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湖北三峽職業(yè)技術(shù)學(xué)院 湖北宜昌 443000

重金屬污染物免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展探究

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湖北三峽職業(yè)技術(shù)學(xué)院 湖北宜昌 443000

免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)是一項(xiàng)新興檢測(cè)技術(shù)，跟傳統(tǒng)檢測(cè)技術(shù)比較，更具靈敏性及高速性，同時(shí)便于攜帶方便、成本低以及適用于現(xiàn)場(chǎng)迅速檢測(cè)。文章即將介紹最近的重金屬污染物免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)，進(jìn)而對(duì)該技術(shù)的實(shí)際運(yùn)用及發(fā)展前景進(jìn)行探究。

重金屬；污染物；免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)

銅和鋅等重金屬作為生命活動(dòng)中必要的微量元素，但是攝入太多會(huì)危及身體健康，鉛、汞、以及鍋等重金屬并不是生命活動(dòng)中需要的元素，若超過(guò)相應(yīng)的濃度，則會(huì)對(duì)機(jī)體的健康構(gòu)成威脅。通常重金屬污染存在諸多特征，如來(lái)源多、較強(qiáng)隱蔽性、遷移性不大、毒性強(qiáng)、化學(xué)行為與生態(tài)效應(yīng)呈現(xiàn)復(fù)雜性…無(wú)論是環(huán)境，還是食物及物品，一定含有超量的重金，會(huì)經(jīng)過(guò)食物鏈、呼吸以及表面接觸，來(lái)對(duì)人體進(jìn)行毒害，同時(shí)憑借一些遷移形式進(jìn)入到大氣和水體中。大部分重金屬的毒性來(lái)源自身的物理化學(xué)形態(tài)，根據(jù)單克隆抗體制備，還有免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)能夠?qū)σ阅撤N形式呈現(xiàn)的重金屬離子進(jìn)行檢測(cè)，便于在環(huán)境與食品樣品檢測(cè)重金屬中，創(chuàng)造定量或者半定量的有效檢測(cè)方法。

一、重金屬污染物免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)

（一）酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)方法

酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)方法，主要結(jié)合了酶催化作用和抗原抗體特異性免疫反應(yīng)，屬于一項(xiàng)結(jié)合型檢測(cè)技術(shù)。該技術(shù)具有諸多優(yōu)點(diǎn)，如特異性更強(qiáng)、靈敏度更高、操做簡(jiǎn)單便捷、非常易攜帶、高效準(zhǔn)確性，并且能對(duì)大量的樣品進(jìn)行檢測(cè)。在操作該項(xiàng)技術(shù)中，通常不需采用貴重的儀器設(shè)施。融合 ELISA技術(shù)，屬于實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢測(cè)技術(shù)，不要求結(jié)合專(zhuān)業(yè)化、系統(tǒng)化的科學(xué)理論，一般普通的實(shí)驗(yàn)人員都可以進(jìn)行操作。由于在樣品檢測(cè)中時(shí)間短，可結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)定量檢測(cè)物，正常在 ELISA試劑盒檢測(cè)區(qū)間內(nèi)的樣品，都可以采用該檢測(cè)技術(shù)。但是 ELISA試劑盒的檢測(cè)區(qū)域，容易受到特異性抗體親和力，還有靈敏度的限制。所以，在規(guī)定適用范圍內(nèi)，實(shí)際檢測(cè)出來(lái)的樣品，有可能存在假陽(yáng)性問(wèn)題，從而引發(fā)判定偏差，要求定量檢測(cè)過(guò)程中要好標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（二）免疫膠體金方法

免疫膠體金方法通常將膠體金當(dāng)作示蹤標(biāo)志物，運(yùn)用在抗原抗體中一項(xiàng)創(chuàng)新免疫標(biāo)記技術(shù)。該方法具有靈活性及快速性，且檢查結(jié)果用肉眼就能進(jìn)行判讀定，免疫膠體金方法比較適宜在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)分析使用。免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)經(jīng)過(guò)水樣里的鍋離子，應(yīng)用納米欽富集水里的鍋離子來(lái)檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果達(dá)到5μg·L-1，該方法針對(duì)環(huán)境水樣進(jìn)行檢測(cè)。在水樣進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，達(dá)到100 ng·mL-1，且檢測(cè)結(jié)果和ICP-AES具有一致性，類(lèi)型相同的技術(shù)在進(jìn)行水樣檢測(cè)時(shí)可達(dá)1 mg ·mL-1。所以，該方法適用于對(duì)水中鍋離子現(xiàn)場(chǎng)進(jìn)行檢測(cè)。經(jīng)過(guò)構(gòu)建鍋離子的免疫膠體金檢查技術(shù)，可應(yīng)用二氧化欽集水中的鍋離子進(jìn)行檢測(cè)，可升高6.7 ng·mL-1。該項(xiàng)研制的試紙條，置于5℃環(huán)境下能儲(chǔ)存8周，其穩(wěn)定性較佳，并且檢測(cè)成果和ICP-MS具有良好的相關(guān)性。

