林杰，盧金清，江漢美，屠寒，周坤

（湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省藥用植物研發(fā)中心，武漢 430065）

春、冬季采收肉豆蔻中揮發(fā)性成分分析

林杰，盧金清＊，江漢美，屠寒，周坤

（湖北中醫(yī)藥大學(xué)湖北省藥用植物研發(fā)中心，武漢 430065）

目的：研究春、冬兩季采收的肉豆蔻中的揮發(fā)性成分，探討不同季節(jié)采收對其揮發(fā)性成分的影響。方法：采用HS-SPME-GC-MS法對春、冬季采收的肉豆蔻揮發(fā)性成分進(jìn)行對比分析。結(jié)果：從春季采收的肉豆蔻中檢測出揮發(fā)性成分55種，鑒定出28種，占揮發(fā)性成分總量的89.14%；從冬季采收的肉豆蔻中檢測出揮發(fā)性成分48種，鑒定出26種，占揮發(fā)性成分總量的92.85%；比較2次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)不同季節(jié)采收的肉豆蔻中揮發(fā)性成分在成分及含量上有較大差異。結(jié)論：該研究為肉豆蔻的揮發(fā)性成分分析提供了方法學(xué)基礎(chǔ)，為其開發(fā)利用提供了物質(zhì)基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

肉豆蔻；不同季節(jié)；揮發(fā)性成分；頂空固相微萃取

肉豆蔻為肉豆蔻科植物肉豆蔻（MyristicafragransHoutt.）的干燥種仁，辛溫；歸脾、胃、大腸經(jīng)；具有溫中行氣、澀腸止瀉的功效；用于脾胃虛寒、久瀉不止、脘腹脹痛、食少嘔吐［1］。據(jù)《本草經(jīng)疏》記載：“肉豆寇，辛味能散能消，溫氣能和中通暢。其氣芬芳，香氣先入脾，脾主消化，溫和而辛香，故開胃，胃喜暖故也。故為理脾開胃、消宿食、止泄瀉之要藥?！痹摲N為熱帶著名的香料和藥用植物，冬、春兩季果實(shí)成熟時(shí)采收。肉豆蔻中含有豐富的揮發(fā)性成分，其中揮發(fā)油、脂肪油、苯丙素、木質(zhì)素等為主要化學(xué)成分［2］。肉豆蔻揮發(fā)油具有較強(qiáng)的抑菌、抗氧化作用［3］。Halen等［4］研究發(fā)現(xiàn)不同濃度的肉豆蔻揮發(fā)油對乳腺癌細(xì)胞株、表皮皮膚癌癥細(xì)胞株有細(xì)胞毒性，從而起到抗癌的作用。肉豆蔻具有辛辣、濃烈的香氣，能去除食材中的異味，起到開胃、增強(qiáng)食欲、促進(jìn)消化的作用。肉豆蔻是傳統(tǒng)中餐的常用調(diào)味品，可作為菜肴、肉制品及醬腌菜的調(diào)味料。在國外菜品制作中也占有重要地位，是咖喱粉的主要原料。本研究通過對春、冬兩季肉豆蔻揮發(fā)性成分的對比分析，為更好地利用肉豆蔻提供科學(xué)依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

Agilent6890/5973型氣相-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國Hewlett-Packard公司；手動(dòng)頂空固相微萃取裝置 德國IKA公司；65μm PDMS/DVB萃取纖維頭 美國Supelco公司；頂空瓶（5mL）；電子天平 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；電子調(diào)溫電熱套 天津市泰斯特儀器有限公司；RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮生化儀器廠。

1.2 材料

春、冬季采收的肉豆蔻，經(jīng)過湖北中醫(yī)藥大學(xué)生藥教研室張秀橋教授鑒定為肉豆蔻科植物肉豆蔻（MyristicafragransHoutt.）的干燥種仁。

2 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果

2.1 GC-MS條件

GC條件：色譜柱為HP-5MS（30m×0.25mm× 0.25μm）彈性石英毛細(xì)管柱，進(jìn)樣口溫度為250℃，載氣為高純氦氣（99.999%），流速為1.0mL/min，不分流進(jìn)樣。經(jīng)過反復(fù)摸索最終確定程序升溫為：初始溫度40℃，以13℃/min升溫至53℃，保留2min，以2℃/min的速率升溫至54℃，以1℃/min的速率升溫至57℃，保留2min，以1℃/min的速率升溫至60℃，以5℃/min升溫至220℃。

