釵麗干　張帆

[摘要] 目的 探討GATA3在前列腺癌（PCa）組織中的表達并分析其與臨床病理特征的關系。 方法 選取2013年3月～2015年12月內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院病理科存檔的92例PCa穿刺活檢患者標本為PCa組及患者年齡相匹配的60例良性前列腺增生（BPH）蠟塊為BPH組，采用免疫組化法檢測兩組中GATA3的表達情況。 結果 PCa組中GATA3的陽性表達率為83.70%，BPH組中GATA3陽性表達率為10.00%，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。PCa組中GATA3蛋白表達的陽性率隨著Gleason評分增高、TNM分期越晚及血清PSA濃度增大而升高，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05），而GATA3蛋白的表達陽性率在不同年齡組、淋巴結是否發(fā)生轉移間差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。 結論 GATA3在PCa中高表達，提示其參與PCa的發(fā)展進程。

[關鍵詞] 前列腺癌；良性前列腺增生；GATA3；免疫組化

[中圖分類號] R737.25 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-7210（2017）01（c）-0023-04

[Abstract] Objective To investigate the expression of GATA3 in prostate cancer （PCa） and its correlation with clinico-pathologic parameters. Methods 92 cases of PCa biopsy specimens in Department of Pathology， Inner Mongolia People′s Hospital from March 2013 to December 2015 were selected as PCa group， 60 wax blocks of BPH with age matched were selected as BPH group. Immunohistochemical method was used to detect the expression of GATA3 in two groups. Results The positive expression rate of GATA3 in PCa group was 83.70%， positive expression rate of GATA3 in BPH group was 10.00%， with statistical difference （P < 0.05）. The positive expression rate of GATA3 in PCa patients was positively related to the development of Gleason score， TNM stages and serum PSA concentration （P < 0.05）， but not to the age and with or without lymphatic metastasis （P > 0.05）. Conclusion The over-expression of GATA3 may play an important role in the pathogenesis of PCa.

[Key words] Prostate cancer； Benign prostatic hyperplasia； GATA3； Immunohistochemistry

前列腺癌（prostate cancer，PCa）是男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤，約占男性全部癌癥種類的14%[1]。PCa的發(fā)病率及死亡率有顯著的地域性差異，歐美等發(fā)達國家的發(fā)病率及死亡率均高于發(fā)展中國家[2]。隨著我國社會經濟的快速發(fā)展以及整體醫(yī)療水平的提高，我國PCa的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增高的趨勢[3]。早診斷、早發(fā)現(xiàn)、早治療PCa，可有效改善臨床預后，降低發(fā)病率及病死率。傳統(tǒng)的早期診斷PCa是通過檢測患者血清中前列腺特異性抗原（prostate specific antigen，PSA）水平來實現(xiàn)，但該方法的特異度及靈敏度均不高[4-5]。為此，尋找一種特異度及靈敏度均高的PCa早期診斷分子標志物，對于PCa的診斷、預后及治療具有重要意義。作為GATA轉錄因子家族的GATA3，其羧基端具有2個鋅指模型結構，發(fā)揮抑癌基因的作用，在維持內皮細胞生物學功能方面具有重要作用[6-7]。研究表明，GATA3在許多組織和細胞如T淋巴細胞、胸腺細胞、乳腺的腺上皮細胞、交感神經系統(tǒng)以及皮膚毛囊中，具有促進細胞增殖、分化的重要作用，同時在參與多種人類腫瘤的分級、分化、轉移進程[8-10]。本研究將采用免疫組化法檢測GATA3在PCa及良性前列腺增生（benign prostatic hyperplasia，BPH）組織中的表達，分析其表達與臨床病理特征的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年3月～2015年12月內蒙古自治區(qū)人民醫(yī)院病理科存檔的92例PCa穿刺活檢患者標本為PCa組及患者年齡相匹配的60例BPH蠟塊為BPH組，標本經兩名以上資深病理醫(yī)師確診。納入標準：依據(jù)《前列腺癌診斷標準》（WS336-2011）[11]。排除標準：①曾接受抗雄激素及放療處理；②合并其他惡性腫瘤疾??；③既往有前列腺手術史及合并其他嚴重內科疾病者。92例PCa患者均為男性，年齡48～86歲，平均（59.27±10.94）歲。病理類型：按照Gleason評分進行病理分級[12]，高分化（Gleason 2～4分）22例；中分化（Gleason 5～7分）36例；低分化（Gleason 8～10分）34例。TNM臨床分期[13]：T1期30例，T2期22例，T3期30例，T4期10例；N0期84例，N1期8例；M0期82例，M1期10例。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化 石蠟標本切片厚度為5 μm。采用免疫組化法檢測，經脫蠟、脫水、抗原修復及染色，辣根過氧化物酶標記，蘇木精復染等操作。實驗步驟均嚴格按照試劑盒操作說明進行。鼠抗人GATA3單克隆抗體為福州邁新生物技術開發(fā)有限公司產品（型號MAB-0142）。即用型快速免疫組化檢測試劑盒（鼠）為福州邁新生物技術開發(fā)有限公司產品（型號806180031）?？贵w滴度為1∶50。以試劑公司提供的陽性對照片作為陽性對照，以PBS緩沖液代替一抗作為陰性對照。

