劉娟
摘要:目的 探究高脂血標(biāo)本臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的干擾與消除。方法 選取本院2015年4月~2016年3月收治的40例高脂血癥患者空腹靜脈血,應(yīng)用MINDRAY BS-400自動(dòng)分析儀,2000 r/min離心15 min,得到原高脂血漿。對(duì)原高脂血漿、高速離心血漿、乙醚抽取血漿與生理鹽水稀釋血漿進(jìn)行檢測(cè),測(cè)定血漿中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)、乳酸脫氫酶(LDH)以及淀粉酶(AMY)。對(duì)比3種檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果 3種檢測(cè)方法對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),高速離心血漿各種酶的指標(biāo)最高,其次為乙醚抽取血漿、生理鹽水稀釋血漿、原高脂血漿。結(jié)果 高脂血標(biāo)本檢測(cè)應(yīng)用高速離心法可減少高脂血標(biāo)本混濁度,減少對(duì)各種酶檢測(cè)的干擾。
關(guān)鍵詞:高脂血標(biāo)本;臨床檢驗(yàn);生化檢測(cè)
高脂血癥(HLM)臨床檢驗(yàn)工作非常重要,檢驗(yàn)準(zhǔn)確性會(huì)影響治療效果。在檢驗(yàn)技術(shù)不斷進(jìn)步下,危重癥患者高脂血標(biāo)本檢驗(yàn)項(xiàng)目逐漸增多,但在檢驗(yàn)中經(jīng)常出現(xiàn)血液標(biāo)本混濁的情況,脂肪乳注射造成的,如不能仔細(xì)處理、篩選會(huì)使血凝、聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)以及放射免疫(RIA)的測(cè)定結(jié)果出現(xiàn)偏差?,F(xiàn)就檢驗(yàn)干擾與消除報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 選取本院2015年4月~2016年3月收治的40例高脂血癥患者空腹靜脈血3.0 mL,將收集的血液放置到抗凝管內(nèi),檢測(cè)出三酰甘油11.2~23.4 mmol/L[1]。
1.2方法 對(duì)高脂乳凝標(biāo)本進(jìn)行2000 r/min離心處理,持續(xù)離心15 min,取分離出的高脂血漿,取不同量標(biāo)本應(yīng)用不同方法測(cè)定。所有標(biāo)本測(cè)定均應(yīng)用MINDRAY BS-400自動(dòng)分析儀,均嚴(yán)格按照儀器說(shuō)明書使用[2]。測(cè)定血漿中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)、乳酸脫氫酶(LDH)以及淀粉酶(AMY)。第1份血漿應(yīng)用原高脂血漿測(cè)定;高速離心法處理第2份高脂血漿;乙醚振動(dòng)搖晃離心3000 r/min后提取下層清澈血漿測(cè)定,為第3份血漿;第4份高脂血漿應(yīng)用生理鹽水4倍稀釋后測(cè)定[3]。
1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 本次研究使用SPSS 15.0軟件對(duì)計(jì)數(shù)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,標(biāo)準(zhǔn)差(x±s),使用 檢驗(yàn)計(jì)數(shù)資料,χ2檢測(cè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果,以P<0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2 結(jié)果
原高脂血漿、高速離心、乙醚抽取以及生理鹽水稀釋三種檢測(cè)方法對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),高速離心血漿各種酶的指標(biāo)最高,其次為乙醚抽取血漿、生理鹽水稀釋血漿、原高脂血漿,見(jiàn)表1。
3 討論
