洪良

430400湖北省武漢市新洲區(qū)中醫(yī)院

大網(wǎng)膜乳斑中腫瘤相關(guān)性巨噬細胞數(shù)量與胃癌的關(guān)系

洪良

430400湖北省武漢市新洲區(qū)中醫(yī)院

目的：探討大網(wǎng)膜乳斑中腫瘤相關(guān)性巨噬細胞(TAMs)數(shù)量與胃癌的關(guān)系。方法：收治胃癌患者100例，選擇同期良性胃部疾病患者100例為對照組，比較兩組大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞表達情況，探討大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞與T分期相關(guān)性。結(jié)果：不同組別大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞表達情況比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞與T分期相關(guān)性分別為-0.759(P＜0.05)，0.693(P＜0.05)。結(jié)論：大網(wǎng)膜乳斑中TAMsCD206+高表達及CD68+/CD206-低表達與腫瘤分期密切相關(guān)。

大網(wǎng)膜乳斑；腫瘤相關(guān)性巨噬細胞；胃癌

我國是胃癌高發(fā)國家，胃癌患者確診時多處于中晚期，由于根治性手術(shù)難以達到生物學上的腫瘤根除，造成術(shù)后復(fù)發(fā)率居高不下[1]。目前有研究發(fā)現(xiàn)巨噬細胞在腫瘤中浸潤，稱為腫瘤相關(guān)性巨噬細胞(TAMs)。有研究指出TAMs與胃癌患者預(yù)后、腫瘤浸潤程度等有關(guān)[2]。2013年1月-2015年2月收治胃癌患者，分析大網(wǎng)膜乳斑中TAMs的測定價值，現(xiàn)報告如下。

資料與方法

2013年1月-2015年2月選擇我院胃癌患者，疾病腫瘤部位為胃竇部、胃體部、胃底賁門，分化程度為高分化、中分化、低分化，共計100例。以同期我院進行胃鏡檢查，診斷為良性胃部疾病的患者100例為對照組。研究組中，男49例，女51例，平均年齡(54.6±19.5)歲。對照組中，男45例，女55例，平均年齡(55.7±18.1)歲。兩組性別、年齡等一般資料差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。

入選標準：①初次診斷為胃癌，未接受放化療。②性別不限。③排除：合并其他惡性腫瘤者。

主要試劑及器材：①試劑：TBS緩沖液、無支原體胎牛血清、瑞氏染液、臺盼藍染料、EDTA抗原修復(fù)液、胰酶。②器材：光學顯微鏡、循環(huán)水浴箱、深低溫冰箱、低溫離心機、培養(yǎng)箱、流式細胞儀、全白動酶聯(lián)免疫分析儀。

試驗方法：①改良三步培養(yǎng)法制備大網(wǎng)膜乳斑巨噬細胞懸液。②Ficoll密度梯度離心法純化和培養(yǎng)大網(wǎng)膜乳斑巨噬細胞。③觀察大網(wǎng)膜乳斑巨噬細胞形態(tài)。④瑞氏染色法鑒定大網(wǎng)膜乳斑巨噬細胞形態(tài)。⑤免疫熒光染色鑒定大網(wǎng)膜乳斑CD68+巨噬細胞。⑥FCM檢測大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞的表達。

觀察指標：對比不同組別大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞表達情況，探討大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞與T分期相關(guān)性。

統(tǒng)計學方法：采用SPSS中文版進行統(tǒng)計，計量資料采用t檢驗，采用χ2檢驗，P＜0.05差異有統(tǒng)計學意義。

結(jié)果

大網(wǎng)膜乳斑巨噬細胞形態(tài)：呈圓形或者橢圓形，部分細胞鈍圓形突起，伸出偽足。胞核小，卵圓形，著色深，核仁不明顯。

免疫熒光染色鑒定大網(wǎng)膜乳斑CD68+巨噬細胞：40×視野下，呈現(xiàn)黃綠色熒光，平均數(shù)量(16.2±1.2)個/HP。

不同組別大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞表達情況：不同組別大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞表達情況比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，見表1。

大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞與T分期相關(guān)性：大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞與T分期相關(guān)性分別為-0.759(P＜0.05)，0.693(P＜0.05)。

表1 不同組別大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞表達情況(±s)

表1 不同組別大網(wǎng)膜乳斑CD68+/CD206-、CD206+巨噬細胞表達情況(±s)

