞株U87MG的生長[24]；XL765 能夠明顯減少腫瘤細胞的生長活性，與替莫唑胺聯(lián)合后表現(xiàn)出出色的抗瘤能力[25]。再者，體內(nèi)及體外試驗均說明NVP-BEZ235可以增強膠質(zhì)瘤對放療的敏感性，促進自噬，下調(diào)內(nèi)皮生長因子的表達，防止血管生成，進而延長患瘤動物的生存期。此外，通過對細胞膜上PIP3形成的抑制，XL765能夠阻礙腫瘤細胞中AKT、p70S6K和S6的磷酸化，最終抑制腫瘤生長；與替莫唑胺相比，XL765干預后異種移植模型表現(xiàn)出更長的生存期。雖然這些抑制劑表現(xiàn)出較好的抗腫瘤作用，其應用仍需要進一步臨床試驗的證實。

4 小結(jié)

近年來，隨著抑瘤靶點的不斷發(fā)現(xiàn)，分子靶向治療得到飛速的發(fā)展。作為腫瘤發(fā)生與發(fā)展重要的信號傳導通路，特異性的PI3K/AKT/mTOR通路抑制劑成為膠質(zhì)瘤治療的新方案。然而，PI3K/AKT/mTOR通路靶向抑制劑在臨床應用時同樣存在藥物耐受、毒副作用及個體差異等問題。因此，在保證該通路抑制劑臨床抗瘤療效的前提下，避免不良反應的發(fā)生成為未來研究的主要發(fā)展方向。同時，個性化的靶向藥物之間以及與傳統(tǒng)治療手段的聯(lián)合應用成為有效增加抗腫瘤效果、降低不良反應的重要手段。隨著基因靶向治療的發(fā)展，腦膠質(zhì)瘤臨床治療方向?qū)⒂型a(chǎn)生更大的突破。

[參考文獻]

[1] Louis DN，Ohgaki H，Wiestler OD，et al. The 2007 WHO classification of tumours of the central nervous system[M].WHO Classification of Tumours of the Central Nervous System. Distributed by WHO Press，World Health Organization，2007：97-109.

[2] 米中波，焦保華. 腦膠質(zhì)瘤分子靶向治療的研究進展[J]. 河北醫(yī)藥，2010，32（17）： 2422-2424.

[3] Riehle RD，Cornea S，Degterev A. Role of phosphatidylinositol 3，4，5-trisphosphate in cell signaling[J]. Advances in Experimental Medicine & Biology，2013，991（3）：105-139.

[4] Sarbassov DD，Guertin DA，Ali SM，et al. Phosphorylation and regulation of Akt/PKB by the rictor-mTOR complex[J].Science，2005，307（5712）：1098-1101.

[5] 楊鵬宇， 張建生. mTOR抑制劑治療膠質(zhì)瘤的研究進展[J].國際神經(jīng)病學神經(jīng)外科學雜志，2009，36（6）：548-551.

[6] Omuro AM，F(xiàn)aivre S，Raymond E. Lessons learned in the development of targeted therapy for malignant gliomas[J]. Molecular Cancer Therapeutics，2007，6（7）：1909-1919.

[7] 梁若飛，劉艷輝. PI3K/Akt/mTOR信號通路靶向治療膠質(zhì)細胞瘤研究進展[J]. 中華神經(jīng)外科疾病研究雜志，2013，12（4）：375-377.

[8] Chakravarti A，Zhai G，Suzuki Y，et al. The prognostic significance of phosphatidylinositol 3-kinase pathway activation in human gliomas[J]. Journal of Clinical Oncology，2004， 22（10）：1926-1933.

[9] 孫曉陽，丁漣沭，金孝東，等. PI3K/Akt/mTOR信號傳導通路與人腦膠質(zhì)瘤惡性進展及預后的相關(guān)研究[J]. 中華神經(jīng)醫(yī)學雜志，2011，10（1）：24-28.

