糖尿病腎病早期診斷標(biāo)志物的研究新進(jìn)展

宋麗妮 劉敬怡 張怡塵 曹 曦 袁明霞 楊金奎

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院內(nèi)分泌科 糖尿病防治研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100730)

·內(nèi)分泌與代謝病專題 ·

糖尿病腎病早期診斷標(biāo)志物的研究新進(jìn)展

宋麗妮 劉敬怡 張怡塵 曹 曦 袁明霞 楊金奎*

(首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院內(nèi)分泌科 糖尿病防治研究北京市重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京 100730)

糖尿病腎病 (diabetic kidney disease, DKD)是2型糖尿病病人 (type 2 diabetes mellitus, T2DM)最常見、最嚴(yán)重的慢性合并癥，發(fā)病率逐年升高，已成為危害人類的重大疾病。早期經(jīng)治療后多可逆轉(zhuǎn)，晚期則發(fā)展成終末期腎病。因此，及早診斷和預(yù)測(cè)DKD對(duì)臨床治療顯得尤為重要。目前，臨床上以微量白蛋白尿(microalbuminuria, MAU)作為診斷2型糖尿病腎損害的早期指標(biāo)，然而，其預(yù)測(cè)價(jià)值受到質(zhì)疑。近年來(lái)，人們發(fā)現(xiàn)蛋白質(zhì)組學(xué)可能成為診斷糖尿病腎病的新工具，觸珠蛋白(haptoglobin, HP)這種多功能的急性期時(shí)相蛋白可能與DKD的發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)。因此，本文就觸珠蛋白與糖尿病腎病發(fā)病機(jī)制的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

糖尿病腎??；微量白蛋白尿；觸珠蛋白

隨著人們生活水平的逐步提高，生活方式的改變及人均壽命的延長(zhǎng)，糖尿病的發(fā)生率呈現(xiàn)快速增長(zhǎng)的態(tài)勢(shì)。糖尿病微血管合并癥包括糖尿病腎病(diabetic kidney disease,DKD)和糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy, DR)，糖尿病腎病可能導(dǎo)致終末期腎病，糖尿病視網(wǎng)膜病變則會(huì)造成致盲眼病。對(duì)于糖尿病視網(wǎng)膜病變，目前可以利用數(shù)字眼底視網(wǎng)膜照相進(jìn)行早期檢測(cè)[1-2]，而對(duì)于糖尿病腎病，本課題組近期報(bào)道的一項(xiàng)病例對(duì)照研究和5.3年前瞻性隊(duì)列研究[3]表明，威脅視力的增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變(proliferative diabetic retinopathy, PDR)的特異性尿蛋白觸珠蛋白是預(yù)測(cè)2型糖尿病 (type 2 diabetes mellitus, T2DM)病人慢性腎功能不全(chronic renal insufficiency, CRI)的指標(biāo)。課題組前期已經(jīng)對(duì)尿觸珠蛋白(haptoglobin,HP)是如何被用來(lái)作為生物標(biāo)志物預(yù)測(cè)PDR以及DKD的研究提供了初步的數(shù)據(jù)。

1 糖尿病視網(wǎng)膜病變與糖尿病腎病的相關(guān)性

糖尿病是一種常見的慢性疾病，糖尿病病人經(jīng)常出現(xiàn)其他非糖尿病慢性腎臟疾病。腎活檢作為“金標(biāo)準(zhǔn)”，對(duì)于糖尿病腎病最有確診價(jià)值[4]，但不符合臨床實(shí)際。目前，臨床上多采用微量白蛋白尿作為預(yù)測(cè)糖尿病腎病的指標(biāo)[5]。然而，近年來(lái)，采用微量白蛋白尿預(yù)測(cè)糖尿病腎病的價(jià)值受到質(zhì)疑。原因如下，首先，被檢測(cè)有微量白蛋白尿的糖尿病腎病病人中大部分可以恢復(fù)到正常尿液[5-6]。其次，只有少數(shù)病人進(jìn)展為蛋白尿[7-8]。第三，1型糖尿病(type 1 diabetes mellitus, T1DM)病人中有1/3的病人在檢測(cè)出微量白蛋白尿而非蛋白尿后不久就發(fā)展為終末期糖尿病腎病[9-10]。

