布魯氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫滅活疫苗同時(shí)免疫綿羊的試驗(yàn)

何彥春，曹麗萍，李生靜，張 瑜

（1. 張掖市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅張掖 734000；2. 甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅蘭州 730000；3. 臨澤縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅臨澤 734200）

布魯氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫滅活疫苗同時(shí)免疫綿羊的試驗(yàn)

何彥春1，曹麗萍2，李生靜3，張 瑜3

（1. 張掖市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅張掖 734000；2. 甘肅省動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅蘭州 730000；3. 臨澤縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，甘肅臨澤 734200）

為研究布魯氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫滅活疫苗同時(shí)免疫綿羊后的效果，選擇50只育肥羊，分別用布魯氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活苗，同時(shí)對綿羊進(jìn)行注射免疫，30 d后采血檢測免疫抗體。結(jié)果表明：布魯氏菌病虎紅平板凝集抗體陽性率達(dá)100%，且均呈強(qiáng)陽性反應(yīng)；O型和亞洲I型口蹄疫抗體合格率分別達(dá)78%和80%。試驗(yàn)結(jié)果初步證明，布魯氏菌病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗同時(shí)對綿羊進(jìn)行免疫，同樣可以達(dá)到預(yù)期的免疫效果。

布魯氏菌??；口蹄疫；免疫效果；綿羊

布魯氏菌?。ㄒ韵潞喎Q布?。┦怯刹剪斒暇鸬娜双F共患傳染病。近年來，布病疫情在全國多地反彈，防控形勢嚴(yán)峻，嚴(yán)重危害公共衛(wèi)生安全。由于羊養(yǎng)殖量的不斷增加，導(dǎo)致布病的檢測面和檢測量不斷增大，防控任務(wù)量和資金供需矛盾加劇，使得檢測凈化工作難以為繼。為盡快控制羊布病的反彈勢頭，保障人民群眾身體健康和養(yǎng)羊業(yè)持續(xù)發(fā)展，根據(jù)《國家布魯氏菌病防治計(jì)劃（2016—2020年）》要求，在布病流行一類地區(qū)，盡快實(shí)施以強(qiáng)制免疫為主的防控策略。實(shí)施布病強(qiáng)制免疫后，必然會(huì)增加基層廣大動(dòng)物防疫人員的工作量。如果布病疫苗能與口蹄疫等疫苗同時(shí)免疫，便可大大減輕基層防疫人員的勞動(dòng)強(qiáng)度。因此為研究布魯氏菌活疫苗（M5株）和口蹄疫滅活苗同時(shí)免疫育肥綿羊的免疫效果，開展了本試驗(yàn)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)羊群及分組

選擇4月齡左右育肥羊200只作為試驗(yàn)羊群。試驗(yàn)前進(jìn)行布病和口蹄疫抗體檢測，結(jié)果布病均為陰性，口蹄疫抗體水平均小于1:8。將200只試驗(yàn)羊隨機(jī)分為4組，每組50只。第1組為空白對照組，不進(jìn)行布病和口蹄疫免疫；第2組進(jìn)行布病活疫苗（M5株）皮下注射免疫；第3組進(jìn)行口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗肌肉注射免疫；第4組同步進(jìn)行布病活疫苗（M5株）皮下注射和口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗肌肉注射免疫。

1.2 疫苗和免疫方法

布魯氏菌活疫苗（M5株），天康生物股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)2015001。按照疫苗使用說明書要求，每只羊頸部皮下注射1頭份?？谔阋逴型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗，批號(hào)201511003，中農(nóng)威特生物科技有限公司生產(chǎn)。每只羊頸部肌肉注射1 mL，第4組開展免疫時(shí)兩種疫苗分別注射于羊頸部兩側(cè)。

1.3 樣品采集

免疫30 d后，對4組200只試驗(yàn)羊全部采血，無菌分離血清后進(jìn)行抗體檢測。

1.4 檢測試劑及方法

1.4.1 布病免疫抗體檢測。布病虎紅平板凝集試驗(yàn)抗原、陽性血清、陰性血清，中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所生產(chǎn)，批號(hào)201602。按照《動(dòng)物布魯氏菌病診斷技術(shù)》（GB/T 18646—2002）規(guī)定的方法，采用虎紅平板凝集試驗(yàn)（RBPT）進(jìn)行檢測。

