李相釗/齊魯動物保健品有限公司

如何保障疫苗質量與免疫效果

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一、豬疫苗的種類

包括活疫苗、滅活疫苗、基因工程疫苗；目前以常規(guī)的全病毒疫苗為主，但基因工程疫苗是各大生物制品企業(yè)研究的熱點，目前已經(jīng)上市的基因工程豬疫苗有：VLPs(病毒樣顆粒)基因工程亞單位疫苗、合成肽疫苗；其中VLPs(病毒樣顆粒)基因工程亞單位疫苗又分為原核表達系統(tǒng)疫苗（大腸桿菌表達系統(tǒng)）和真核表達系統(tǒng)疫苗（昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)），這種疫苗目前上市的產(chǎn)品主要在豬圓環(huán)疫苗這個產(chǎn)品上，主要因為豬圓環(huán)病毒的全基因組比較小，僅在l 768 bp與l 767 bp左右，對于全基因組功能認識更為透徹。合成肽疫苗主要在口蹄疫這個產(chǎn)品上。由于基因組學及基因改造技術的進步，基因工程疫苗更有利于隨人的意愿控制，生產(chǎn)高含量、高安全、多聯(lián)苗、低成本的疫苗更容易成為現(xiàn)實，這就是基因工程疫苗成為研究熱點的重要原因。

二、疫苗成分分析

活疫苗主要包括：半成品（病毒/細菌培養(yǎng)物）、凍干保護劑/耐熱凍干保護劑；滅活疫苗主要包括：半成品（病毒/細菌培養(yǎng)物）、滅活劑、佐劑；基因工程疫苗分為有滅活劑與無滅活劑兩種，其中無滅活劑基因工程疫苗主要包括半成品（基因表達產(chǎn)物/人工合成多肽鏈）、佐劑，而有滅活劑基因工程疫苗主要包括半成品（基因表達產(chǎn)物）、滅活劑、佐劑；無滅活劑基因工程疫苗主要包括合成肽疫苗和原核表達系統(tǒng)疫苗（大腸桿菌），因為合成肽疫苗是按照其基因組人工合成部分多肽鏈，不具有感染性與傳染性，所以不需要滅活；而原核表達系統(tǒng)（大腸桿菌表達系統(tǒng)）由于是利用人為改造過的大腸桿菌，使大腸桿菌不具備感染性，所以也不需要滅活；而采用真核表達系統(tǒng)（昆蟲桿狀病毒表達系統(tǒng)），由于昆蟲桿狀病毒具有潛在感染豬體的風險，所以其表達產(chǎn)物必須采用滅活處理。由于疫苗的生產(chǎn)工藝繁瑣，其疫苗成分也比較復雜，主要有蛋白質、多糖、類脂等成分，當然不同類型的疫苗，其成分也不盡相同；不同廠家，成分也有所區(qū)別。所以保證疫苗品質，需要盡可能提升有效抗原含量，盡可能降低其他輔助成分的含量。

三、切實保障疫苗質量安全措施的探討

(一)生產(chǎn)設備及時更新

生產(chǎn)工藝的全自動化肯定是趨勢，但由于生物制品企業(yè)涉及了各種各樣的生物培養(yǎng)技術，造成了生產(chǎn)工藝的千差萬別，很多流程還停留在半自動化。隨著科學技術的進步，對于生物培養(yǎng)技術的提高，全自動化與人工智能將全力助推疫苗生產(chǎn)工藝的變革。由小規(guī)模化到大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn)方式的轉變，如轉瓶培養(yǎng)細胞技術全面轉變成大規(guī)模罐式細胞培養(yǎng)技術。其在疫苗批間穩(wěn)定性上將大幅提升。