2007年，美國(guó)腎臟疾病基金會(huì)建議：對(duì)于大多數(shù)2型糖尿病病人，當(dāng)出現(xiàn)微量白蛋白尿伴有糖尿病視網(wǎng)膜病變時(shí)才能診斷為糖尿病腎??；而腎小球?yàn)V過率(estimated glomerular filtration rate, eGFR)過低或快速降低的病人，即使未出現(xiàn)微量白蛋白尿，也能診斷糖尿病腎病[11]。一項(xiàng)為期15年的前瞻性研究[12]顯示，視網(wǎng)膜病變，尤其是嚴(yán)重視網(wǎng)膜病變，與糖尿病腎病顯著相關(guān)。因此，糖尿病視網(wǎng)膜病變是糖尿病腎病診斷的一個(gè)重要的臨床生物標(biāo)志。

本課題組經(jīng)過多年研究發(fā)現(xiàn)，威脅視力的增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變是糖尿病腎病診斷的一個(gè)重要標(biāo)志[3]。與無(wú)視網(wǎng)膜病變的糖尿病病人相比，增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變病人的尿蛋白定量值加快了糖尿病誘導(dǎo)的腎臟損害。為了闡明這個(gè)假設(shè)，筆者在威脅視力的增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變病例對(duì)照組中對(duì)2型糖尿病伴微量白蛋白尿(microalbuminuria, MAU)的病人的尿液標(biāo)本進(jìn)行鳥槍法蛋白質(zhì)組學(xué)分析[1,13]。此分析顯示在相較于無(wú)視網(wǎng)膜病變的糖尿病病人(diabetic patients without retinopathy, NDR)而言，增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變病人的尿蛋白有更大的研究?jī)r(jià)值，這一發(fā)現(xiàn)也通過ELISA得到進(jìn)一步驗(yàn)證。最后，本課題組進(jìn)行了一項(xiàng)隊(duì)列研究[3]來(lái)驗(yàn)證這種蛋白與病人腎功能降低的相關(guān)性。病人均來(lái)自于為期5.3年的糖尿病隊(duì)列研究。本研究結(jié)果表明在尿蛋白質(zhì)組學(xué)發(fā)現(xiàn)的眼損傷特異性的蛋白尿觸珠蛋白是一個(gè)預(yù)測(cè)2型糖尿病病人腎功能損害公認(rèn)的臨床生物標(biāo)志物。

持續(xù)性蛋白尿MAU 20～200 μg/μL可以在T1DM腎病早期階段被檢測(cè)到，同時(shí)也是T2DM腎病發(fā)展的一個(gè)標(biāo)志。然而，并不是所有伴有腎臟疾病或腎小球?yàn)V過率降低的糖尿病病人都有蛋白尿[13]。許多研究[14-16]表明近10%的病例在被監(jiān)測(cè)到MAU前就已有腎功能的損傷，提示病人腎功能降低要早于MAU的出現(xiàn)。如前所述，MAU作為預(yù)測(cè)DKD的指標(biāo)可能并不敏感及特異。MAU作為DKD風(fēng)險(xiǎn)預(yù)測(cè)指標(biāo)陽(yáng)性率為43%，而陰性率為77%。所以臨床應(yīng)用需要更理想的預(yù)測(cè)DKD風(fēng)險(xiǎn)的其他指標(biāo)[17]。

