復(fù)方玄駒膠囊對(duì)弱精癥患者精液質(zhì)量、精子功能形態(tài)及精漿一氧化氮水平的影響

徐洋濤++++++張瑜+++++++許躍軍+++++潘巖

[摘要] 目的 探討復(fù)方玄駒膠囊對(duì)弱精癥男性不育患者精液質(zhì)量、精子功能形態(tài)及精漿一氧化氮（NO）水平的影響。 方法 回顧性分析2015年1月～2016年6月保定市第二中心醫(yī)院收治的80例弱精癥男性不育患者的臨床資料，按照治療方法分為復(fù)方玄駒組和常規(guī)治療組，每組各40例，另選擇30名精子質(zhì)量正常的已婚已育男性作為健康對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比分析。常規(guī)治療組應(yīng)用抗生素、能量劑及激素類(lèi)藥物治療，復(fù)方玄駒組在常規(guī)治療組基礎(chǔ)上給予復(fù)方玄駒膠囊治療。比較治療前后患者精液質(zhì)量變化，同時(shí)比較三組精子頂體完整性及精漿一氧化氮水平。 結(jié)果 治療3個(gè)月后，兩組患者精子密度均較治療前明顯下降（P < 0.05），但組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），兩組患者精子活率及精子活力a級(jí)、a+b級(jí)百分比均較治療前明顯升高，且復(fù)方玄駒組各指標(biāo)明顯高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。治療后，復(fù)方玄駒組患者精子頂體完整率較治療前明顯升高（P < 0.01），而常規(guī)治療組變化不明顯（P > 0.05）；復(fù)方玄駒組患者精子頂體完整率與健康對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），且均明顯高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。治療后，兩組患者精漿NO水平均較治療前明顯降低（P < 0.05或P < 0.01），復(fù)方玄駒組患者精漿NO水平與健康對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P >0.05），且均明顯低于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。 結(jié)論 復(fù)方玄駒膠囊能明顯提高弱精癥男性不育患者精液質(zhì)量及精子頂體完整率，降低精漿NO水平，對(duì)提高弱精癥患者療效具有重要價(jià)值，值得臨床推廣。

[關(guān)鍵詞] 復(fù)方玄駒；弱精癥；頂體；一氧化氮

[中圖分類(lèi)號(hào)] R277.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2017）02（b）-0121-04

[Abstract] Objective To investigate the effect of sperm quality， sperm function form and seminal plasma nitric oxide level of weak sperm disease patients treating with Compound Xuanju Capsules. Methods From January 2015 to June 2016， in the Second Central Hospital of Baoding， the clinical data of 80 weak sperm male infertility patients were retrospective analyzed， they were divided into compound Xuanju group and convention treatment group by treatment method， with 40 cases in each group， and 30 normal sperm quality married with children men were selected as healthy control group. The convention treatment group patients were treated with antibiotic， energy agent and hormone drugs， the compound Xuanju group patients were given Compound Xuanju Capsules on the basis of convention treatment group. The sperm quality changes of patients before and after treatment were compared， and the sperm acrosome integrality and seminal plasma nitric oxide level detection of three groups were compared. Results After 3 months treatment， the sperm density of patients in two groups were significantly decreased than before the treatment （P < 0.05）， but there was no statistical significance between the two groups （P > 0.05）； the live sperm rate and sperm vitality grade a， a+b level percents of patients in two groups were significantly increased than before the treatment， and the indexes of compound Xuanju group were obviously higher than that of convention treatment group， the differences were statistical significance （P < 0.05 or P < 0.01）. After the treatment， the sperm acrosome integrality rate of compound Xuanju group significantly increased than before the treatment （P < 0.01）， and the changes of the conventional treatment were not obvious （P > 0.05）； the sperm acrosome integrality rate had no statistical significance between the compound Xuanju group and healthy control group （P > 0.05）， and these were significantly higher than that in the convention treatment group， the differences were statistical significant （P < 0.05 or P < 0.01）. After the treatment， the seminal plasma NO levels of patients in two groups were significantly lower than those before the treatment （P < 0.05 or P < 0.01）， the seminal plasma NO levels had no statistical significance between compound Xuanju group and healthy control group （P > 0.05）， and these were significantly lower than that in the convention treatment group， the differences were statistical significant （P < 0.05 or P < 0.01）. Conclusion Compound Xuanju Capsules can obviously improve the sperm quality and the sperm acrosome integrality rate of the weak sperm male infertility patients，reduce the seminal plasma NO levels， and it has important value to improve the curative effect for weak sperm disease patients， it is worth of clinical promotion.