(二)疫苗原輔料質量控制

原輔料質量把控嚴，才可以生產(chǎn)出高品質的成品疫苗。豬疫苗的原輔料主要涉及了兔子、細胞培養(yǎng)基、水、血清、細菌培養(yǎng)、支原體培養(yǎng)基、滅活劑、佐劑、凍干保護劑/凍干耐熱保護劑、疫苗瓶、瓶簽、冰袋、保溫箱、疫苗箱等涉及的種類繁多，使每一種都保持在高品質、高穩(wěn)定性上，其成品才有可能保持高質量。

（三）疫苗企業(yè)的質量控制體系

一是合理的內控標準對于保證產(chǎn)品質量至關重要，通常疫苗企業(yè)的內控標準普遍高于國標，國標僅僅是疫苗上市銷售的最低標準，因為在產(chǎn)品運輸與保存的過程中，疫苗效價會降低，適當提高內控標準，有利于保證終端客戶的使用效果。嚴格把控企業(yè)的內控標準，是企業(yè)對于產(chǎn)品質量保證的態(tài)度，不達標產(chǎn)品堅決不放行。二是疫苗質量保證體系是確保質量標準執(zhí)行的重要舉措，質量是企業(yè)的立足之本，生物制品企業(yè)均需要制定嚴格的質量把控體系，保證放行的產(chǎn)品絕對是高品質的，企業(yè)一般需要有質量控制部（QC）與質量保證部（QA）。質量控制部（QC）嚴格按照企業(yè)內控標準檢驗，決不姑息不合格產(chǎn)品；質量保證部（QA），對整個生產(chǎn)工藝流程、原輔料以及質量控制部結果復核。企業(yè)自檢合格產(chǎn)品上報農業(yè)部復核，產(chǎn)品質量復核過關，方可放行產(chǎn)品上市銷售。

（四）生產(chǎn)工藝的優(yōu)化

目前生物制品企業(yè)均可做到生產(chǎn)工藝的流程化與制度化，但由于生物制品企業(yè)生產(chǎn)工藝正處于小規(guī)模人工半自動化向大規(guī)模標準自動化工藝過渡，而且科學技術也日新月異，新技術的引入、老技術的優(yōu)化升級，生產(chǎn)工藝的提升空間還是非常大，生產(chǎn)工藝的先進性也是保證產(chǎn)品競爭力的重要砝碼，進口產(chǎn)品較國產(chǎn)產(chǎn)品的優(yōu)勢就在于生產(chǎn)工藝，但隨著國際化與全球一體化的加速，現(xiàn)在國產(chǎn)生產(chǎn)工藝技術基本可以做到與世界同步，從臨床使用反饋的角度看進口與國產(chǎn)的差距也越老越不明顯。

1.流行毒株的匹配性、安全性與耐熱性。毒株是疫苗的靈魂，對于疫苗的防控效果至關重要。本質上疫苗就是疾病抗原本身，通過刺激動物體產(chǎn)生對于該抗原的免疫力，從而可以克制野毒抗原入侵的原理。但疾病反克制的手段就是病原變異，通過變異來逃避動物體的免疫保護，近年來，中國主要疾病幾次大流行均和疾病病原變異有關系。2006年高致病性藍耳病、2010年豬流行性腹瀉、2011年豬偽狂犬病、2012年豬丹毒再次流行，無不是變異引起。因此提高疫苗保護效果就是采用流行毒株，與野毒抗原完美匹配，從而保證疫苗效果。但對于商品化疫苗上市的本身，安全性是第一位的，沒有安全性的疫苗，再好效果客戶也是不買賬的，所以從產(chǎn)品的研發(fā)立項到最終產(chǎn)品的上市，農業(yè)部中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所對于疫苗的安全性審核的力度尤為重視，而且企業(yè)每一批產(chǎn)品均需要報批簽發(fā)，安全性是農業(yè)部重要監(jiān)控復核項目。而作為疫苗生產(chǎn)企業(yè)必須重視疫苗安全，一定要擴大試驗動物的數(shù)量，并及時跟蹤臨床應用反饋，優(yōu)化升級，從而保證產(chǎn)品的安全性。同時，生物制品是特殊的商品，對于溫度敏感，由于中國幅員遼闊，從亞寒帶到亞熱帶，氣溫從-40℃至40℃，溫差最高可達80℃，產(chǎn)品流通環(huán)節(jié)溫度極難控制，而常規(guī)滅活疫苗怕凍結、活疫苗怕熱，因此篩選適應性強的流行毒株很重要，尤其是對溫度天然耐熱性的毒株。毒株本身抗逆性強，生產(chǎn)的疫苗在流通環(huán)節(jié)的影響就會小，而且產(chǎn)品的品質就穩(wěn)定。

