鄔林祥 常紹琴 劉云樂 邢藝齡 姚 莉 樊官偉 柳占彪*

(1.元和藥業(yè)股份有限公司,內(nèi)蒙古 呼和浩特 010080；2.天津中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，天津 300193)

參竹精片由黃精、玉竹、手掌參、制何首烏、廣棗組成，具有補(bǔ)腎強(qiáng)身的功效，主治腎虛，精血不足，筋骨酸痛，年邁體弱等癥[1]?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明這5種藥材均具有抗疲勞作用[2-5]，本項研究觀察由這5種藥材組成的復(fù)方制劑即參竹精片是否對腎陰虛小鼠具有抗疲勞及耐缺氧作用。

1 實驗材料

1.1 動物: 昆明小鼠，體重30±2g，雌性，購自北京維通利華實驗動物技術(shù)有限公司，許可證號為 SCXK(京)2012-0001，合格證號為11400700068351。動物分籠飼養(yǎng)，室溫22±2℃，相對濕度50±5%，飼料為全價顆粒飼料，飲水用清潔自來水，自由飲用。

1.2 藥物 : 參竹精片，將手掌參、黃精、玉竹、何首烏(制)、廣棗混合，經(jīng)水提、過濾、干燥制成片劑，元和藥業(yè)股份有限公司提供(批號：20140901)；六味地黃丸，北京同仁堂科技發(fā)展股份有限公司制藥廠(批號：14030409)。

1.3 試劑: 復(fù)方利血平，石藥集團(tuán)歐意藥業(yè)有限公司(批號：361140610)；左甲狀腺素鈉片(Merck KGaA，批號：175731)；鈉石灰，上海五四化學(xué)試劑有限公司(批號：540815)。

2 實驗方法

2.1 腎陰虛造模方法:選昆明雌性小鼠，體重30±2g，以利血平15μg/只+甲狀腺素25μg/只，ig，1次/d，連續(xù)7d，小鼠進(jìn)食減少，飲水增多，體重減輕，躁動不安，易驚，后期出現(xiàn)瞎眼等，確定造模成功。

2.2 負(fù)重游泳試驗方法:選腎陰虛造模成功小鼠60只，隨機(jī)分為模型組、參竹精0.5g/kg、0.25g/kg、0.125g/kg組和六味地黃丸0.45 g/kg陽性藥對照組，每組12只，另選12只健康小鼠作為正常對照組，給藥組按照設(shè)定的劑量，ig，1次/d，連續(xù)7d，正常對照組和模型組給予等量生理鹽水。各組于末次給藥后2 h，尾根部負(fù)荷2g鉛絲，分別置于游泳箱中游泳，水深30cm，水溫23℃,記錄自游泳開始至頭部全部沉入水中8s不能浮出水面的時間,作為小鼠力竭游泳時間。

2.3 耐缺氧試驗方法: 選腎陰虛造模成功小鼠60只，分組和給藥方法同上。以上各組在末次給藥后2 h，每次取3只小鼠放入1000mL廣口瓶，(實驗前瓶內(nèi)裝入鈉石灰60g,用以吸收二氧化碳和水份),將蓋蓋嚴(yán)，并用凡士林密封。觀察小鼠的活動情況，記錄小鼠的存活時間。

2.4 統(tǒng)計學(xué)分析: 所得數(shù)據(jù)均用SPSS 17.0軟件統(tǒng)計，數(shù)據(jù)用±s表示，各組間比較均采用方差分析，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

5 實驗結(jié)果

5.1 參竹精片對腎陰虛小鼠負(fù)重游泳的影響

表1 參竹精片對腎陰虛小鼠負(fù)重游泳的影響

注：與正常組比較 **P<0.01；與模型組比較 #P<0.05， ##P<0.01

如表1所示，模型組小鼠與正常組比較力竭游泳時間均明顯減少(P<0.01)，表明腎陰虛小鼠的抗疲勞能力降低。參竹精3個劑量治療組與模型組比較力竭游泳時間均明顯增加(P<0.05或P<0.01)，結(jié)果表明參竹精具有提高腎陰虛小鼠的抗疲勞作用。

5.2 參竹精片對腎陰虛小鼠耐缺氧的影響

表2 參竹精片對腎陰虛小鼠耐缺氧的影響

注：與正常組比較**P<0.01；與模型組比較##P<0.01

如表2所示，模型組小鼠與正常組比較耐缺氧存活時間均明顯減少(P<0.01),表明腎陰虛小鼠的耐缺氧能力降低。參竹精片0.5g/kg、0.25g/kg、0.125 g/kg3個劑量治療組與模型組比較耐缺氧存活時間均明顯增加(P<0.01)，結(jié)果表明參竹精片可提高小鼠的耐缺氧時間。