[Key words] Compound Xuanju Capsules； Weak sperm disease； Acrosome； Nitric oxide

近年來(lái)，男性不育癥呈逐年上升趨勢(shì)[1]。在男性不育癥中，弱精癥占有很大比例，在不育癥發(fā)病原因中占75.5%[2]。目前，對(duì)弱精癥得治療主要以抗生素、激素和能量類(lèi)藥物等治療為主，但效果不夠理想。保定市第二中心醫(yī)院在常規(guī)治療基礎(chǔ)上采用復(fù)方玄駒膠囊治療弱精癥取得了較好的治療效果，現(xiàn)報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2015年1月～2016年6月在保定市第二中心醫(yī)院治療的80例弱精癥患者的臨床資料，按照治療方法分為復(fù)方玄駒組和常規(guī)治療組，每組各40例。復(fù)方玄駒組：年齡22～36歲，平均（29.3±5.6）歲，婚齡2～9年，平均（4.4±2.1）年，不育時(shí)間2～5年，平均（3.7±1.4）年。常規(guī)治療組：年齡22～34歲，平均（28.7±5.9）歲，婚齡2～8年，平均（4.2±1.9）年，不育時(shí)間2～5年，平均（3.5±1.6）年。兩組患者在年齡、婚齡、不育時(shí)間等一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），具有可比性。選取同期30名精子質(zhì)量正常的已婚已育男性作為健康對(duì)照組，年齡24～35歲，平均（30.2±4.3）歲。

納入標(biāo)準(zhǔn)：①婚后夫妻性生活均正常，同居時(shí)間>2年，且未采取避孕措施；②精液分析結(jié)果符合弱精癥診斷：精子密度>20×106/mL，精子活率<60%，精子活力級(jí)別a≤25%，或a+b≤50%；③女方生殖功能檢查均正常；④治療前1個(gè)月內(nèi)無(wú)改善精子數(shù)目或活力的藥物應(yīng)用史，且近半年未服用過(guò)細(xì)胞毒性藥物、激素、抗癲癇、抗腫瘤等可能影響精子活力藥物者；⑤治療過(guò)程中均遵醫(yī)囑用藥者。

排除標(biāo)準(zhǔn)：①少精或無(wú)精癥以及勃起功能障礙、逆行射精或不射精的患者；②既往患有過(guò)尿道狹窄、腮腺炎病毒感染、生殖系統(tǒng)外傷等病史者；③患有隱睪、生殖系畸形及其他影響生育能力的先天性疾病者；④患有Cushing綜合征、甲亢、垂體瘤、腺垂體功能減退癥等患者；⑤患有嚴(yán)重糖尿病、重度營(yíng)養(yǎng)不良等代謝性疾病以及嚴(yán)重心血管、肝、腎及造血系統(tǒng)原發(fā)性疾病的患者。

1.2 方法

常規(guī)治療組患者常規(guī)給予四環(huán)素類(lèi)抗生素，ATP、輔酶Q10等能量劑，克羅米芬等激素類(lèi)藥物治療。復(fù)方玄駒組患者在常規(guī)用藥基礎(chǔ)上給予復(fù)方玄駒膠囊（施強(qiáng)藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批號(hào)：20141215）3粒/次，3次/d。治療前及治療3個(gè)月后檢測(cè)兩組患者精液質(zhì)量及精漿一氧化氮（NO）水平，并通過(guò)檢測(cè)精子頂體完整率對(duì)精子功能形態(tài)進(jìn)行評(píng)價(jià)。由于精液質(zhì)量有明確參考標(biāo)準(zhǔn)，故僅將精子頂體完整率及精漿NO水平與健康對(duì)照組進(jìn)行對(duì)比分析。

1.2.1 精液質(zhì)量檢測(cè) 每次精液采集于禁欲3～5 d后采用手淫法進(jìn)行，精液質(zhì)量采用計(jì)算機(jī)輔助精液分析（CASA）技術(shù)，項(xiàng)目包括精子密度、精子活率以及精子活力等參數(shù)。

1.2.2 精子頂體完整率檢測(cè) 常規(guī)進(jìn)行瑞氏染液及吉姆薩染液的制備，并置于室溫1周后使用。取液化精液推片，95%乙醇固定10 min，自然干燥，用瑞-吉氏混合液（10∶1）加等量pH=6.9的磷酸鹽緩沖液，染色10 min，自來(lái)水沖洗，在把染片置于95%乙醇2～5 s，脫掉膜上的浮色，待自然干燥后，置于鏡下觀察，分別于3個(gè)視野中計(jì)算頂體完整率并取平均值，頂體完整率=（頂體完整的精子數(shù)/精子總數(shù)）×100%。

