呼吸道過(guò)敏患兒與特異性IgG抗體表達(dá)水平的相關(guān)研究*

陳輝，高昆，許芳明，張乾，章學(xué)英，王嶺，劉春梅，姜瑋，陳建萍

（上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院1.兒科，2.檢驗(yàn)科，上海 200240）

呼吸道過(guò)敏患兒與特異性IgG抗體表達(dá)水平的相關(guān)研究*

陳輝1，高昆2，許芳明1，張乾1，章學(xué)英1，王嶺1，劉春梅1，姜瑋1，陳建萍1

（上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院1.兒科，2.檢驗(yàn)科，上海 200240）

目的 探討食物特異性IgG的表達(dá)水平與非IgE介導(dǎo)的呼吸道過(guò)敏的關(guān)系，以及特異性IgG定量檢測(cè)能否作為食物引起呼吸道過(guò)敏反應(yīng)的診斷指標(biāo)之一。方法選取2013年12月-2015年12月在該院兒科哮喘門(mén)診診治的非IgE介導(dǎo)呼吸道過(guò)敏的患兒，共78例，健康對(duì)照組27例。在飲食回避后對(duì)入組患兒進(jìn)行療效判斷，其標(biāo)準(zhǔn)為癥狀消失或明顯改善，癥狀評(píng)分為3分；癥狀有所改善為2分；癥狀無(wú)改善或加重為1分視為無(wú)效。然后，對(duì)特異性IgG的表達(dá)水平與臨床癥狀評(píng)分之間的關(guān)系進(jìn)行分析，并通過(guò)ROC曲線(xiàn)評(píng)估特異性IgG的診斷價(jià)值。結(jié)果過(guò)敏組患兒的臨床癥狀得分以及特異性IgG的表達(dá)水平，與對(duì)照組比較，均升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。入組患兒的臨床癥狀得分與特異性IgG水平呈正相關(guān)；且特異性IgG的診斷準(zhǔn)確性較高，ROC曲線(xiàn)下面積為0.713。結(jié)論特異性IgG抗體水平的測(cè)定在非IgE介導(dǎo)兒童食物引起呼吸道過(guò)敏診斷中有一定的參考價(jià)值，可在臨床上推廣使用。

特異性IgG；非IgE介導(dǎo)；過(guò)敏性疾病；診斷

近十年來(lái)，由食物引起呼吸道過(guò)敏的患兒明顯增加[1-2]，其發(fā)病機(jī)制可分為IgE介導(dǎo)、非IgE介導(dǎo)以及IgE與非IgE混合介導(dǎo)[3-4]。IgE介導(dǎo)的呼吸道過(guò)敏研究最為多見(jiàn)，屬于經(jīng)典的Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)，多引起急性病變；血清食物特異性IgE檢測(cè)、皮膚針刺實(shí)驗(yàn)等可用于診斷IgE介導(dǎo)的呼吸道過(guò)敏[5-6]。而非IgE介導(dǎo)的呼吸道過(guò)敏可涉及到IgG、IgA及細(xì)胞介導(dǎo)的多種免疫學(xué)機(jī)制，目前對(duì)其研究知之甚少，此類(lèi)過(guò)敏反應(yīng)常引起亞急性或慢性病變，皮膚點(diǎn)刺實(shí)驗(yàn)以及特異性IgE檢測(cè)對(duì)該疾病的診斷均有一定的限制性[7]。臨床上，雙盲安慰劑對(duì)照的食物激發(fā)試驗(yàn)是診斷非IgE介導(dǎo)呼吸道過(guò)敏的“金標(biāo)準(zhǔn)”[8]，但因有一定的風(fēng)險(xiǎn)而受到醫(yī)院條件與操作人員水平的限制，給臨床診斷帶來(lái)了一定的困難。有研究表明，輔助性T細(xì)胞與非IgE介導(dǎo)的食物引起呼吸道過(guò)敏有關(guān)，而輔助性T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，可以促進(jìn)食物特異性IgG的表達(dá)[9-10]，且特異性IgG簡(jiǎn)便易測(cè)，所以IgG有望可以成為非IgE介導(dǎo)兒童食物引起呼吸道過(guò)敏診斷指標(biāo)之一。因此，此次研究的目的是探究IgG的表達(dá)水平與非IgE介導(dǎo)食物引起呼吸道過(guò)敏的關(guān)系以及IgG檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性能否作為食物引起呼吸道過(guò)敏反應(yīng)的診斷指標(biāo)之一。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2013年12月-2015年12月78例在上海市徐匯區(qū)大華醫(yī)院兒科哮喘門(mén)診診治的非IgE介導(dǎo)呼吸道過(guò)敏性疾病患兒相關(guān)資料作為過(guò)敏組。男46例（58.97%），女32例（41.03%）；年齡2～7歲。并同時(shí)收集27例兒科普通門(mén)診無(wú)過(guò)敏癥狀的同齡體檢兒童資料作為對(duì)照組，男18例（66.67%），女9例（33.33%）。