已有研究[18]顯示，糖尿病腎病和糖尿病視網(wǎng)膜病變這兩種合并癥之間會(huì)有相互促進(jìn)作用，即已有的一種糖尿病合并癥(視網(wǎng)膜病變或糖尿病腎病)可能會(huì)導(dǎo)致另一種合并癥的發(fā)展。視網(wǎng)膜血管的幾何形狀可以獨(dú)立預(yù)測(cè)腎功能障礙的發(fā)生，也是判斷T1DM早期腎臟損害高風(fēng)險(xiǎn)的一個(gè)有用工具[19]。El-Asrar等[20]研究了DKD的患病率并發(fā)現(xiàn)其與DR嚴(yán)重程度之間的關(guān)系。他們的結(jié)果表明在T1DM中患有DR的病人發(fā)生DKD的風(fēng)險(xiǎn)是那些NDR病人的13.39倍。然而，并沒有研究顯示T2DM病人的腎臟疾病與視網(wǎng)膜病變之間的關(guān)系。本課題組通過對(duì)PDR病人的尿標(biāo)本進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)分析從而挑選出針對(duì)PDR特異性蛋白，并以此來(lái)預(yù)測(cè)T2DM病人腎功能的降低[3]。在這項(xiàng)為期5.3年的對(duì)T2DM病人進(jìn)行的前瞻性隊(duì)列研究中，發(fā)現(xiàn)基線尿觸珠蛋白≥20 ng/min的病人，有較高的CRI發(fā)生率(hazard ratio=3.27,95%CI：1.41～7.58，P=0.006)，觸珠蛋白和微量白蛋白尿都低的病人CRI的發(fā)生率僅為3.2%，有微量白蛋白尿的病人CRI的發(fā)生率是9.5%，而觸珠蛋白增高的病人CRI的發(fā)生率是13.3%，CRI發(fā)生率最高的是微量白蛋白尿和觸珠蛋白均高(22.4%)的病人(P<0.001)。因此，尿觸珠蛋白可作為尿微量白蛋白的補(bǔ)充，來(lái)預(yù)測(cè)T2DM病人的腎損害。

本課題組已經(jīng)用各種蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)對(duì)血液、尿液等體液進(jìn)行分析，然而，檢測(cè)低濃度蛋白和有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的蛋白仍然為蛋白質(zhì)組學(xué)分析的瓶頸。以往大多數(shù)研究[6,21-22]使用二維凝膠電泳和毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)方法闡明T1DM及其合并癥的機(jī)制。本課題組采用自動(dòng)化的二維納米LC-ESI-MS/MS方法用于探索潛在的預(yù)測(cè)PDR的生物學(xué)標(biāo)志物，通過鳥槍法蛋白質(zhì)組學(xué)分析首次發(fā)現(xiàn)在T2DM病人尿液標(biāo)本中存在大量預(yù)測(cè)PDR的相關(guān)蛋白。

此外，臨床和生物化學(xué)檢測(cè)方面對(duì)尿觸珠蛋白的檢測(cè)沒有做過系統(tǒng)的研究。本課題組的研究[23]顯示，相對(duì)于血清中3～30 μmol/L的觸珠蛋白濃度，尿液中觸珠蛋白的濃度較低，然而目前觸珠蛋白檢測(cè)所用試劑主要針對(duì)血液中的檢測(cè)，對(duì)尿液中相對(duì)低濃度的觸珠蛋白檢測(cè)效果不是很好，能否提高對(duì)尿觸珠蛋白的檢測(cè)靈敏度，也是本項(xiàng)目的一個(gè)關(guān)注點(diǎn)。

2 觸珠蛋白與糖尿病腎病

氧化應(yīng)激在糖尿病微血管合并癥(包括糖尿病腎病和視網(wǎng)膜病變)的發(fā)生發(fā)展中起重要作用。觸珠蛋白和α-2-巨球蛋白，這兩種緊密相關(guān)的蛋白在PDR病人中都是升高的。對(duì)于大多數(shù)脊椎動(dòng)物和哺乳動(dòng)物來(lái)說(shuō)觸珠蛋白是血漿中最主要的血紅蛋白結(jié)合蛋白。觸珠蛋白與血紅蛋白結(jié)合物從循環(huán)系統(tǒng)中的清除使機(jī)體免受于亞鐵血紅素驅(qū)動(dòng)的氧化應(yīng)激的發(fā)生[24]。觸珠蛋白基因多態(tài)性導(dǎo)致許多炎性反應(yīng)性疾病的發(fā)生，包括血脂異常[25]、T2DM[26]、動(dòng)脈粥樣硬化[27]和自身免疫性疾病[28]。這些效應(yīng)可能是氧化應(yīng)激的表型依賴性調(diào)制的結(jié)果[29]。觸珠蛋白是腎移植術(shù)后急性排斥反應(yīng)的早期診斷的一種可靠的生物標(biāo)志物，研究[30]顯示通過質(zhì)譜鑒定的腎透明細(xì)胞癌病人的尿觸珠蛋白分泌增加。最近，Bhensdadia等[31]對(duì)尿蛋白正常的T2DM病人進(jìn)行研究以發(fā)現(xiàn)可以識(shí)別腎功能損傷的候選標(biāo)志物，發(fā)現(xiàn)觸珠蛋白是最好的預(yù)測(cè)早期腎功能降低的標(biāo)志物，其提供的抗氧化保護(hù)作用屬于基因依賴型。研究[32]表明，攜帶觸珠蛋白基因觸珠蛋白2-2的糖尿病病人更容易罹患腎病、視網(wǎng)膜病變和心血管疾病。