1.2.2 結果判定 GATA3蛋白因子主要表達于細胞核，呈棕黃色，背景不著色。由兩位有經驗的病理醫(yī)師采用雙盲法獨立評估結果，均按照半定量積分法評分，每例均隨機觀察5個高倍視野（400×），進行半定量積分判定。①按陽性細胞率：陽性細胞<5%為0分，5%～25%為1分，>25%～50%為2分，>50%～75%為3分，>75%為4分；②按細胞染色強度：無著色為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將細胞陽性率與染色強度兩者積分相乘：0～1分為陰性（-），2～4分為弱陽性（+），5～8分為度陽性（++），9～12分為強陽性（+++）。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，計數(shù)資料采用χ2檢驗，檢驗值在臨界狀態(tài)時采用四格表精確概率法，等級資料采用秩和檢驗，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 GATA3在PCa及BPH組織中的表達

免疫組化染色結果顯示，GATA3蛋白著色于細胞核，呈現(xiàn)棕黃色陽性表達；PCa組患者中GATA3的陽性表達率高于BPH組，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05）。見圖1、表1。

2.2 PCa患者GATA3蛋白表達與臨床病理特征的關系

PCa患者GATA3蛋白表達的陽性率隨著Gleason評分增高、TNM分期越晚及血清PSA濃度增大而升高，差異有統(tǒng)計學意義（P < 0.05），而GATA3蛋白的表達陽性率在不同年齡組、淋巴結是否發(fā)生轉移間差異無統(tǒng)計學意義（P > 0.05）。見表2。

3 討論

近年來，PCa在我國的發(fā)病率呈上升趨勢。由于PCa的病程長，起病隱匿，患者因尿路癥狀就診時發(fā)現(xiàn)，但往往已經進展到晚期，錯過治療的最佳時期。所以，對于早期診斷PCa十分重要。目前我國對于PCa的診斷性初篩主要依靠于對血清PSA值的測試，但PSA值在灰區(qū)（4.0～10.0 ng/mL）時的靈敏度與特異度降低，則難以區(qū)分PCa與BPH[14-15]。

隨著PCa的分子生物學、腫瘤學以及免疫組化相關研究的發(fā)展，多種細胞因子、蛋白分子等共同參與PCa的發(fā)生和發(fā)展，與其預后評價有非常密切的關系。GATA3是GATA轉錄因子家族中的一員。研究表明，GATA3促進多種組織的正常發(fā)育、分化及增殖，GATA3促進T細胞的發(fā)展及向Th2細胞分化[16-17]。GATA3對于非造血細胞的發(fā)育同樣重要，如交感神經系統(tǒng)、腎臟、脂肪細胞、耳蝸及毛囊等[18]。GATA3在腫瘤分化進程中發(fā)揮關鍵的調節(jié)作用，若其缺失，則會加速伴有大量GATA3陰性腫瘤細胞的腫瘤擴散[19]。據(jù)報道，乳腺癌及結直腸癌組織中GATA3過表達且與腫瘤惡性進程相關[20]。近期研究提示，GATA3在膀胱小細胞癌呈現(xiàn)陽性反應，且在區(qū)分前列腺及膀胱起源的小細胞癌中具有潛在的診斷價值，同樣在非小細胞肺癌中也具有診斷價值[21]。

本研究中，免疫組化染色結果提示，GATA3主要定位于細胞核，呈現(xiàn)棕褐色陽性表達；與BPH組患者相比，PCa組中的GATA3的陽性表達率顯著升高。這說明GATA3在PCa的進程中發(fā)揮重要作用。Liu等[22]曾采用免疫組化技術檢測GATA3在不同腫瘤及正常組織中的表達情況，結果顯示，86%的尿路上皮癌和94%的乳腺癌GATA3表達陽性，認為GATA3可潛在作為乳腺及尿路上皮癌的特異性標記。此外，本研究還表明，PCa患者中GATA3蛋白表達的陽性隨著Gleason評分增高、TNM分期越晚、血清PSA濃度增大而增強，這提示GATA3在PCa惡變進程中扮演著重要角色；GATA3蛋白表達的陽性率在不同年齡組及淋巴結是否發(fā)生轉移間的表達差異不大，這也許與本研究納入樣本量偏少有關。

綜上所述，PCa組織中GATA3陽性表達率高于BPH組織，且隨著分化進程，TNM分期越晚及PSA濃度增高而出現(xiàn)表達增強，提示GATA3可能對PCa的發(fā)生、發(fā)展起促進作用，有望作為潛在的PCa診斷及治療的有效靶點。

[參考文獻]

[1] Gr■nberg H，Adolfsson J，Aly M，et al. Prostate cancer screening in men aged 50-69 years（STHLM3）：a prospective population-based diagnostic study [J]. Lancet Oncol，2015，16（16）：1667-1676.