二、重金屬污染物免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)的注意要素

1.抗體制備及篩選

因?yàn)橹亟饘匐x子分子量過(guò)小，其結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，不能用作制備抗體，要求通過(guò)雙功能鰲合劑，與其他試劑進(jìn)行反應(yīng)后，結(jié)合載體蛋白才能對(duì)動(dòng)物進(jìn)行免疫。在制備的抗體中，有些會(huì)與其他離子產(chǎn)生交叉反應(yīng)。例如，丁菌制作的Cr3+離子單抗和Mo6+產(chǎn)生交叉反應(yīng)；還有唐勇制作的鍋離子抗體和Hg2+發(fā)生交叉反應(yīng)；在選擇抗體過(guò)程中，具有嚴(yán)格的要求，要求將篩選范圍擴(kuò)大化，特別是亟待通過(guò)競(jìng)爭(zhēng) ELISA技術(shù)，來(lái)測(cè)定不同的離子針對(duì)抗體反應(yīng)的抑制程度，必須要選擇特異性良好與靈敏的抗體。因此，許多研究報(bào)道逐步注重核酸適配體技術(shù)，探討其在重金屬免疫檢測(cè)方面的運(yùn)用。例如，黃蜻創(chuàng)建的膠體金檢測(cè)技術(shù)，建立在特異性核酸序列與配對(duì)序列基礎(chǔ)上，有利于達(dá)到檢測(cè)的目的，更具靈敏性。

2.樣本前處理

在免疫技術(shù)檢測(cè)能力方面，現(xiàn)有報(bào)道的不同類(lèi)檢測(cè)技術(shù)，靈敏度均高達(dá)mg ·mL-1水平，大體上符合多類(lèi)樣本中的重金屬污染物限量指標(biāo)。針對(duì)檢測(cè)樣本而言，不同的探究中選用的樣本大部分是水（涉及到自來(lái)水或者江河水等）。這樣，密切關(guān)系到樣本基質(zhì)的單一、干擾較小以及無(wú)須特別解決。針對(duì)食品安全包含的樣本報(bào)道不多，例如青菜、果類(lèi)、谷物、肉類(lèi)等，這些和樣本處理復(fù)雜性、耗時(shí)性以及干擾大息息相關(guān)。通常的設(shè)備分析技術(shù)，在進(jìn)行測(cè)量重金屬中，一般會(huì)選用灰化或消解方式，檢測(cè)中費(fèi)時(shí)費(fèi)力。在免疫檢測(cè)樣本處理中，通常要通過(guò)此流程，尤其是對(duì)于大部分食品類(lèi)樣本而言。所以說(shuō)，構(gòu)建省時(shí)省力樣本時(shí)，同時(shí)要求檢測(cè)結(jié)果影響不大，已然是重金屬免疫檢測(cè)探究的要點(diǎn)。汪慧基于該問(wèn)題，作出了具體研究，通過(guò)稀酸浸提蛋白類(lèi)食品中，含有的重金屬作為免疫檢測(cè)分析。該研究說(shuō)明，新技術(shù)處理樣本檢測(cè)的結(jié)果和以往處理技術(shù)檢測(cè)的結(jié)果存在具有較好的線性相關(guān)性，尤其是對(duì)銅、鉛及鍋進(jìn)行檢測(cè)，能替換以往樣本處理技術(shù)。另外，固相萃取技術(shù)、液相萃取技術(shù)也運(yùn)用到重金屬檢測(cè)中。

三、發(fā)展趨勢(shì)及展望

從未來(lái)發(fā)展方向看，首先必須強(qiáng)化重金屬污染檢測(cè)，特別是毒性強(qiáng)且傷害大的重金屬。其次，加大重金屬含量的檢測(cè)力度，尤其是影響大、攝入量較高的重金屬。再次，加大科技研究力度，對(duì)于危害程度不一的重金屬污染進(jìn)行合理分類(lèi)，并且作出快速的測(cè)量與評(píng)價(jià)。最后，務(wù)必將定量檢測(cè)和定性篩選有機(jī)結(jié)合，針對(duì)迅速篩選的技術(shù)與設(shè)備，沒(méi)有必要力求太低的檢出限標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)而節(jié)省測(cè)試資金，保證篩查的高效率。

總結(jié)

隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)的飛快發(fā)展，在食品和環(huán)境中，出現(xiàn)大量的重金屬污染問(wèn)題。人們逐漸加強(qiáng)思想認(rèn)識(shí)，如何高速性及準(zhǔn)確性檢測(cè)出樣品含有的重金屬離子，這已經(jīng)變成世界各國(guó)家值得研究課題。

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