觸珠蛋白的主要功能是與游離血紅蛋白結(jié)合成穩(wěn)定的復(fù)合物，然后被單核-巨噬細(xì)胞系統(tǒng)清除。糖尿病病人血糖高時(shí)氧化應(yīng)激增加促進(jìn)內(nèi)皮功能障礙和溶血，影響病人腎臟微血管循環(huán)，導(dǎo)致腎臟微血管循環(huán)障礙發(fā)生，腎臟功能改變，游離血紅蛋白濾過增加，而觸珠蛋白作為急性期反應(yīng)蛋白，病人腎臟功能的改變及其對(duì)游離血紅蛋白濾過增加可刺激觸珠蛋白的合成和分泌，血液中觸珠蛋白急劇升高。觸珠蛋白與游離血紅蛋白結(jié)合，從而阻止游離血紅蛋白從腎小球?yàn)V過對(duì)腎小管造成損害，并避免游離血紅蛋白對(duì)腎臟組織的損害作用，從而達(dá)到保護(hù)腎小球功能和腎臟組織的作用。由于糖尿病病人腎小球?yàn)V過屏障不穩(wěn)定，允許像觸珠蛋白-血紅蛋白這樣的復(fù)合物通過其屏障[33]，并且在腎小球?yàn)V過過程中近端小管cubulin和megalin兩種受體會(huì)與血紅蛋白結(jié)合在一起，可能是介導(dǎo)近端小管對(duì)血紅蛋白的攝取[34]。

3 討論與展望

在腎臟疾病發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中，病人體內(nèi)補(bǔ)體系統(tǒng)被激活，從而導(dǎo)致廣泛炎性反應(yīng)以及腎臟纖維化[35-36]。有研究[3]表明補(bǔ)體系統(tǒng)的局部激活介導(dǎo)糖尿病腎病的腎臟損傷。在腎小管中通過持續(xù)抑制補(bǔ)體調(diào)節(jié)因子引起的補(bǔ)體C3的反應(yīng)導(dǎo)致了腎臟廣泛補(bǔ)體系統(tǒng)的激活，同時(shí)也導(dǎo)致了腎臟炎性反應(yīng)、功能受損及纖維化[37]。在對(duì)補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)進(jìn)行深入分析后的結(jié)果顯示，C3補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)可能與PDR和DKD相關(guān)。

當(dāng)然，本研究也存在潛在的局限性。首先，在病例組與對(duì)照組的比較中，本課題組只確定了前兩種尿蛋白(觸珠蛋白和a-巨球蛋白)具有最大的差異。并且在病例組和對(duì)照組病人尿液標(biāo)本中都存在這兩種蛋白。事實(shí)上，在PDR病例組病人尿液標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)了50種蛋白，這些蛋白質(zhì)中有一半帶有免疫反應(yīng)功能。在此次隊(duì)列研究中只選擇了觸珠蛋白來(lái)預(yù)測(cè)腎功能的降低。究其原因，主要是因?yàn)闆]有合適的商業(yè)試劑盒來(lái)檢測(cè)尿液樣本中的這些蛋白質(zhì)。其次，前瞻性隊(duì)列研究只在一所學(xué)術(shù)醫(yī)院進(jìn)行，未來(lái)應(yīng)進(jìn)行大規(guī)模多中心前瞻性隊(duì)列研究。然而，在對(duì)210例病人長(zhǎng)達(dá)5.3年的隨訪研究中，筆者發(fā)現(xiàn)對(duì)于T2DM病人，尿觸珠蛋白是一個(gè)敏感有效地用于預(yù)測(cè)腎功能損害的生物標(biāo)志物。第三，珠蛋白基因、eGFR、糖化血紅蛋白、血壓、腎素-血管緊張素系統(tǒng)(renin-angiotensin system RAS)等多種因素均可能對(duì)阻斷治療產(chǎn)生差異，雖然本課題組的研究已經(jīng)調(diào)整尿白蛋白、性別、年齡、體質(zhì)量指數(shù) (body mass index BMI)、收縮壓、eGFR在同一基線水平，但是糖化血紅蛋白、糖尿病病程和尿觸珠蛋白是CRI的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。