1.2 過(guò)敏組患兒入選標(biāo)準(zhǔn)

總IgE正常范圍，特異性IgE陰性，愿意參加此次研究者。入組患兒符合倫理學(xué)要求，哮喘與鼻炎診斷符合診療指南，鼻竇炎診斷均有副鼻竇CT檢查證實(shí)。

1.3 過(guò)敏組患兒排除標(biāo)準(zhǔn)

總IgE超過(guò)正常值或正常范圍同時(shí)伴有特異性IgE陽(yáng)性；不愿意參加此次研究者；近期患影響免疫功能的疾病者。

1.4 特異性IgG定量檢測(cè)

在患兒飲食回避前、后采用酶聯(lián)免疫方法（ELISA）檢測(cè)血清特異性IgG水平。酶標(biāo)儀系美國(guó)伯騰公司的Elx808，檢測(cè)試劑盒由美國(guó)BIOMERRICA公司生產(chǎn)，可同時(shí)檢測(cè)14種常見(jiàn)食物的IgG抗體，包括牛肉、鱈魚(yú)、雞肉、玉米、大米、蟹、蛋黃/蛋清、蘑菇、牛奶、豬肉、蝦、大豆、西紅柿和小麥。使用BD公司有促凝膠真空采血管采集患兒靜脈血2～3ml，分離血清。按照ELISA試劑盒檢測(cè)血清中IgG抗體，450 nm處比色，根據(jù)每孔吸光度及標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算IgG抗體水平（u/ml）。

1.5 觀察指標(biāo)

食物特異性IgG抗體檢測(cè)判斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)試劑盒說(shuō)明將IgG抗體水平分為4級(jí)：檢測(cè)值＞200 u/ml為高度敏感（+++），100～200 u/ml為中度敏感（++），50～100 u/ml為輕度敏感（+），＜50 u/m l為陰性。

1.6 食物回避干預(yù)治療

對(duì)過(guò)敏組患兒進(jìn)行食物的回避治療，根據(jù)IgG抗體定量檢測(cè)水平高低，中度與高度及以上敏感者分別回避3～6個(gè)月；即對(duì)敏感食物種類(lèi)較少者，直接禁食此類(lèi)食物6個(gè)月；如果較多，則禁食++和+++陽(yáng)性食物3個(gè)月以上；+食物建議每周進(jìn)食1次，交替食用。所有過(guò)敏組患兒均按《指南》配合藥物治療。

療效判斷標(biāo)準(zhǔn)：調(diào)整飲食3～6個(gè)月后，癥狀消失或明顯改善，癥狀評(píng)分為3分；癥狀有所改善為2分；癥狀無(wú)改善或加重為1分視為無(wú)效?？傆行?癥狀消失或明顯改善+癥狀有所改善。

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，臨床癥狀得分、特異性IgG水平等正態(tài)分布資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）的形式表示，兩組間的比較采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用例（%）的形式表示。臨床癥狀評(píng)分與特異性IgG水平的關(guān)系采用相關(guān)性分析，并利用ROC曲線(xiàn)對(duì)IgG的診斷價(jià)值進(jìn)行評(píng)估。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 過(guò)敏組患兒一般情況

過(guò)敏組患兒均為喘息急性發(fā)作或慢性持續(xù)的患兒；均伴有輕重不等的鼻塞、鼻腔流黏性分泌物或清晨喉中痰的癥狀（100%）；34例患兒行副鼻竇CT檢查，示有副鼻竇炎或腺樣體增生的改變者30例（88.24%）；13例患兒有中耳炎病史；45例患兒伴有皮膚濕疹表現(xiàn)（57.69%），75例患兒有濕疹病史（96.15%）。71例一、二級(jí)直系親屬存在家族過(guò)敏史。