[10] 韓磊，張安玲，岳曉，等. RNA干擾聯(lián)合抑制PI3KP85和AKT1表達對U251膠質(zhì)瘤細胞侵襲的影響[J]. 中華神經(jīng)醫(yī)學雜志，2010，9（6）：566-570.

[11] 金日華. Notch及AKT信號通路在腦膠質(zhì)瘤細胞增殖及侵襲活動中的相互作用[D]. 吉林大學，2012.

[12] Eng CH，Abraham RT. The autophagy conundrum in cancer：Influence of tumorigenic metabolic reprogramming[J]. Oncogene，2011，30（47）：4687-4696.

[13] Chen L，Han L，Shi Z，et al. LY294002 enhances cytotoxicity of temozolomide in glioma by down-regulation of the PI3K/Akt pathway[J]. Molecular Medicine Reports，2012，5（5）：575-579.

[14] Hu L，Zaloudek C，Mills GB，et al.In vivo and in vitro ovarian carcinoma growth inhibition by a phosphatidylinositol 3-kinase inhibitor（LY294002）[J]. Clinical Cancer Research An Official Journal of the American Association for Cancer Research，2000，6（3）：880-886.

[15] Millet P，Granotier C，Etuenne O，et al. Radiation-induced upregulation of telomerase activity escapes PI3-kinase inhibition in two malignant glioma cell lines[J]. International Journal of Oncology，2013，43（2）：375-382.

[16] Kubota N，Okada S，Inada T，et al. Wortmannin sensitizes human glioblastoma cell lines carrying mutant and wild type TP53 gene to radiation[J]. Cancer Letters，2000，161（2）：141-147.

[17] Lopiccolo J，Blumenthal GM，Bernstein WB，et al. Targeting the PI3K/Akt/mTOR pathway：Effective combinations and clinical considerations[J]. Drug Resistance Updates Reviews & Commentaries in Antimicrobial & Anticancer Chemotherapy，2008，11（1-2）：32-50.

[18] Powis G，Bonjouklian R，Berggren MM，et al.Wortmannin，a potent and selective inhibitor of phosphatidylinositol-3-kinase[J]. Cancer Research，1994，54（9）：2419-2423.

[19] Koul D，Shen R，Kim Y W，et al. Cellular and in vivo activity of a novel PI3K inhibitor，PX-866，against human glioblastoma[J]. Neuro-Oncology，2010，12（6）：559-569.

[20] Koul D，F(xiàn)u J，Shen R，et al. Antitumor activity of NVP-BKM120-A selective pan Class I PI3 Kinase inhibitor showed differential forms of cell death based on p53 status of glioma cells[J]. Clinical Cancer Research，2011，18（1）：184-195.

[21] Galanis E，Buckner J C，Maurer M J，et al. Phase II trial of temsirolimus（CCI-779） in recurrent glioblastoma multiforme：A north central cancer treatment group study[J].Journal of Clinical Oncology Official Journal of the American Society of Clinical Oncology，2005，23（23）：5294-5304.

[22] Fan QW，Weiss WA.Inhibition of PI3K-Akt-mTOR signaling in glioblastoma by mTORC1/2 inhibitors[J]. Methods in Molecular Biology，2012，821（821）：349-359.

[23] Bagcionder T，Wakimoto H，Anderegg M，et al. A dual PI3K/mTOR inhibitor，PI-103， cooperates with stem cell-delivered TRAIL in experimental glioma models[J].Cancer Research，2011，71（1）：154-163.

[24] Garlich JR，De P，Dey N，et al. A vascular targeted pan phosphoinositide 3-Kinase inhibitor prodrug，SF1126，with antitumor and antiangiogenic activity[J]. Cancer Research，2008， 68（1）：206-215.

[25] Prasad G，Sottero T，Yang X，et al. Inhibition of PI3K/mTOR pathways in glioblastoma and implications for combination therapy with erlotinib，temozolomide，and radiation[J]. Neuro-Oncology，2011，13（4）：S67-S68.

（收稿日期：2016-08-15）