MS條件：離子源為EI源；離子源溫度230℃；四級(jí)桿溫度150℃；電子能量70eV；倍增管電壓1.2kV；接口溫度280℃；質(zhì)量范圍35～550m/z。

2.2 結(jié)果

采用GC-MS計(jì)算機(jī)聯(lián)用儀分析復(fù)方中揮發(fā)性化學(xué)成分，經(jīng)化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)及面積歸一化法從其總離子流圖中計(jì)算各組分的相對百分含量，按各峰的質(zhì)譜圖，并結(jié)合NIST05譜庫對化學(xué)成分進(jìn)行檢索鑒定。

采用HS-SPME法從春季采收的肉豆蔻中檢測出揮發(fā)性成分55種，鑒定出28種，占揮發(fā)性成分總量的89.14%，主要包括烯烴類、醇類、醛類、酮類等，其中含量最高的為皮蠅磷（39.23%），含量較高的成分有蒎烯（13.38%）、雙戊烯（9.63%）、順式-環(huán)己醇（4.21%）、欖香素（3.92%）等。從冬季采收的肉豆蔻中檢測出揮發(fā)性成分48種，鑒定出26種，占揮發(fā)性成分總量的92.85%，其中含量較高的成分有皮蠅磷（34.94%）、蒎烯（14.65%）、右旋萜二烯（12.24%）、萜品烯（4.88%）、欖香素（3.56%）等。經(jīng)對比發(fā)現(xiàn)，春、冬兩季采收的肉豆蔻揮發(fā)性成分在成分及含量上有較大差異，具體結(jié)果見圖1、圖2和表1。

圖1 春季采收肉豆蔻中揮發(fā)性成分TIC圖Fig.1TIC map of the volatile components ofMyristicafragransHoutt.harvested in spring

圖2 冬季采收肉豆蔻中揮發(fā)性成分TIC圖Fig.2TIC map of the volatile components ofMyristicafragransHoutt.harvested in winter

表1 春、冬季采收肉豆蔻中揮發(fā)性成分Table 1The volatile components ofMyristicafragransHoutt.harvested in spring and winter

3 討論

綜上所述，從春季采收的肉豆蔻中鑒定出28種成分，從冬季采收的肉豆蔻中鑒定出26種成分，其中共有成分有皮蠅磷、蒎烯、3-蒈烯、雙噻唑等17個(gè)成分，分別占76.15%，73.14%。春、冬兩季采收的肉豆蔻中揮發(fā)性成分含量最高的均為皮蠅磷，但其含量差異較大，分別為39.23%，34.94%。皮蠅磷常用作蓄用殺蟲劑，為低毒有機(jī)磷殺蟲劑，可抑制膽堿酯酶活性，引起動(dòng)物中毒，出現(xiàn)慢性腹瀉，并顯現(xiàn)出皮毛粗亂、精神不振等。研究發(fā)現(xiàn)：肉豆蔻揮發(fā)油具有一定的細(xì)胞毒性，主要表現(xiàn)為中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性［5］。由此推斷，肉豆蔻揮發(fā)油的毒性很可能與含量最高的皮蠅磷有關(guān)。蒎烯在春、冬兩季采收的肉豆蔻中均有較大含量，分別為13.38%，14.65%。蒎烯是合成萜類香料如芳樟醇、香葉醇、香茅醇、檸檬醛、紫羅蘭酮、龍腦、樟腦等的重要起始原料，可少量用于紫丁香等花香型香精和松針型香精中；極微量用于檸檬、香檸檬、肉豆蔻、香葉、薰衣草等香型中；微量用于食用香精，如檸檬、肉豆蔻等香精?，F(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究表明：蒎烯具有較強(qiáng)的祛痰、抑菌、消炎和止咳作用［6］。欖香素同樣是肉豆蔻揮發(fā)性成分中的重要組成成分，分別占3.92%，3.56%，欖香素能透過血腦屏障，具有致幻作用［7］。雙戊烯在春季采收的肉豆蔻中含量較高，占9.63%，而冬季采收的肉豆蔻中不含此成分。雙戊烯是合成樟腦生產(chǎn)過程中的一種副產(chǎn)品，常溫下為無色易燃液體，有好聞的檸檬香味，不溶于水，與乙醇混溶，用作合成橡膠、香料的原料，也用作溶劑。右旋萜二烯在冬季采收的肉豆蔻中占12.24%，而春、季采收的肉豆蔻中沒有檢測到該種成分，研究表明：右旋萜二烯對泡菜獨(dú)特風(fēng)味的形成具有重要作用［8］。