結(jié)合珠蛋白作為急性期應(yīng)激蛋白具有多種功能，它與各系統(tǒng)疾病的相關(guān)性都在火熱研究中，具體的作用機(jī)制尚不十分清楚。目前僅在美國(guó)退伍軍人事務(wù)部糖尿病試驗(yàn)研究[38]中發(fā)現(xiàn)了尿結(jié)合珠蛋白/肌酐(urine haptoglobin/creatinine ratio, UHCR)對(duì)糖尿病病人早期腎功能下降的預(yù)測(cè)價(jià)值，而我國(guó)尚無(wú)UHCR與糖尿病腎病的相關(guān)研究。美國(guó)和新加坡的兩個(gè)課題組近期的研究[38-39]也表明，尿觸珠蛋白或UHCR可能是預(yù)測(cè)2型糖尿病病人腎病風(fēng)險(xiǎn)的有效方法。然而值得關(guān)注的是，糖尿病腎病的嚴(yán)重程度與尿觸珠蛋白濃度之間是否存在一定的相關(guān)性，是否可作為DKD病變程度的預(yù)測(cè)與定量評(píng)價(jià)指標(biāo)？目前還未見相關(guān)研究報(bào)道。因此，這將是本課題組接下來(lái)所要研究攻克的難題。

目前,國(guó)內(nèi)外關(guān)于2 型糖尿病病人血清或尿中觸珠蛋白濃度的研究報(bào)道甚少，同時(shí)在觸珠蛋白基因型與糖尿病腎病相關(guān)性方面的研究也存在矛盾，有研究[40-41]表明，HP1-1型糖尿病腎病患病率和終末期腎臟疾病的進(jìn)展相比，HP2-1型和HP2-2型都顯著降低和減慢。同時(shí)這一結(jié)果被3個(gè)獨(dú)立的研究團(tuán)隊(duì)證實(shí)[42-44]。然而，美國(guó)和日本的兩項(xiàng)單獨(dú)的針對(duì)2型糖尿病人的研究，并沒有檢測(cè)到HP基因型和糖尿病腎病的相關(guān)性(分別為P=0.77和0.43)[45-46]。目前尚無(wú)國(guó)內(nèi)人群HP基因多態(tài)性與糖尿病腎病相關(guān)性的分析。此外值得一提的是，既然HP基因多態(tài)性與糖尿病腎病可能存在相關(guān)性，那么HP基因多態(tài)性是否跟糖尿病腎病預(yù)測(cè)標(biāo)志物——尿觸珠蛋白也存在一定的相關(guān)性？HP基因多態(tài)性是否影響糖尿病腎病病人血液及尿液中觸珠蛋白的分布情況？目前還未見上述相關(guān)報(bào)道，這也是本項(xiàng)目的另一個(gè)重要關(guān)注點(diǎn)。

綜上所述，本研究為關(guān)于尿觸珠蛋白是如何被用來(lái)作為生物標(biāo)志物預(yù)測(cè)PDR以及DKD的研究已提供了初步的數(shù)據(jù)。尿白蛋白和尿觸珠蛋白對(duì)于腎損傷的預(yù)測(cè)價(jià)值已被發(fā)現(xiàn)，因此，對(duì)于T2DM病人來(lái)說(shuō)，尿觸珠蛋白對(duì)預(yù)測(cè)PDR是特異的，并且可以作為一種新型的生物標(biāo)志物，同時(shí)也是尿白蛋白預(yù)測(cè)腎損害的一個(gè)重要補(bǔ)充。如果在后續(xù)進(jìn)一步多中心大樣本的研究中證實(shí)其真實(shí)的預(yù)測(cè)功能，提高糖尿病腎病早期診斷率，將有利于早期干預(yù)以防止或延緩糖尿病腎病的發(fā)生及發(fā)展。

[1] Gao L, Xin Z, Yuan M X, et al. High prevalence of diabetic retinopathy in diabetic patients concomitant with metabolic syndrome[J]. PLoS One, 2016, 11(1):e0145293.