2.2 過(guò)敏組患兒治療前IgG檢測(cè)結(jié)果

通過(guò)對(duì)過(guò)敏組患兒治療前的IgG水平分析發(fā)現(xiàn)，絕大多數(shù)患者IgG水平在50 u/ml以上，其中IgG水平在（150～200）u/ml之間的患者最多，共11例。過(guò)敏組治療前患兒IgG呈正態(tài)性分布，含量為（303.02±133.72）u/ml。除此之外，通過(guò)對(duì)14種常見(jiàn)食物IgG抗體的檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，對(duì)牛奶和雞蛋過(guò)敏患者最多，其百分比均為22%（見(jiàn)表1）。

2.3 對(duì)照組兒童和過(guò)敏組患兒治療前IgG水平比較

對(duì)照組絕大多數(shù)兒童IgG水平＜200 u/ml。14種常見(jiàn)食物IgG抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)與過(guò)敏組患兒相同，對(duì)照組兒童對(duì)牛奶和雞蛋最敏感（見(jiàn)表2）。對(duì)照組兒童IgG呈正態(tài)分布，含量為（196.72±139.67）u/ml。將對(duì)照組和過(guò)敏組治療前兩組IgG水平進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)治療前患兒的IgG水平過(guò)敏組＞對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.520，P=0.001）。

2.4 過(guò)敏組患兒食物回避干預(yù)治療后IgG檢測(cè)結(jié)果

根據(jù)IgG抗體定量檢測(cè)水平高低，對(duì)過(guò)敏組患兒進(jìn)行食物回避治療，治療后臨床癥狀均明顯緩解。通過(guò)對(duì)過(guò)敏組患兒治療后的IgG水平分析發(fā)現(xiàn)，43.6%的患兒IgG水平在150 u/ml以下，其中IgG水平在（175～200）u/ml之間的患者比例最高，共12例（15.4%）。另外，14種常見(jiàn)食物IgG抗體檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)也是牛奶和雞蛋過(guò)敏最多，其百分比分別為21%和22%（見(jiàn)表3）。過(guò)敏組患兒治療后的IgG呈正態(tài)分布，含量為（166.47±77.78）u/ml。與治療前相比，過(guò)敏組患兒治療后IgG水平降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=7.796，P=0.000）。Person相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)，治療前后IgG的變化量與臨床療效呈正相關(guān)（r=0.581，P=0.000）（見(jiàn)圖1）。

2.5 ROC曲線(xiàn)分析

為了進(jìn)一步了解特異性IgG在該過(guò)敏反應(yīng)中的診斷價(jià)值，繪制ROC曲線(xiàn)對(duì)患者特異性IgG水平進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)曲線(xiàn)下面積為0.713，表明特異性IgG對(duì)過(guò)敏反應(yīng)具有一定的診斷價(jià)值。見(jiàn)圖2。

表1 過(guò)敏組患兒治療前食物過(guò)敏所占比例

表2 對(duì)照組兒童食物過(guò)敏所占比例

表3 過(guò)敏組患兒治療后食物過(guò)敏所占比例

圖1 IgG變化量與療效評(píng)分散點(diǎn)圖

圖2 特異性IgG表達(dá)水平的ROC曲線(xiàn)

3 討論

近年來(lái)，非IgE介導(dǎo)兒童食物引起呼吸道過(guò)敏的病例逐年增多，有研究表明絕大多數(shù)牛奶引起的呼吸道過(guò)敏都屬于非IgE介導(dǎo)的呼吸道過(guò)敏反應(yīng)[11]。并且該過(guò)敏對(duì)兒童的健康影響極大，易導(dǎo)致誤診誤治。為了能盡早給該疾病做出正確的診斷，本研究的主要目的是找出一個(gè)方便、快捷、有效的指標(biāo)，即IgG，來(lái)探索它是否可以成為診斷非IgE介導(dǎo)兒童食物引起呼吸道過(guò)敏的有效指標(biāo)，便于該疾病在臨床上早發(fā)現(xiàn)早治療。

