鄔溪芮 張珍珍/秦皇島市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心
喹乙醇的危害及其檢測方法
鄔溪芮 張珍珍/秦皇島市農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全監(jiān)督檢驗中心
2017年3月15日,央視“3·15”晚會曝光了另一種“瘦肉精”卷土重來,個別飼料生產(chǎn)企業(yè)在混合型飼料添加劑“造肉1號”、“ 味霸”、“ 速肥肽”中添加了喹乙醇,部分養(yǎng)殖戶也在飼料中直接非法添加喹乙醇。其實,在2009年中央電視臺《每周質(zhì)量報告》曾報道過鯉魚飼料因含有違禁藥物“喹乙醇”,造成當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖鯉魚大量死亡的事件。而這些動物體內(nèi)的獸藥殘留,直接關(guān)系到我們?nèi)祟惖慕】?,一時間引起了全社會的高度關(guān)注。為了使人們對喹乙醇及其危害有更深的認(rèn)識,現(xiàn)將喹乙醇的理化性質(zhì)、危害及其檢測方法綜述如下。
喹乙醇(olaquindox)又稱喹酰胺醇,商品名為倍育諾、快育靈,為淺黃色結(jié)晶性粉末,無臭,味苦,溶于熱水,微溶于冷水,在乙醇中幾乎不溶,化學(xué)名為2-[N-2-羥基-乙基]-氨基甲酰-3-甲基-喹惡啉-1,4-二氧化物。它是化學(xué)合成的喹惡啉類廣譜抗菌藥物,對革蘭氏陽性菌和陰性菌均有抑制作用,對大腸桿菌、沙門氏菌、志賀氏菌、變形桿菌屬等特別敏感,對金黃色葡萄球菌、肺炎雙球菌、綠膿桿菌、痢疾密螺旋體等也有抑制作用,喹乙醇與四環(huán)素、氯霉素、氨芐青霉素沒有交叉耐藥性,而對上述抗生素產(chǎn)生抵抗力的細(xì)菌也有效。此外,喹乙醇能促進(jìn)蛋白同化作用,增加機(jī)體蛋白質(zhì)合成,使更多的氮儲存于體內(nèi)呈現(xiàn)促生長和多產(chǎn)瘦肉的作用。主要用作促生長及催肥的飼料添加劑,也可用于治療腸道炎癥、赤痢、巴氏桿菌病等。
喹乙醇是1965年由德國Bayer公司以鄰硝基苯胺為原料合成的一種抗菌促生長劑,1976年歐共體批準(zhǔn)用于畜禽飼料添加劑,20世紀(jì)80年代初,喹乙醇作為飼料添加劑在我國開始推廣使用。近年來在水產(chǎn)飼料中,喹乙醇曾一度被稱為“水產(chǎn)瘦肉精”。有研究發(fā)現(xiàn),大劑量喹乙醇對動物可產(chǎn)生毒性作用,且喹乙醇在體內(nèi)具有蓄積性,在動物體內(nèi)蓄積到一定程度時會對動物和人產(chǎn)生致畸、致癌、致突變的“三致”作用。但該藥物毒性隨動物種屬不同存在較大差異,特別對禽和魚類有中度至明顯蓄積毒性和一定遺傳毒性。因此,歐盟從1999年開始全面禁止使用喹乙醇。我國農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)的喹乙醇獸藥國家標(biāo)準(zhǔn)(《中華人民共和國獸藥典》)和2001年發(fā)布的《飼料藥物添加劑使用規(guī)范》中明確規(guī)定,喹乙醇作為抗菌促生長劑,僅限用于35公斤以下豬的促生長,以及防治仔豬黃痢、白痢,豬沙門氏菌感染,休藥期35日;禁用于體重超過35公斤以上的豬和禽、魚等其他種類動物。
(一)膠體金免疫層析法
膠體金免疫層析技術(shù)是近年發(fā)展起來的一種免疫學(xué)快速檢測方法,將已制備純化過的喹乙醇多克隆抗體與膠體金結(jié)合產(chǎn)生的金標(biāo)抗體噴涂在玻璃纖維墊上,并將包被抗原和二抗分別結(jié)合在硝酸纖維素膜上,組裝成免疫層析快速檢測試紙條,將制備的試紙條用于檢測樣品。該方法操作簡單,檢測時間短,攜帶方便,用于快速檢測和現(xiàn)場篩查,更容易在基層推廣。
(二)酶聯(lián)免疫吸附檢測法
酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)是酶聯(lián)免疫技術(shù)中最常用的一種,據(jù)抗原抗體特異性反應(yīng)及酶聯(lián)反應(yīng)放大作用原理,建立喹乙醇藥物殘留ELISA檢測方法,適用于喹乙醇的快速檢測和批量篩查。該方法可滿足簡便、快速、靈敏、低成本、大批量的檢測需求,適用于定性及超微量定量分析。
(三)高效液相色譜法
高效液相色譜法測定準(zhǔn)確、重復(fù)性好,適用于喹乙醇?xì)埩舻亩繖z測。樣品中的喹乙醇經(jīng)適當(dāng)溶劑提取、過濾后,用反相色譜柱分離測定,在固定波長處紫外檢測器檢測,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,喹乙醇含量與吸光度值在一定濃度范圍內(nèi)成正比,試樣與工作曲線比較定量。
(四)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)
液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)又叫液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(HLPC-MS),以液相色譜作為分離系統(tǒng),質(zhì)譜為檢測系統(tǒng)。樣品在質(zhì)譜部分和流動相分離,被離子化后,經(jīng)質(zhì)譜的質(zhì)量分析器將離子碎片按質(zhì)量數(shù)分開,經(jīng)檢測器得到質(zhì)譜圖。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)將色譜的高分離性能和質(zhì)譜的高選擇性、高靈敏度、極強(qiáng)的專屬性特點(diǎn)結(jié)合起來,已廣泛地應(yīng)用于喹乙醇的檢測中,作為喹乙醇最可靠的確證方法。
(五)熒光微球免疫層析法
2016年裴星瑤等人報道了熒光微球免疫層析法,該方法是將新型標(biāo)記物熒光微球與喹乙醇單克隆抗體偶聯(lián),以該復(fù)合物為檢測試劑制備熒光微球免疫層析試紙條,在肉眼檢測的同時,將該裝置與熒光微球定量側(cè)向?qū)游鲎x數(shù)儀聯(lián)合使用,可進(jìn)行全價雞飼料中喹乙醇含量的定量快速檢測。該試紙條特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性高,保存期長,定量檢測只需18 min左右,肉眼檢測需38 min左右,與相同抗原和抗體制備的膠體金試紙條相比,該方法可大大提高靈敏度。
此外,還有紫外分光光度法、近紅外光譜分析法及電化學(xué)分析法(電位分析法、電導(dǎo)法、極譜分析法、電位滴定法)等。