1.2.3 精漿NO檢測(cè) 精漿NO水平利用硝酸還原酶特異性及顯色深度進(jìn)行常規(guī)檢測(cè)，3000 r/min離心8 min，離心半徑為8 cm，提取上清盡量多精漿放入1.5 mL Ep管于-20℃冰箱保存，標(biāo)本收集15例或1個(gè)月內(nèi)收集的標(biāo)本（≤15例）解凍后根據(jù)試劑盒說(shuō)明集中對(duì)精漿中NO含量進(jìn)行測(cè)定。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS 18.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，正態(tài)分布的計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，方差齊性時(shí)采用t檢驗(yàn)，方差不齊時(shí)采用t'檢驗(yàn)。以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 復(fù)方玄駒組及常規(guī)治療組治療前后精液質(zhì)量比較

復(fù)方玄駒組及常規(guī)治療組患者治療前精子密度、精子活率及精子活力a級(jí)、a+b級(jí)百分比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）。治療3個(gè)月后，兩組患者精子密度均較治療前明顯下降（P < 0.05），但組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；兩組患者精子活率及精子活力a級(jí)、a+b級(jí)百分比均較治療前明顯升高，且復(fù)方玄駒組各指標(biāo)明顯高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。見(jiàn)表1。

2.2 復(fù)方玄駒組及常規(guī)治療組治療前后精子頂體完整率比較

治療前，復(fù)方玄駒組與常規(guī)治療組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；但均明顯低于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。治療3個(gè)月后，復(fù)方玄駒組患者精子頂體完整率較治療前明顯升高（P < 0.01），而常規(guī)治療組變化不明顯（P > 0.05），復(fù)方玄駒組患者精子頂體完整率與健康對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），且均明顯高于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。見(jiàn)表2。

2.3 復(fù)方玄駒組及常規(guī)治療組治療前后精漿NO水平比較

復(fù)方玄駒組及常規(guī)治療組患者治療前精漿NO水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），且均明顯高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.01）。治療3個(gè)月后，兩組患者精漿NO水平均較治療前明顯降低（P < 0.05或P < 0.01），復(fù)方玄駒組患者精漿NO水平與健康對(duì)照組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），且均明顯低于常規(guī)治療組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05或P < 0.01）。見(jiàn)表2。

3 討論

已有研究指出，精子活力是影響弱精癥男性生育能力最重要的指標(biāo)[3]，只有正常做前向運(yùn)動(dòng)的精子才能順利抵達(dá)輸卵管壺腹部，并與卵子結(jié)合形成受精卵。另外，有研究發(fā)現(xiàn)精子密度過(guò)高也可能會(huì)導(dǎo)致男性不育，高密度精子不育者精子運(yùn)動(dòng)軌跡與正常生育男性有明顯差異，其原因可能與單位體積精子產(chǎn)生過(guò)多會(huì)出現(xiàn)精子先天營(yíng)養(yǎng)不足，而導(dǎo)致精子質(zhì)量及運(yùn)動(dòng)能力降低有關(guān)[4]。隨著對(duì)弱精癥研究的不斷深入，有研究發(fā)現(xiàn)精子功能與精子的正常形態(tài)密切相關(guān)，精子頭部缺陷，如大頭精子、不定行頭畸形精子等運(yùn)動(dòng)速度減慢，不能到達(dá)輸卵管，而無(wú)法與卵子結(jié)合，位于精子頭部頂體的異常導(dǎo)致精子喪失受精能力，而造成不育[5]，提示精子頂體完整率在男性不育中具有重要研究?jī)r(jià)值。另有研究發(fā)現(xiàn)，精子活力的相關(guān)病理變化可能與體內(nèi)或精漿中的氧化應(yīng)激狀態(tài)以及NO水平的平衡密切相關(guān)[6-8]，低濃度NO有利于精子活動(dòng)度的提高，而高濃度則可能會(huì)造成生精功能損害、精子活動(dòng)度受抑制、頂體反應(yīng)率降低等[9-10]。因此，除精子活力外，精子功能形態(tài)及NO水平同樣可作為弱精癥評(píng)價(jià)及療效評(píng)價(jià)的重要參數(shù)。目前對(duì)弱精癥的治療除了一般的抗生素、激素和能量類(lèi)藥物治療外，還有輔助生殖技術(shù)可供選擇，雖然治療效果不斷提高，但仍不夠理想。