[2] Yuan M X, Peng Z H, Xin Z, et al. Low prevalence of diabetic retinopathy in a Chinese population[J]. Diabetes care,2012, 35(8): e61.

[3] Yang J K, Wang Y Y, Liu C, et al. Urine proteome specific for eye damage canpredict kidney damage in patients with type 2 diabetes: a case-control and a5.3-year prospective cohort study[J]. Diabetes care,2017, 40(2): 253-260.

[4] Espinel E, Agraz I, Ibernon M, et al. Renal biopsy in type 2 diabetic patients[J]. J Clinical Med,2015, 4(5): 998-1009.

[5] Macisaac R J, Ekinci E I, Jerums G. Markers of and risk factors for the development and progression of diabetic kidney disease[J]. Am J Kidney Dis,2014,63(2 Suppl 2): S39-S62.

[6] Coon J J, Zurbig P, Dakna M, et al. CE-MS analysis of the human urinary proteome for biomarker discovery and disease diagnostics[J]. Proteomics Clin Appl,2008, 2(7-8): 964.

[7] Perkins B A, Ficociello L H, Silva K H, et al. Regression of microalbuminuria in type 1 diabetes[J]. N Engl J Med,2003, 348(23): 2285-2293.

[8] Caramori M L, Fioretto P, Mauer M. The need for early predictors of diabetic nephropathy risk: is albumin excretion rate sufficient?[J]. Diabetes,2000, 49(9): 1399-1408.

[9] Perkins B A, Ficociello L H, Roshan B, et al . In patients with type 1 diabetes and new-onset microalbuminuria the development of advanced chronic kidney disease may not require progression to proteinuria[J]. Kidney Int,2010, 77(1): 57-64.

[10]Parving H H, Gall M A, Skott P, et al. Prevalence and causes of albuminuria in non-insulin-dependent diabetic patients[J]. Kidney Int,1992, 41(4): 758-762.

[11]Romero P, Salvat M, Fernandez J, et al . Renal and retinal microangiopathy after 15 years of follow-up study in a sample of Type 1 diabetes mellitus patients[J]. J Diabetes Complications,2007,21(2): 93-100.

[12]Chen Y W, Wang Y Y, Zhao D, et al. High prevalence of lower extremity peripheral artery disease in type 2 diabetes patients with proliferative diabetic retinopathy[J]. PLoS One, 2015, 10(3): e0122022.

[13]American Diabetes Association. Microvascular complications and foot care[J]. Diabetes Care,2016, 39 Suppl 1: S72-S80.

[14]Dahlquist G, Stattin E L, Rudberg S. Urinary albumin excretion rate and glomerular filtration rate in the prediction of diabetic nephropathy; a long-term follow-up study of childhood onset type-1 diabetic patients[J]. Nephrol Dial Transplant, 2001, 16(7): 1382-1386.

[15]Amin R, Turner C, van Aken S, et al. The relationship between microalbuminuria and glomerular filtration rate in young type 1 diabetic subjects: The oxford regional prospective study[J]. Kidney Int,2005, 68(4): 1740-1749.

[16]Costacou T, Ellis D, Fried L, et al. Sequence of progression of albuminuria and decreased GFR in persons with type 1 diabetes: a cohort study[J]. Am J Kidney Dis,2007, 50(5): 721-732.

[17]Tabaei B P, Al-Kassab A S, Ilag L L, et al. Does microalbuminuria predict diabetic nephropathy?[J] . Diabetes Care,2001, 24(9): 1560-1566.