高脂血標(biāo)本定義如下:脂肪代謝或運(yùn)轉(zhuǎn)異常致使血漿中出現(xiàn)脂質(zhì)異常,常見(jiàn)血漿中膽固醇(TC)或者三酰甘油水平(TG)較平時(shí)升高。當(dāng)前,我國(guó)血清TC標(biāo)準(zhǔn)范圍是:正常值:TC<5.20 mmol/L,臨界升高:5.22~5.75 mmol/L;升高:TC>5.74 mmol/L。TC性別差異明顯,女性TC高于男性,兒童TC<5.40 mmol/L,臨界值為4.5~5.2 mmol/L,升高:TC≥5.2 mmol/L。高三酰甘油血癥因TC合成障礙或者家族遺傳造成,正常值為:兒童TG<1.21 mmol/L,成人TG<1.8 mmol/L,升高:TG>1.8 mmol/L。應(yīng)用超速離心法可以將血脂蛋白分為不同種類,包括乳糜微粒(CM)、超低密度脂蛋白(VLDL)、中間密度脂蛋白(IDL)以及低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)幾種。LDL中有60%的TC,LDL-C含量占50%,由此,LDL脂蛋白含有較多膽固醇,鑒于血漿中60%TC聚集在LDL內(nèi),出現(xiàn)高膽固醇血癥以后,TC濃度會(huì)迅速升高,與LDL水平達(dá)到一 致[4]。
當(dāng)前,臨床檢驗(yàn)中高脂血標(biāo)本對(duì)臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的干擾是亟待解決的問(wèn)題,最為有效的解決方法有:改變檢測(cè)方法以及檢測(cè)時(shí)間。比如,肌酐是代謝最終產(chǎn)物,也是腎功能診斷的重要指標(biāo),腎小球?yàn)V過(guò)能力決定了其在血液中的變化。由此,使用這種方法檢測(cè)可以有效將快速反應(yīng)與假性Cr物質(zhì)消除,減少Cr物質(zhì)的干擾;此外,可減少多項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)對(duì)標(biāo)本的干擾[5]。檢測(cè)指標(biāo)需要應(yīng)用更簡(jiǎn)單的方法檢測(cè),依據(jù)試劑不溶于水的特點(diǎn),在與高脂血清混合后可快速分離濃度高脂質(zhì)。最后,對(duì)凝血相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)使用免疫比濁法,需要按適當(dāng)比例稀釋,才能減少對(duì)指標(biāo)的干擾。即使以上方法能夠?qū)⒏咧獦?biāo)本干擾消除,但依然不能徹底消除清蛋白、GGT或者血尿素氮等指標(biāo)干擾。由此,臨床檢驗(yàn)中需要加強(qiáng)對(duì)去脂混合劑的選擇與應(yīng)用,常溫下應(yīng)用高速離心法,可快速分離出可用的標(biāo)本,進(jìn)而有效對(duì)下層清液進(jìn)行測(cè)定,將膽固醇濃度降低,消除各項(xiàng)檢測(cè)影響,為高脂血患者提供更為可靠、真實(shí)的檢驗(yàn)結(jié)果。除了應(yīng)用以上檢測(cè)方法干擾消除以外,熒光定量檢測(cè)(PCR)應(yīng)用的也較多,操作FQ-PCR較容易,更易于在實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展,主要檢測(cè)HBV、DNA,在不同血脂檢測(cè)中,TG是HVB、DNA、FQ-PCR檢測(cè)產(chǎn)生的主要干擾,血液中LDL與CM對(duì)熒光的屏蔽與吸收作用均是干擾機(jī)制。相關(guān)試驗(yàn)也證明,如果TG>2.56 mmol/L時(shí),血清HBV、DNA會(huì)呈現(xiàn)較低測(cè)定值,甚至出現(xiàn)檢測(cè)假性。在對(duì)脂血清標(biāo)本冷凍以后,高速離心分離出標(biāo)本TG>55.41 mmol/L時(shí),對(duì)檢測(cè)結(jié)果未產(chǎn)生影響,主要原因是TG密度不高,且均在冷凍過(guò)后漂浮在最上層,在過(guò)濾掉清夜以后,可以將其大量清除,標(biāo)本經(jīng)處理以后需多次稀釋,進(jìn)而使干擾減少[6]。高脂血對(duì)Hb的檢測(cè)也會(huì)產(chǎn)生一定干擾,可通過(guò)離心法將血漿渾濁分離出,然后用生理鹽水稀釋液替換渾濁血漿檢測(cè),可以有效將干擾消除。
綜上所述,應(yīng)用簡(jiǎn)單、可行的方法檢測(cè)高脂血標(biāo)本可減少各種干擾,將檢驗(yàn)準(zhǔn)確性提高,消除不利影響,為臨床指標(biāo)提供更加真實(shí)的依據(jù)。
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編輯/翟辰萬(wàn)