2.凍干保護劑、滅活劑、佐劑的篩選。凍干保護劑、滅活劑、佐劑是動物疫苗的主要輔助成分，對于疫苗運輸保存、對于免疫的安全性、對于免疫效果均有較大影響。凍干保護劑主要向耐熱型發(fā)展、滅活劑主要向無殘留型發(fā)展、佐劑主要向通針性好、持久的方向發(fā)展。因此篩選好凍干保護劑、滅活劑、佐劑保證產(chǎn)品的品質重要舉措。

3.純化工藝。疫苗是成分復雜的生物制品，有效抗原的培養(yǎng)過程中會產(chǎn)生雜蛋白，包括血清的使用、細胞培養(yǎng)的代謝產(chǎn)物；滅活過程有滅活劑的殘留、滅活劑損傷的抗原；佐劑與耐熱保護劑帶來的雜蛋白與有機物等等，均是影響疫苗副反應甚至是安全性的重要因素。目前，疫苗的純化工藝主要集中在半成品階段的純化，對于雜蛋白與殘留有機物的去除效果明顯。從純化對不同疫苗類型的影響來看，對滅活疫苗安全性效果的提升幫助更明顯，臨床上像豬口蹄疫滅活疫苗、豬圓環(huán)病毒滅活疫苗等，純化之后，其臨床副反應大為減少。

四、冷鏈配送

疫苗產(chǎn)品走向市場，進入終端豬場，一般至少需要生產(chǎn)廠家、代理商、終端豬場3個環(huán)節(jié)。但由于終端豬場的選址一般較偏僻，交通物流不便，中間流通時間較長，而且疫苗本身質量的穩(wěn)定又對溫度敏感。所以解決這個問題的做好辦法就是冷鏈配送，較大規(guī)?？蛻糁苯佑美洳剀嚺渌椭霖i場；小客戶要采用二級配送原則，冷藏車配送至離豬場最近的中間商，再由中間商二次配送至豬場。從而真正解決冷鏈配送的問題。

五、代理商的篩選

目前國家推行獸用生物制品GSP（藥品經(jīng)營質量管理規(guī)范）認證制度，符合國家資質的方可從事動物生物制品經(jīng)營。從疫苗生產(chǎn)企業(yè)的角度，必須篩選具有資質的代理商，因為其具備技術指導、冷鏈配送等水準，對于疫苗產(chǎn)品質量保證有事半功倍的作用。

六、客戶培訓，重視冷鏈與操作規(guī)范。

疫苗因為是特殊商品，無論是中間商還是養(yǎng)豬一線從業(yè)者，需要投入更多的精力對其疫苗知識的掌握的培訓。尤其是一線的養(yǎng)豬從業(yè)人員發(fā)熱培訓必須重視，因為目前行業(yè)內從業(yè)者專業(yè)素質普遍較差，而且年齡偏大，對新興事物學習能力較弱。從臨床跟蹤反饋來看，養(yǎng)豬一線的從業(yè)者在操作規(guī)范上執(zhí)行力也比較差，時不時出現(xiàn)疫苗不回溫、一次大量稀釋疫苗2個小時用不完，一個型號的針頭用到底，打飛針，不健康豬只也打疫苗等現(xiàn)象，操作規(guī)范的標準化也亟需推進。通過培訓的最終目的就是讓客戶深入認識疫苗的特殊性與操作的規(guī)范性，從而保證疫苗免疫的效果。