李孟+李昭霞+李金科+舒嬋媛+孫琪+付鵬清

【摘要】目的：觀察橘絡(luò)對(duì)D-半乳糖誘導(dǎo)亞急性衰老小鼠模型的的抗衰老作用。方法：將昆明種小鼠隨機(jī)分成3組：衰老+生理鹽水組、衰老+低橘絡(luò)劑量組、衰老+高橘絡(luò)劑量組，通過(guò)后頸背部皮下注射D-半乳糖（D-gal）建立衰老模型，以灌胃方式加入橘絡(luò)，連續(xù)處理49天，檢測(cè)血清總抗氧化能力。結(jié)果：橘絡(luò)能明顯提高小鼠的總抗氧化能力。結(jié)論：橘絡(luò)具有能明顯改善D-半乳糖致亞急性衰老小鼠的抗氧化能力。

【關(guān)鍵詞】橘絡(luò)；總抗氧化能力；D-半乳糖；抗衰老

橘絡(luò)又名橘絲、橘筋，為蕓香科植物柑橘Citrus reticulata Blanco中的果皮與內(nèi)果皮之間的維管束群。一般呈粗如線，黃白色。味甘、苦，性平。歸肝、肺、脾經(jīng)。氣微香。主產(chǎn)四川、重慶、福建、浙江；此外，廣西、廣東、江西、湖南、湖北、云南、貴州等地亦產(chǎn)。橘絡(luò)的中醫(yī)藥應(yīng)用最早見(jiàn)于《日華子本草》，后世歷代本草和《中藥大辭典》等現(xiàn)代中醫(yī)藥志書(shū)也均有收載。在中藥材的國(guó)家和地方藥品標(biāo)準(zhǔn)中，《中國(guó)藥典》1963年版收載橘絡(luò)，記其“通經(jīng)絡(luò)，宣滯氣。用于治療經(jīng)絡(luò)氣滯，痰積血癖，傷酒口渴?！薄端拇ㄊ≈兴幉臉?biāo)準(zhǔn)》1987年版也收載了橘絡(luò)，記其：“化痰，通絡(luò)。用于治療痰熱咳嗽，胸脅痛，咯血等病癥。”目前，有關(guān)橘絡(luò)化學(xué)成分研究報(bào)道較少，僅有余作測(cè)定過(guò)橘絡(luò)中橙皮苷的含量，李飛等從橘絡(luò)中分離得到14個(gè)化合物，化合物結(jié)構(gòu)類(lèi)型為黃酮類(lèi)、檸檬苦素類(lèi)、甾體類(lèi)等類(lèi)型。因此，橘絡(luò)是否具有抗氧化甚至延緩衰老的作用，當(dāng)前沒(méi)有相關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道。故本文對(duì)橘絡(luò)的抗氧化能力進(jìn)行了相關(guān)的研究。

一、材料與方法

1、材料

中藥橘絡(luò)購(gòu)自怡軒大藥房。動(dòng)物：昆明種小鼠，體重18～22g，均為雌性小鼠，由長(zhǎng)沙天勤技術(shù)有限公司提供。D-半乳糖試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所。

2、方法

（1）取小鼠21只，隨機(jī)分為3組，每組7只，置于本校生命科學(xué)樓科研中心動(dòng)物房以普通飼料喂養(yǎng)。在室溫為25℃，相對(duì)濕度為50%的條件下飼養(yǎng)，自由進(jìn)食飲水，適應(yīng)性飼養(yǎng)I周后開(kāi)始試驗(yàn)。

（2）橘絡(luò)水煎液的制備

配置橘絡(luò)水煎液，用電子秤分別量取225.0g、25.0g的橘絡(luò)，向煎鍋內(nèi)加入1500ml的蒸餾水，分別煎到1000ml，將其置于適宜的環(huán)境中保存起來(lái)，分別用EP管分裝。

（3）D-半乳糖致亞急性衰老小鼠模型的建立

用生理鹽水配置濃度為500mg/kg的D-半乳糖溶液，三組小鼠按照體重皮下注射D-半乳糖，給藥量為0.01g/ml，連續(xù)注射49天。第25天開(kāi)始分別給予高劑量橘絡(luò)煎液、低劑量橘絡(luò)煎液和生理鹽水的灌胃，小鼠灌胃的劑量為0.02g/mL。

（4）第49天摘除小鼠眼球進(jìn)行取血，離心分離血清，按照試劑盒說(shuō)明測(cè)量血清中T-AOC的含量。

3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用spss10.0軟件分析，數(shù)據(jù)用“”表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，顯著性水平為P<0.05。

二、結(jié)果

從表1可見(jiàn)，橘絡(luò)高、低劑量組均具有增強(qiáng)D-半乳糖致亞急性衰老小鼠的總抗氧化能力的作用。

三、討論

衰老的自由基學(xué)說(shuō)是Denham Harman在1956年提出的，認(rèn)為衰老過(guò)程中的退行性變化是由于細(xì)胞正常代謝過(guò)程中產(chǎn)生的自由基的有害作用造成的。目前，自由基理論在機(jī)體衰老中的作用已受到人們的高度重視。所謂自由基（free radical）又稱(chēng)游離基，就是具有未配對(duì)的原子、原子團(tuán)、分子或離子叫自由基。自由基的化學(xué)性質(zhì)活潑，有極強(qiáng)的氧化反應(yīng)能力，可使各種生物膜的不飽和脂肪酸發(fā)生過(guò)氧化，形成過(guò)氧化脂質(zhì)，這些產(chǎn)物具有一定毒性，能使蛋白質(zhì)分子內(nèi)和分子間發(fā)生交聯(lián)，發(fā)生去氫，加成，裂解等反應(yīng)，從而引起DNA的雙螺旋交聯(lián)出現(xiàn)錯(cuò)誤或無(wú)法分裂，一些酶的活性改變，影響細(xì)胞的代謝。因此機(jī)體防御體系的抗氧化能力的強(qiáng)弱與健康程度存在著密切聯(lián)系，若設(shè)法提高機(jī)體的抗氧化能力將有助于延緩機(jī)體衰老過(guò)程的和老年病的防治。

橘絡(luò)是我國(guó)傳統(tǒng)常用中藥之一，用藥歷史悠久。有理氣，止咳化痰，通絡(luò)的功效。常用于咳嗽咯血，橘絡(luò)有通絡(luò)，理氣，化痰的作用。主要用于治療經(jīng)絡(luò)不暢通，長(zhǎng)時(shí)間咳嗽引起的胸痛，痰中帶血等病癥?！度杖A子本草》云：“治渴及吐酒?！薄侗静萸笤氛f(shuō)：“通經(jīng)絡(luò)，舒氣，化痰?！爆F(xiàn)代藥學(xué)專(zhuān)著也記載了橘絡(luò)，如《四川中藥志》記載其：“化痰通絡(luò)，治肺勞咳痰、咳血等癥”。最近的相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明，橘絡(luò)具有黃酮類(lèi)等化合物。橘絡(luò)是否具有抗氧化作用進(jìn)而能延緩衰老正是本實(shí)驗(yàn)需要探索的，本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用D-半乳糖誘導(dǎo)亞急性衰老小鼠模型來(lái)檢測(cè)橘絡(luò)的抗氧化能力。實(shí)驗(yàn)可以看出，橘絡(luò)能明顯改善D-半乳糖誘導(dǎo)亞急性衰老小鼠模型的氧化能力，提示橘絡(luò)可提高機(jī)體抗氧化系統(tǒng)的活力甚至具有延緩衰老的作用，但其作用機(jī)理還有待于進(jìn)一步的研究。

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