李美娣涂玉蓉武 力*溫 馨陳素珍江耀倫

(1.廣州華農(nóng)大實(shí)驗(yàn)獸藥有限公司,廣州五山 510642; 2.廣東省現(xiàn)代養(yǎng)豬數(shù)據(jù)化工程技術(shù)研究中心,廣東廣州 510642)

獸用抗應(yīng)激中藥口服液對(duì)雞的安全性評(píng)價(jià)

李美娣1，2涂玉蓉1，2武 力1，2*溫 馨1，2陳素珍1，2江耀倫1，2

(1.廣州華農(nóng)大實(shí)驗(yàn)獸藥有限公司,廣州五山 510642; 2.廣東省現(xiàn)代養(yǎng)豬數(shù)據(jù)化工程技術(shù)研究中心,廣東廣州 510642)

為了考察畜禽用抗應(yīng)激中藥口服液臨床上對(duì)雞的安全性，根據(jù)《獸用中藥、天然藥物臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》，進(jìn)行藥物對(duì)雞的安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)，觀察雞的靶器官組織的可能性損害情況，了解靶動(dòng)物雞對(duì)藥物的劑量耐受范圍，為臨床研究和安全用藥提供科學(xué)的依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試雞及樣品

1日齡嶺南黃商品代肉雞，購自廣東智威農(nóng)業(yè)科技股份有限公司。

畜禽用抗應(yīng)激口服液，由廣州華農(nóng)大實(shí)驗(yàn)獸藥有限公司研制。

1.2 試驗(yàn)分組與處理

將參試雞只進(jìn)行了分組，分組情況見表1。

表1 試驗(yàn)雞只分組情況

2 評(píng)價(jià)指標(biāo)

2.1 臨床癥狀

試驗(yàn)期間詳細(xì)觀察靶動(dòng)物是否表現(xiàn)出與藥物相關(guān)的不良反應(yīng)，包括采食、飲水、行為異常、精神抑制及排糞異常等變化情況，并記錄雞只發(fā)病死亡情況，記錄試驗(yàn)前及試驗(yàn)結(jié)束時(shí)動(dòng)物體重和飼料消耗量。

2.2 增重情況和飼料報(bào)酬測定

分別于第0d和第14d對(duì)各組雞逐只稱重和飼料消耗量，計(jì)算平均增重、相對(duì)增重率和料肉比。

2.3 血液生理指標(biāo)測定

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別采集各組雞血液，逐只采集，測定紅細(xì)胞數(shù)（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、紅細(xì)胞平均血紅蛋白量（MCH）等血液學(xué)指標(biāo)。

2.4 血液生化指標(biāo)測定

在試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別采集各組雞血清，逐只采集，測定谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、總蛋白、白蛋白、尿素氮（BUN）和肌酐（CRE）等血液生化指標(biāo)。

2.5 組織病理學(xué)檢查

在第14d宰殺所有試驗(yàn)雞，采集心、肝、脾、腎、腦制作病理組織切片，在體視顯微鏡下觀察存在的可疑病變。

2.5 組織病理學(xué)檢

表2 增重情況和飼料轉(zhuǎn)化率（x±S.E.，n=20）

3.1 臨床癥狀

在整個(gè)試驗(yàn)期間，空白對(duì)照組和用藥組雞只均未發(fā)生肉眼可見的中毒現(xiàn)象或死亡情況，雞只行動(dòng)自由，精神狀態(tài)良好，飲食欲正常，糞便成形、無血便、綠便、稀便等，糞便上有白色尿酸鹽沉積。

3.2 增重情況和飼料轉(zhuǎn)化率

對(duì)參試雞的增重情況和飼料轉(zhuǎn)化率做了統(tǒng)計(jì)，結(jié)果詳見表2。

從表2可以看出，連續(xù)飲水給藥14d，1、3、5倍劑量組平均增重與空白對(duì)照組平均增重?zé)o顯著的差異（P＞0.05），3倍劑量組和5倍劑量組平均增重與1倍劑量組平均增重?zé)o顯著差異（P＞0.05）。