[18]He F, Xia X, Wu X F, et al. Diabetic retinopathy in predicting diabetic nephropathy in patients with type 2 diabetes and renal disease: a meta-analysis[J]. Diabetologia,2013, 56(3): 457-466.

[19]Benitez-Aguirre P Z, Sasongko M B, Craig M E, et al. Retinal vascular geometry predicts incident renal dysfunction in young people with type 1 diabetes[J]. Diabetes Care,2012,35(3):599-604.

[20]El-Asrar A M, Al-Rubeaan K A, Al-Amro S A, et al. Retinopathy as a predictor of other diabetic complications[J]. Int Ophthalmol,2001, 24(1): 1-11.

[21]Snell-Bergeon J K, Maahs D M, Ogden L G, et al. Evaluation of urinary biomarkers for coronary artery disease, diabetes, and diabetic kidney disease[J]. Diabetes Technol Ther,2009,11(1): 1-9.

[22]Mischak H, Delles C, Klein J, et al. Urinary proteomics based on capillary electrophoresis-coupled mass spectrometry in kidney disease: discovery and validation of biomarkers, and clinical application[J]. Adv Chronic Kidney Dis,2010,17(6): 493-506.

[23]Nakhoul F M, Miller-Lotan R, Awaad H, et al. Hypothesis—haptoglobin genotypeand diabetic nephropathy[J].Nat Clin Pract Nephrol,2007,3(6): 339-344.

[24]Wicher K B, Fries E. Haptoglobin, a hemoglobin-binding plasma protein, is present in bony fish and mammals but not in frog and chicken[J]. Proc Nat Acad Sci USA,2006, 103(11): 4168-4173.

[25]Hollox E J, Wain L V. Recurrent mutation at the classical haptoglobin structural polymorphism[J]. Nat Genet,2016, 48(4): 347-348.

[26]Amiri A A, Hashemi-Soteh M B, Haghshenas M R, et al. Haptoglobin polymorphism in individuals with type 2 diabetic microangiopathy[J]. N Am J Med Sci,2013, 5(9): 529-535.

[27]Ragab S M, Safan M A, Badr E A, et al. Haptoglobin genotypes polymorphism as a risk factor for subclinical atherosclerosis in beta-thalassemia major children; a single center Egyptian study[J]. Hematology,2014,[Epub ahead of print].

[28]Mao L, Dong H, Yang P, et al. MALDI-TOF/TOF-MS reveals elevated serum haptoglobin and amyloid A in Behcet’s disease[J]. J Proteome Res,2008, 7(10): 4500-4507.

[29]Asleh R, Ward J, Levy N S, et al. Haptoglobin genotype-dependent differences in macrophage lysosomal oxidative injury[J]. J Biol Chem, 2014, 289(23): 16313-16325.

[30]Sandim V, Pereira Dde A, Kalume D E, et al. Proteomic analysis reveals differentially secreted proteins in the urine from patients with clear cell renal cell carcinoma[J]. Urol Oncol,2016, 34(1): 5.

[31]Bhensdadia N M, Hunt K J, Lopes-Virella M F, et al. Urine haptoglobin levels predict early renal functional decline in patients with type 2 diabetes[J]. Kidney Int,2013,83(6): 1136-1143.

[32]Nakhoul F M, Miller-Lotan R, Awaad H, et al. Hypothesis--haptoglobin genotype and diabetic nephropathy[J]. Nat Clin Pract Nephrol, 2007, 3(6): 339-344.

[33]Asleh R, Nakhoul F M, Miller-Lotan R, et al. Poor lysosomal membrane integrity in proximal tubule cells of haptoglobin 2-2 genotype mice with diabetes mellitus[J]. Free Radic Biol Med, 2012, 53(4): 779-786.

[34]Gburek J, Verroust P J, Willnow T E, et al. Megalin and cubilin are endocytic receptors involved in renal clearance of hemoglobin[J]. J Am Soc Nephrol, 2002, 13(2): 423-430.

[35]Fearn A, Sheerin N S. Complement activation in progressive renal disease[J]. World J Nephrol, 2015, 4(1): 31-40.

[36]張東亮.基于抗組織纖維化的慢性腎臟病治療新進(jìn)展[J].首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015，36(3):333-337.