[2] Akram ON，Mushtaq G，Kamal MA. An overview of current screening and management approaches for prostate cancer [J]. Curr Drug Metab，2015，16（8）：713-718.

[3] 齊金蕾，王黎君，周脈耕，等.1990～2013年中國男性前列腺癌疾病負擔分析[J].中華流行病學雜志，2016，37（6）：778-782.

[4] Prcic A，Begic E，Hiros M. Usefulness of total PSA value in prostate diseases diagnosis [J]. Acta Inform Med，2016，24（3）：156-161.

[5] Kirby R. The role of PSA in detection and management of prostate cancer [J]. Practitioner，2016，260（1792）：17-21，3.

[6] 謝軼群，裔海鷹，施俊義，等.GATA3在乳腺癌中的表達及其與預后的關系[J].中國癌癥雜志，2010，20（12）：911-914.

[7] Siddiqui MT，Seydafkan S，Cohen C. GATA3 expression in metastatic urothelial carcinoma in fine needle aspiration cell blocks：a review of 25 cases [J]. Diagn Cytopathol，2014，42（9）：809-815.

[8] Asselin-Labat ML，Sutherland KD，Barker H，et al. Gata-3 is an essential regulator of mammary-gland morphogenesis and luminal-cell differentiation [J]. Nat Cell Biol，2007，9（2）：201-209.

[9] Davis DG，Siddiqui MT，Oprea-Ilies G，et al. GATA-3 and FOXA1 expression is useful to differentiate breast carcinoma from other carcinomas [J]. Hum Pathol，2016，47（1）：26-31.

[10] Keshari RP，Wang W，Zhang Y，et al. Decreased expression of the GATA3 gene is associated with poor prognosis in primary gastric adenocarcinoma [J]. PLoS One，2014，9：e87195.

[11] 王行環(huán)，劉同族.提高認識規(guī)范診療-《前列腺癌診斷標準》解讀[J].中國衛(wèi)生標準管理，2011，2（4）：25-27.

[12] Mai ZP，Yan WG，Li HZ，et al. Clinical characteristics and outcome of gleason score 10 prostate cancer on core biopsy treated by external radiotherapy and hormone therapy [J]. Chin Med Sci J，2015，30（2）：90-94.

[13] Wang Q，Zhang JG，Wang W. Expression and significance of S100P，CD147，and OCT4 in different prostate cancer tissue TNM stages [J]. Genet Mol Res，2015，14（2）：6844-6851.

[14] 吳杰，趙睿哲，黃源，等.PSA“灰區(qū)”前列腺癌預測模型及隨訪系統(tǒng)的建立[J].中華泌尿外科雜志，2016，37（4）：280-283.

[15] 王煒，李傳剛，劉輝，等.前列腺特異性抗原對前列腺癌診斷價值的探討[J].中國醫(yī)科大學學報，2016，45（1）：61-65，69.

[16] Zhu YF，Hu JZ，Zhao PN，et al. All-transretinoic acid regulates Th1/Th2 balance in CD4+ T cells when GATA-3 is deficient [J]. Biomed Environ Sci，2013，26（9）：774-777.

[17] Kaufman CK，Zhou P，Pasolli HA，et al. GATA-3：an unexpected regulator of cell lineage determination in skin [J]. Genes Dev，2003，17（17）：2108-2122.

[18] Tsarovina K，Pattyn A，Stubbusch J，et al. Essential role of Gata transcription factors in sympathetic neuron development [J]. Development，2004，131（19）：4775-4786.

[19] Chou J，Provot S，Werb Z. GATA3 in development and cancer differentiation：cells GATA have it！ [J]. J Cell Physiol，2010，222（1）：42-49.

[20] Kouros-Mehr H，Bechis SK，Slorach EM，et al. GATA-3 links tumor differentiation and dissemination in a luminal breast cancer model [J]. Cancer Cell，2008，13（1）：141-152.

[21] Bezerra SM，Lotan TL，F(xiàn)araj SF，et al. GATA3 expression in small cell carcinoma of bladder and prostate and its potential role in determining primary tumor origin [J]. Hum Pathol，2014，45（5）：1682-1687.

[22] Liu H，Shi J，Wilkerson ML，et al. Immunohistochemical evaluation of GATA3 expression in tumors and normal tissues [J]. Am Soc Clin Pathol，2012，138（1）：57-64.

（收稿日期：2016-10-02 本文編輯：李亞聰）