3.3 血液生理指標(biāo)測定結(jié)果

連續(xù)飲水給藥14d，測定雞只血液學(xué)指標(biāo)，結(jié)果如表3所示，試驗(yàn)組和空白對(duì)照組比較，紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白量、紅細(xì)胞壓積、紅細(xì)胞平均體積和紅細(xì)胞平均血紅蛋白量無顯著差異（P＞0.05），1、3、5倍劑量組血液學(xué)生理參數(shù)組間差異不顯著（P＞0.05）。

3.4 血液生化指標(biāo)測定結(jié)果

在第14d采集血清，測定谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、總蛋白、白蛋白、尿素氮和肌酐等血液生化指標(biāo)，結(jié)果如表4所示。試驗(yàn)結(jié)果表明，連續(xù)給藥14d后，1、3、5倍劑量組各項(xiàng)生化指標(biāo)和空白對(duì)照組無顯著差異（P＞0.05）。

3.5 組織病理學(xué)檢查

連續(xù)給藥14d后，剖殺所有試驗(yàn)雞，肉眼觀察組織器官是否出現(xiàn)異常，并取心、肝、脾、腎、腦制備組織切片，在顯微鏡下觀察是否有異常病變。

3.5.1 病理剖檢變化

畜禽用抗應(yīng)激口服液按照1、3、5倍劑量連續(xù)給藥14d，雞只組織器官如心、肝、脾、肺、腎、肌肉組織、皮膚組織等均未見肉眼可見的病理變化。

3.5.2 組織學(xué)檢查

取心、肝、脾、腎、腦分別用10%福爾馬林溶液和波音氏固定液固定，采用石蠟切片法進(jìn)行切片，將切片在體視顯微鏡下觀察。

（1）心肌

各劑量組與空白對(duì)照組心肌組織結(jié)構(gòu)清晰，未見壞死、變性、斷裂，間質(zhì)內(nèi)未見炎性細(xì)胞浸潤。

（2）肝臟

各劑量組與空白對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)清楚可見，肝細(xì)胞未見腫脹、變性及壞死，可見其間質(zhì)內(nèi)匯管區(qū)。

（3）脾臟

各劑量組與對(duì)空白照組脾小體的結(jié)構(gòu)正常，未見有壞死、變性等損傷，紅白髓界限清楚。

（4）腎臟

各劑量組和空白對(duì)照組腎臟皮髓質(zhì)界限清楚，未見有腫脹及滲出液，腎小球未見纖維化。

（5）腦

各劑量組和空白對(duì)照組腦組織神經(jīng)元結(jié)構(gòu)清晰可見，未見神經(jīng)元的腫大、變性、壞死，未見膠質(zhì)細(xì)胞的溶解，未見樹突及軸突的消失。未見細(xì)胞核的偏移或消失。

表3 試驗(yàn)前和試驗(yàn)后血液學(xué)參數(shù)結(jié)果（x±S.E.，n=20）

表4 試驗(yàn)后血液生化指標(biāo)結(jié)果（x±S.E.，n=20）

4 小結(jié)

本研究進(jìn)行了畜禽用抗應(yīng)激口服液對(duì)靶動(dòng)物雞的安全性試驗(yàn)評(píng)價(jià)，設(shè)置1、3、5倍推薦劑量組和空白對(duì)照組，連續(xù)使用14d，觀察雞臨床表現(xiàn)，測定其生長性能、飼料轉(zhuǎn)化率、血液生理生化指標(biāo)、病理組織變化等。結(jié)果顯示，按照1、3、5倍推薦劑量連續(xù)使用14d，試驗(yàn)組與空白對(duì)照組相比，其臨床表現(xiàn)、生長性能、飼料轉(zhuǎn)化率、血液生理生化指標(biāo)和病理組織切片等均未明顯差異，這說明其對(duì)靶動(dòng)物雞無不良作用，安全性較好。

2016年廣州市科技計(jì)劃項(xiàng)目（2017010160426）、2016年天河區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目（201608YG001）

李美娣（1981-），女，廣州梅州人，博士，高級(jí)獸醫(yī)師，從事新獸藥開發(fā)。

武力（1970-），男，福建莆田人，博士，高級(jí)獸醫(yī)師。