[37]Kelly K J, Liu Y, Zhang J, et al. Renal C3 complement component: feed forward to diabetic kidney disease[J]. Am J Nephrol,2015, 41(1): 48-56.

[38]Bhensdadia N M, Hunt K J, Lopes-Virella M F, et al. Urine haptoglobin levels predict early renal functional decline in patients with type 2 diabetes [J]. Kidney Int,2013, 83(6): 1136-1143.

[39]Liu J J, Liu S, Wong M D, et al. Urinary haptoglobin predicts rapid renal function decline in asians with type 2 diabetes and early kidney disease[J]. J Clin Endocrinol Metab,2016, 101(10): 3794-3802.

[40]Levy A P, Roguin A, Hochberg I, et al. Haptoglobin phenotype and vascularcomplications in patients with diabetes[J]. N Engl J Med,2000, 343(13): 969-970.

[41]Nakhoul F M, Zoabi R, Kanter Y, et al. Haptoglobin phenotype and diabeticnephropathy[J]. Diabetologia,2001, 44(5): 602-604.

[42]Awadallah S, Hamad M. A study of haptoglobin phenotypes in patients withchronic renal failure[J]. Ann Clin Biochem,2003, 40(Pt 6): 680-683.

[43]Bessa S S, Hamdy S M, Ali E M. Haptoglobin gene polymorphism in type 2diabetic patients with and without nephropathy: an egyptian study[J]. Eur J Intern Med,2007, 18(6): 489-495.

[44]Conway B R, Savage D A, Brady H R, et al. Association between haptoglobin genevariants and diabetic nephropathy: haptoglobin polymorphism in nephropathysusceptibility[J]. Nephron Exp Nephrol,2007, 105(3): e75-e79.

[45]Costacou T, Ferrell R E, Ellis D, et al. Haptoglobin genotype and renal functiondecline in type 1 diabetes[J]. Diabetes，2009， 58(12): 2904-2909.

[46]Koda Y, Soejima M, Yamagishi S, et al. Haptoglobin genotype and diabeticmicroangiopathies in Japanese diabetic patients[J]. Diabetologia，2002， 45(7):1039-1040.

編輯 孫超淵

Progresses in studies on novel biomarkers for early diagnosis of diabetic nephropathy

Song Lini, Liu Jingyi, Zhang Yichen, Cao Xi, Yuan Mingxia, Yang Jinkui*

(DepartmentofEndocrinology,BeijingTongrenHospital,CapitalMedicalUniversity,BeijingKeyLaboratoryofDiabetesResearchandCare,Beijing100730,China)

Diabetic kidney disease (DKD) as a common and severe chronic complication of type 2 diabetes mellitus (T2DM) has rapidly become an important public health problem. It can be reversed in early stage after treatment, or become end-stage renal disease in advanced stage. Therefore, early diagnosis and prediction of DKD for clinical treatment is particularly important. Although microalbuminuria (MAU) is an early marker for kidney damage in type 2 diabetes mellitus, its predictive value is now questioned. In recent years, it was found that proteomics may become a new tool in the diagnosis of diabetic nephropathy. Haptoglobin (HP) as an acute phase protein with a variety of functions was found may be closely related to the occurrence and development of diabetic nephropathy. Therefore, this article reviewed the progress on research of haptoglobin with the pathogenesis of diabetic nephropathy.

diabetic nephropathy; microalbuminuria; haptoglobin

國(guó)家自然科學(xué)基金(81561128015, 81471014, 81400824, 81270918)，北京市自然科學(xué)基金(7131005)，北京市科技計(jì)劃項(xiàng)目(D12110000412001)。This study was supported by National Natural Science Foundation of China (81561128015, 81471014, 81400824, 81270918), Natural Science Foundation of Beijing (7131005),Beijing Municipal Science and Technology Project (D12110000412001).

時(shí)間：2017-04-13 20∶03

http://kns.cnki.net/kcms/detail/11.3662.R.20170413.2003.048.html

10.3969/j.issn.1006-7795.2017.02.001]

R58

2017-01-20)

*Corresponding author， E-mail： jinkui.yang@gmail.com