非IgE介導(dǎo)食物引起呼吸道過(guò)敏的患兒呼吸道的主要表現(xiàn)為打噴嚏、咳嗽、憋氣、氣促等不良反應(yīng)[12]，此次研究中對(duì)這些不良反應(yīng)進(jìn)行評(píng)分，發(fā)現(xiàn)過(guò)敏組的患兒高于對(duì)照組。長(zhǎng)期出現(xiàn)這些不良情況會(huì)導(dǎo)致兒童營(yíng)養(yǎng)不良、消瘦、貧血、生長(zhǎng)遲緩等，嚴(yán)重影響患兒正常的學(xué)習(xí)生活，需要密切關(guān)注。本次研究中過(guò)敏組患兒特異性IgG的含量高于對(duì)照組，且在飲食回避后隨著臨床癥狀改善IgG水平有下降，這提示IgG可能參與了該呼吸道過(guò)敏的進(jìn)程。有研究表明，非IgE介導(dǎo)食物引起呼吸道過(guò)敏的患兒呼吸系統(tǒng)會(huì)出現(xiàn)大量的肥大細(xì)胞浸潤(rùn)，而肥大細(xì)胞表面存在IgG受體，特異性IgG與肥大細(xì)胞表面受體結(jié)合后可以激活肥大細(xì)胞，導(dǎo)致炎癥的發(fā)生[13]。

為了進(jìn)一步的研究特異性IgG的表達(dá)水平與非IgE介導(dǎo)兒童食物引起呼吸道過(guò)敏的關(guān)系，對(duì)過(guò)敏組患兒飲食回避前后特異性IgG的表達(dá)水平的差值與患兒的臨床療效之間的關(guān)系進(jìn)行分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)特異性IgG的含量差值與臨床療效得分呈正相關(guān)，這就表明過(guò)敏組患兒在飲食回避前后特異性IgG水平降低的越多，臨床療效就越好。經(jīng)查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，一些食物蛋白進(jìn)入機(jī)體后，由于不能被機(jī)體分解為氨基酸、單糖等物質(zhì)，而不能被機(jī)體完全消化利用，使一些食物蛋白等大分子物質(zhì)直接進(jìn)入腸道，被免疫系統(tǒng)當(dāng)做異物識(shí)別，從而激活免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生特異性IgG[14]。此外，還有研究表明非IgE介導(dǎo)食物引起呼吸道過(guò)敏的患兒呼吸系統(tǒng)黏膜都有一定的破損，從而導(dǎo)致異常的抗原攝取，導(dǎo)致IgG表達(dá)升高，發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)[15]。

在本研究中還通過(guò)ROC曲線(xiàn)對(duì)IgG在該過(guò)敏反應(yīng)中的診斷價(jià)值進(jìn)行了探索，發(fā)現(xiàn)曲線(xiàn)下面積為0.713，說(shuō)明IgG具有一定的診斷準(zhǔn)確度。輔助性T細(xì)胞在非IgE介導(dǎo)的兒童食物引起呼吸道過(guò)敏中發(fā)揮了重要作用，而IgG的產(chǎn)生與輔助性T細(xì)胞之間也存在一定的關(guān)系，在該過(guò)敏反應(yīng)中輔助性T細(xì)胞表達(dá)升高，而輔助性T細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，例如γ-干擾素（IFN-γ）、白細(xì)胞介素-4（IL-4）等，可以促進(jìn)食物特異性IgG的表達(dá)，使該過(guò)敏患兒體內(nèi)的IgG表達(dá)升高，這些都表明特異性IgG水平與過(guò)敏反應(yīng)的關(guān)系密切，使特異性IgG具有一定的診斷準(zhǔn)確度。

綜上所述，非IgE介導(dǎo)兒童食物引起呼吸道過(guò)敏患兒體內(nèi)的特異性IgG水平高于正常兒童。特異性IgG的ROC曲線(xiàn)下面積為0.713，具有一定的診斷價(jià)值。由于本次的樣本量有限，還有待更大樣本量的進(jìn)一步研究，以便于在臨床上更好的推廣使用，使非IgE介導(dǎo)的兒童食物引起呼吸道過(guò)敏較早地得到確診，避免誤診誤治。

[1]陳靖,梁健剛,胡廷保,等.兒童過(guò)敏性鼻炎食物不耐受檢測(cè)分析[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥.2012,7(36):31-33.

[2]陳紅,楊惠泉,黃玉柱,等.173例哮喘兒童過(guò)敏原檢測(cè)分析[J].中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合兒科學(xué),2013,(5):397-400.

[3]李俊新,張健,代玉龍,等.兒童咳嗽變異性哮喘與食物不耐受檢測(cè)的相關(guān)性研究[J].中國(guó)兒童保健雜志.2011,19(6):576-577.

[4]WARREN C M,OTTO A K,WALKNER M M,et al.Quality of Life Among Food Allergic Patients and Their Caregivers[J].Curr Allergy Asthma Rep,2016,16(5):38.