組別 CD68+/CD206-CD206+對照組 8.26±0.16 0.15±0.21研究組(T1～3) 7.26±0.11 1.25±0.23研究組(T4) 2.63±0.35 5.43±1.58 t 5.12 5.47 P＜0.05 ＜0.05

討論

胃癌是胃腸道最常見的惡性腫瘤，發(fā)病率及致死率高，大部分患者死于腹膜轉(zhuǎn)移。到目前為止，手術(shù)仍然是胃癌首選的治療方式，手術(shù)是胃癌患者唯一可得到治愈的選擇，胃癌的手術(shù)方案要求充分切除腫瘤、淋巴結(jié)和轉(zhuǎn)移可能的大網(wǎng)膜[3]。

有學者分析T1～3者，腫瘤未侵犯漿膜乳斑中巨噬細胞表達CD206+的M2型較少，仍以M1型為主，發(fā)展到晚期以M2型為主，高表達膜分子CD206+。還有研究指出TAMs在胃癌的發(fā)展中有雙重作用。在早期TAMs激活成M1型，發(fā)揮殺腫瘤作用，手術(shù)中不建議行網(wǎng)膜全除術(shù)。晚期的免疫逃逸期，胃癌細胞編輯改變巨噬細胞表型，使M1型向M2型轉(zhuǎn)變，乳斑成為滋養(yǎng)腫瘤細胞的位點，手術(shù)應(yīng)該積極將其切除[4]。還有學者通過對不同分期的胃癌患者進行對比，結(jié)果發(fā)現(xiàn)網(wǎng)膜全除術(shù)只能提高T4期患者的生存期，早期胃癌患者中接受網(wǎng)膜部分切除者的生存期高于網(wǎng)膜全切者。

乳斑主要由巨噬細胞組成，有學者對18例胃癌患者進行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)乳斑的細胞數(shù)640/個，其中巨噬細胞占有45%～48%。腫瘤聚集于網(wǎng)膜乳斑的機制主要有：①乳斑含有豐富血液供應(yīng)；②乳斑間皮細胞內(nèi)血管內(nèi)皮細胞生長因子高表達[5]。

綜上所述，本文認為大網(wǎng)膜乳斑中TAMsCD206+高表達及CD68+/CD206-低表達與腫瘤分期密切相關(guān)。

[1]李繼承.人與小鼠腹膜乳斑的研究[J].解剖學報,2014,27(1):88-91.

[2]吳霞.腫瘤免疫編輯[J].現(xiàn)代免疫學,2012,4 (6):518-521.

[3]安偉德,胡祥,梁品,等.腹膜乳斑與胃癌細胞在腹膜播散中的關(guān)系[J].中國胃腸外科雜志,2000,3(3):172-174.

[4]Dunn GP,Bruce AT,Ikeda H,et al.Cancer immunoediting:from immunosurveillance to tummorescape[J].Nat Immunol,2012,3(11):991-998.

[5]HagiwaraA,TakahashiT,SaiaiK,et al.Milky spots astheim-plantationsite for malignant cells in peritoneal dissemination in mice[J]. Cancer Res,2014,53(3):687-692.

Relationship between tumor associated macrophages and gastric cancer in the greater omentum milky spot

Hong Liang
The Traditional Chinese Medicine Hospital of Xinzhou District,Wuhan City,Hubei Province 430400

Objective:To explore the relationship between tumor associated macrophages(TAMs)and gastric cancer in the greater omentum milky spot.Methods:100 patients with gastric cancer were selected.100 patients with benign gastric disease were selected as the control group.We compared the expression of greater omentum milky spot CD68+/CD206-and CD206+macrophages of the two groups,and investigated the correlation between the greater omentum milky spot CD68+/CD206-and CD206+macrophages and the T stage.Results:In different groups,the expression of greater omentum milky spot CD68+/CD206-and CD206+macrophages were different(P＜0.05).The correlation between the greater omentum milky spot CD68+/CD206-and CD206+macrophages and the T stage was-0.759(P＜0.05),0.693(P＜0.05).Conclusion:The high expression of TAMs CD206+and low expression of CD68+/CD206-in the greater omentum milky spot were closely related with tumor stage.

Greater omentum milky spot;Tumor associated macrophages;Gastric cancer

10.3969/j.issn.1007-614x.2017.3.68