肉豆蔻中含有豐富的揮發(fā)性成分，其揮發(fā)油可用于食品、藥品、香料（香水、香皂、化妝品）中。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，冬季采收的肉豆蔻中主要揮發(fā)性成分與春季采收的肉豆蔻中主要揮發(fā)性成分有較大差異，不僅表現(xiàn)在揮發(fā)性成分的含量上，而且揮發(fā)性成分的種類也有差別。春季采收的肉豆蔻中主要含有皮蠅磷、蒎烯、雙戊烯等，適合作為香料生產(chǎn)的原料；冬季采收的肉豆蔻主要含有皮蠅磷、蒎烯、右旋萜二烯等，適合作為調(diào)味品及藥用原料。

［1］國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典（2015年版一部）［M］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2015：136.

［2］張蕾，徐云峰，沈碩，等.肉豆蔻的化學(xué)成分研究［J］.中國現(xiàn)代中藥，2010，12（6）：16-19，42.

［3］方愛娟，徐凱節(jié).肉豆蔻的化學(xué)成分及生物活性研究進(jìn)展［J］.中國藥業(yè)，2013，22（15）：113-115.

［4］Mary Helen P A，Vargheese T A，Jeeja Kumari J J，et al.Phytochemical analysis and anticancer terbutylhy droperoxide induced oxidative damage［J］.Biofactors，2007，29（1）：1.

［5］韓蕾，馬穎芳，袁子民，等.肉豆蔻揮發(fā)油的藥理毒理研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2007，25（5）：900-902.

［6］張玲慧，武靜蕊，王麗英.桉檸蒎治療慢性阻塞性肺疾病急性發(fā)作期療效觀察［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2015，24（1）：79-80.

［7］趙秀玲.肉豆蔻生理活性成分研究進(jìn)展［J］.中國調(diào)味品，2013，38（10）：1-6.

［8］徐丹萍，蒲彪，陳安均，等.傳統(tǒng)四川泡菜中揮發(fā)性成分分析［J］.食品與發(fā)酵工業(yè)，2014（11）：227-232.

Analysis of Volatile Components inMyristicafragransHoutt.Harvested in Spring and Winter

LIN Jie，LU Jin-qing＊，JIANG Han-mei，TU Han，ZHOU Kun
（Research and Development Center of Medicinal Plant in Hubei Province，Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430065，China）

Objective：Study on the volatile components ofMyristicafragransHoutt.harvested in spring and winter and the effects of harvest time on the volatile components.Methods：The comparative analysis of volatile components ofMyristicafragransHoutt.harvested in spring and winter by HS-SPME-GC-MS is carried out.Results：There are 55kinds of volatile components detected fromMyristicafragransHoutt.harvested in spring，28kinds of volatile components are identified，accounting for 89.14%of the total content of volatile components；there are 48kinds of volatile components detected fromMyristicafragransHoutt.harvested in winter，26kinds of volatile components are identified，accounting for 92.85%of the total content of volatile components.It is found that the composition and content of volatile components ofMyristica fragransHoutt.harvested in different seasons are different by comparing these two experimental results.Conclusion：This study has provided the methodology basis for the volatile components analysis ofMyristicafragransHoutt.and provided the material foundation and experimental basis for its development and utilization.

MyristicafragransHoutt.；different seasons；volatile components；headspace solid-phase microextraction

TS207.3

A

10.3969/j.issn.1000-9973.2017.03.027

1000-9973（2017）03-0118-03

2016－09－17 ＊通訊作者

林杰（1991－），女，碩士，主要從事中藥及其天然藥物活性成分的研究；盧金清（1955－），男，教授，主要從事中藥及其天然藥物活性成分的研究。