[5]PESEK R D,JONES S M.Current and Emerging Therapies for IgE-Mediated Food Allergy[J].Curr Allergy Asthma Rep,2016, 16(4):28.

[6]馬路一,王鸞升,陳海波,等.哮喘兒童IgE水平與血鉛的相關(guān)性研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2009,19(16):2548-2550.

[7]TAIT C,GOLDMAN R D.Dietary exclusion for childhood atopic dermatitis[J].Can Fam Physician,2015,61(7):609-611.

[8]孫梅,郭靜.兒童食物變態(tài)反應(yīng)的發(fā)病機(jī)制及診治進(jìn)展[J].中華婦幼臨床醫(yī)學(xué)雜志,2012,8(2):112-115.

[9]陳同辛,姚春美.嬰幼兒食物過(guò)敏的診斷和治療進(jìn)展[J].世界華人消化雜志,2012,20(16):1428-1432.

[10]BELSON A,SCHMIDT T,FERNANDO D,et al.Characterisation of the clinical and activated T cell response to repeat delayed-type hypersensitivity skin challenges in human subjects, with KLH and PPD,as a potential model to test T cell-targeted therapies[J].Inflamm Res,2016,65(5):389-404.

[11]鄭佩燕,簡(jiǎn)幸儀,黃惠敏,等.廣州地區(qū)過(guò)敏疾病患者15種常見(jiàn)過(guò)敏原分布規(guī)律分析[J].貴陽(yáng)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2015,40(11):1197-1201.

[12]胡燕.重視開(kāi)展兒童食物過(guò)敏研究[J].中國(guó)兒童保健雜志,2011, 19(6):489-491.

[13]HE S H,ZHANG H Y,ZENG X N,et al.Mast cells and basophils are essential for allergies:mechanisms of allergic inflammation and a proposed procedure for diagnosis[J].Acta Pharmacol Sin,2013,34(10):1270-1283.

[14]ASHLEY S,DANG T,KOPLIN J,et al.Food for thought:progress in understanding the causes and mechanisms of food allergy[J]. Curr Opin Allergy Clin Immunol.2015,15(3):237-242.

[15]MANE S K,HOLLISTER M E,BAHNA S L.Food protein-induced enterocolitis syndrome to trivial oral mucosal contact[J]. Eur J Pediatr,2014,173(12):1545-1547.

（張蕾 編輯）

Relation between expression of food-specific IgG and respiratory allergic diseases in children*

HuiChen1,Kun Gao2,Fang-ming Xu1,Qian Zhang1,Xue-ying Zhang1, LingWang1,Chun-mei Liu1,Wei Jiang1,Jian-ping Chen1
(1.Department of Pediatrics,2.Clinical Laboratory,Dahua Hospital of Xuhui District of Shanghai,Shanghai200240,China)

ObjectiveToexplore the correlation between the levelof food-specific IgGand the severity of respiratory allergies caused by food,and whether the positive expression of specific IgG can be used as a diagnostic indicator of food-induced respiratory allergies or not.MethodsA total of 78 subjects,who were diagnosed with non-IgE-mediated respiratory allergies in the Department of Pediatrics Dahua Hospital of XuhuiDistrict from December 2013 to December 2015,were enrolled into study group.The control group included 27 healthy children.The patients were evaluated for efficacy after dietexclusion.Evaluation criteriawere as follows∶symptom scorewas 3 pointswhen the symptoms disappeared or significantly improved;2 points when the symptoms were improved;1 points when the symptoms were not improved or even worsened which was considered invalid.Then,the relationships between the expression level of specific IgG and the scores of clinical symptoms were analyzed,and the diagnostic value of specific IgG was evaluated by ROC curve.ResultsCompared with the control group,the scores of clinical symptoms and the expression level of specific IgG were significantly increased(P＜0.05).The scores of clinical symptoms and the expression level of specific IgG was positively correlated(r=0.488,P=0.000)in the allergic children.And the diagnostic accuracy of specific IgG was high.The area under the ROC curve was 0.713.ConclusionsDetermination of food-specific IgG level has certain value in diagnosis of non-IgE-mediated food-induced respiratory allergies inchildren,and isworth popularizing in clinical practice to preventmisdiagnosis.

specific IgG;respiratory allergy;non-IgE-mediated;diagnosis

R 562

A

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.07.012

1005-8982（2017）07-0054-04

2016-09-03

上海市衛(wèi)計(jì)委基金資助項(xiàng)目（No：20134250）

陳建萍，E-mail：chenjp623@126.com，Tel：13918124561