中醫(yī)學(xué)中多將弱精癥歸入“精寒”、“精冷”、“不育”范疇[11]。多數(shù)認(rèn)為腎虛是其根本，由于先天腎精不足，精失所養(yǎng)，又腎虛元?dú)獠蛔?，無(wú)力推動(dòng)血脈的循行，局部瘀血阻滯，臟腑經(jīng)絡(luò)氣血不通，致使精子運(yùn)動(dòng)乏力[12]。腎主生殖的實(shí)驗(yàn)研究表明，腎虛存在下丘腦-垂體-性腺軸的功能紊亂，導(dǎo)致對(duì)性腺得刺激減弱而抑制對(duì)性激素釋放，影響睪丸和附睪功能，或通過(guò)損壞微環(huán)境而導(dǎo)致不育[13]。治療原則應(yīng)以補(bǔ)腎生精，活血化瘀，溫陽(yáng)益氣為主[14-15]。復(fù)方玄駒膠囊以玄駒為君藥，淫羊藿為臣藥，蛇床子、枸杞子為佐藥。方中玄駒即擬黑多刺蟻，補(bǔ)益肝腎、活血通絡(luò)[16]，淫羊藿溫補(bǔ)腎陽(yáng)，枸杞子補(bǔ)肝益腎，蛇床子溫腎壯陽(yáng)，諸藥配伍共奏溫腎、壯陽(yáng)、益精、活血之功效[17]?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究認(rèn)為，擬黑多刺蟻富含ATP及多種有利氨基酸及微量元素，有利于提高生精功能及精液質(zhì)量。淫羊藿具有雄激素樣作用，能提高生精功能，促進(jìn)精液分泌[18]。枸杞子富含枸杞多糖和維生素，具有補(bǔ)肝腎、益精氣之功效[19]。蛇床子可顯著提高睪丸、附睪等功能，從而提高精子質(zhì)量。已有大量研究證實(shí)，復(fù)方玄駒膠囊能明顯提高男性弱精癥不育患者（a+b）級(jí)精子比例以及精子活動(dòng)率[20-21]。另外，吳國(guó)琳等[22]的研究結(jié)果顯示，應(yīng)用復(fù)方玄駒膠囊的低劑量組和高劑量組大鼠血清NO水平較模型組明顯降低，且均更接近于正常組水平，提示復(fù)方玄駒膠囊不僅能提高少弱精癥患者精液質(zhì)量，并能促進(jìn)NO水平趨于正常。目前多認(rèn)為應(yīng)取接近于睪丸端的精索靜脈取血對(duì)NO水平進(jìn)行檢測(cè)，但由于操作難度大，創(chuàng)傷大，很難廣泛應(yīng)用于臨床[23-24]。

本研究在觀察復(fù)方玄駒膠囊治療前后精液質(zhì)量變化的同時(shí)，對(duì)體現(xiàn)精子功能形態(tài)的頂體完整性以及精漿NO水平變化進(jìn)行了綜合性分析，結(jié)果顯示，治療3個(gè)月后，復(fù)方玄駒組精子活率及精子活力a級(jí)、a+b級(jí)百分比均較治療前明顯升高，且改善明顯優(yōu)于常規(guī)治療組，與劉永杰等[20]、姜輝等[21]的研究結(jié)果基本一致；而復(fù)方玄駒組患者精子頂體完整率較治療前明顯升高，且明顯高于常規(guī)治療組，而與健康對(duì)照組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05），提示復(fù)方玄駒膠囊能明顯改善精子功能形態(tài)，從而進(jìn)一步提高精子質(zhì)量；另外，復(fù)方玄駒組患者精漿NO水平較治療前明顯降低，且明顯低于常規(guī)治療組，而與健康對(duì)照組并無(wú)顯著性差異（P > 0.05），提示弱精癥患者存在精漿NO水平的明顯升高，而復(fù)方玄駒膠囊能明顯降低精漿NO水平，使其趨于平衡，這也可能是其進(jìn)一步提高弱精癥患者精子活力、精子功能的基礎(chǔ)。

綜上所述，復(fù)方玄駒膠囊能明顯提高弱精癥男性不育患者精液質(zhì)量及精子頂體完整率，降低精漿NO水平，對(duì)提高弱精癥患者療效具有重要價(jià)值，但其具體作用機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究證實(shí)。

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