4 討論

采用甲狀腺素片和利血平是復(fù)制腎陰虛小鼠模型常用的實驗方法[6，7]，臨床表現(xiàn)可呈現(xiàn)與中醫(yī)腎陰虛證相似的陰虛內(nèi)熱類型，這種模型具有兩個顯著的特點,即類似甲狀腺機(jī)能亢進(jìn)和交感神經(jīng)興奮性增強(qiáng)，表現(xiàn)為動物進(jìn)食減少，飲水增多，體重減輕，躁動不安，易驚等。本研究以利血平15μg+甲狀腺素25μg/只/日，ig，每日1次，連續(xù)7d，小鼠出現(xiàn)進(jìn)食量減少，身體消瘦，體重降低，躁動，易驚，表明造模成功。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為腎陰虛證是指腎陰虧損，失于滋養(yǎng)，虛熱內(nèi)生所表現(xiàn)的證候，目前對于腎陰虛的證候評價缺乏客觀量化指標(biāo)。本研究以力竭游泳時間、耐缺氧為觀察指標(biāo)，對腎陰虛小鼠的體能進(jìn)行了觀察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)模型小鼠的力竭游泳時間、耐缺氧存活時間均明顯低于正常小鼠，實驗結(jié)果表明這些觀察指標(biāo)可用于腎陰虛小鼠體能及其藥物療效的評價指標(biāo)。

蒙醫(yī)學(xué)古籍《四部甘露》中記載赫依病癥狀為“疲乏無力、各關(guān)節(jié)疼痛、神志不清、睡眠不安、頭暈…”，巴達(dá)干病癥狀為“身心沉重、懈怠、食欲不佳…”[8]。由此可見，腎陰虛所致的體能降低可歸屬于蒙醫(yī)學(xué)的“巴達(dá)干、赫依”性疾病范疇，病因是由巴達(dá)干、赫依功能紊亂所致，治療應(yīng)以調(diào)體素，行巴達(dá)干、赫依為治則[9]。參竹精片由制何首烏、黃精、玉竹、廣棗、手掌參組成，具有補(bǔ)腎，滋補(bǔ)強(qiáng)身的功能，方中手掌參補(bǔ)益氣血，生津止渴；黃精補(bǔ)中益氣，潤心肺，強(qiáng)筋骨；玉竹養(yǎng)陰、潤燥，除煩，止渴；何首烏(制)補(bǔ)肝腎，益精血，強(qiáng)筋骨；廣棗行氣活血，養(yǎng)心安神，諸藥配伍通過健脾、養(yǎng)胃、補(bǔ)肝生津作用[10]，一方面可加強(qiáng)機(jī)體的代謝功能，促進(jìn)養(yǎng)分的吸收，補(bǔ)充“精血”和“腎精”不足，增加體能；另一方面可促進(jìn)代謝產(chǎn)物的分解，加快體內(nèi)“赫依”的排出，以此恢復(fù)三根平衡，起到補(bǔ)腎，滋補(bǔ)強(qiáng)身的作用。現(xiàn)代藥理研究表明手掌參、玉竹、黃精、何首烏、廣棗單獨(dú)應(yīng)用均具有抗疲勞、抗氧化、減緩衰老和增強(qiáng)機(jī)體免疫力的作用[2-5]，本研究結(jié)果顯示參竹精片能夠延長腎陰虛小鼠的力竭游泳時間和耐缺氧存活時間，表明參竹精片具有抗疲勞及耐缺氧作用，本實驗結(jié)果可為參竹精片治療腎陰體弱提供實驗依據(jù)。

[1]中華人民共和國衛(wèi)生部藥典委員會.中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)蒙藥分冊[S].1998.127.

[2]宋士軍,李芳芳,岳華,等.何首烏的抗疲勞及耐缺氧作用研究[J].河北中醫(yī)藥學(xué)報,2003,18(3):32～33.

[3]吳曉嵐,王玉勤,車光昇,等.黃精和玉竹抗疲勞作用的實驗研究[J].中國冶金工業(yè)醫(yī)學(xué)雜志,2009,26(3)：271～272.

[4]王笑琴，王力偉，趙巖,等.廣棗的化學(xué)成分和藥理活性研究進(jìn)展[J].食品科學(xué),2004,35(13)：281～285.

[5]趙亮,劉國清.手掌參合劑抗疲勞作用的實驗研究,中醫(yī)臨床研究,2011,3(22):17.

[6]李玉潔,魏丹丹,魏茂林,等.基于動物物質(zhì)與能量代謝檢測評價3種腎陰虛證模型建立方法[J].中醫(yī)學(xué)報,2017,32(224):83～88.

[7]李儀奎.中藥藥理實驗方法學(xué)[M].第2版,上海:上海科學(xué)技術(shù)出版社,2006.151.

[8]伊稀巴拉珠爾.四部甘露[M].呼和浩特:內(nèi)蒙古人民出版社,1998.314～330.

[9]策·蘇榮扎布,等.蒙古學(xué)百科全書·蒙醫(yī)學(xué)[M].內(nèi)蒙古人民出版社,2004.31.

[10]烏力吉特古斯,烏云斯日古楞,白玉風(fēng),等.蒙藥參竹精片(毛浩日查干-5)治療腎虛的體會[J].中國民族醫(yī)藥雜志,2014,20(5):21～22.