1.4.2 口蹄疫免疫抗體檢測?？谔阋逴型、亞洲I型液相阻斷ELISA檢測試劑盒，中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，O型批號(hào)20160516101-12、亞洲I型批號(hào)2016062102-2。嚴(yán)格按照口蹄疫O型、亞洲I型液相阻斷ELISA檢測試劑盒說明書進(jìn)行操作，O型、亞洲I型ELISA板，均按每板10頭份進(jìn)行操作。根據(jù)農(nóng)業(yè)部《2016年國家動(dòng)物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，口蹄疫O型、亞洲Ⅰ型免疫21 d后的液相阻斷ELISA抗體效價(jià)≥26為免疫合格。

2 檢測結(jié)果

第1組：空白對照組，50只試驗(yàn)羊布病平板凝集抗體檢測結(jié)果均為陰性，O型口蹄疫和亞洲Ⅰ型口蹄疫抗體口蹄疫抗體水平均小于1:8。

第2組：布病活疫苗（M5株）免疫組，50只試驗(yàn)羊布病平板凝集抗體檢測均呈強(qiáng)陽性，抗體轉(zhuǎn)陽率達(dá)100%，O型口蹄疫和亞洲Ⅰ型口蹄疫抗體口蹄疫抗體水平均小于1:8。

第3組：O型、亞洲I型口蹄疫免疫組，50只試驗(yàn)羊布病平板凝集抗體檢測結(jié)果均為陰性，O型口蹄疫抗體合格40份，合格率80%（40/50），亞洲Ⅰ型口蹄疫抗體合格42份，合格率84%（42/50）。

第4組：布病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗同步免疫組，50只試驗(yàn)羊布病平板凝集抗體檢測均呈強(qiáng)陽性，抗體轉(zhuǎn)陽率達(dá)100%，O型口蹄疫抗體合格39份，合格率為78%（39/50），亞洲Ⅰ型口蹄疫抗體合格40份，合格率為80%（40/50）。結(jié)果詳見表1。

表1 血清抗體檢測結(jié)果匯總（單位：只/%）

3 結(jié)論

李建玲等[1]報(bào)道，布病活疫苗（M5株）免疫羊30天后，虎紅平板凝集抗體轉(zhuǎn)陽率達(dá)100%。本試驗(yàn)結(jié)果表明，布病活疫苗（M5株）免疫育肥羊30天后，虎紅平板凝集抗體轉(zhuǎn)陽率達(dá)100%，布病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗同時(shí)對育肥綿羊免疫30天后，布病虎紅平板凝集抗體轉(zhuǎn)陽率同樣達(dá)100%。

根據(jù)農(nóng)業(yè)部《2016年國家動(dòng)物疫病監(jiān)測與流行病學(xué)調(diào)查計(jì)劃》規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，口蹄疫免疫合格個(gè)體數(shù)量占群體數(shù)量的70%（含）以上即為免疫合格群體。本試驗(yàn)結(jié)果表明，布病活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗同時(shí)對綿羊免疫30 d后，O型口蹄疫液相阻斷ELISA抗體合格率達(dá)78%，單獨(dú)注射組合格率為80%；亞洲Ⅰ型口蹄疫液相阻斷ELISA抗體合格率達(dá)80%，單獨(dú)注射組合格率為84%。兩組均合格且結(jié)果相近。

試驗(yàn)結(jié)果初步表明，布魯氏菌活疫苗（M5株）和口蹄疫O型、亞洲I型二價(jià)滅活疫苗對育肥羊同步進(jìn)行免疫，無相互干擾作用，完全可以達(dá)到預(yù)期的免疫效果，且同步免疫可加快免疫進(jìn)度，大大減輕防疫員的勞動(dòng)強(qiáng)度。

[1]李建玲，李愛巧，楊啟元，等. 烏魯木齊牛羊布魯氏菌疫苗免疫效果對比試驗(yàn)[J]. 中國動(dòng)物檢，2013，30（4）：47-49.

（責(zé)任編輯：朱迪國）

Immune Responses in Sheep after Simultaneous Immunization with Brucellosis Live Vaccine（M5）and Foot and Mouth Disease Inactivated Vaccine

He Yanchun1，Cao Liping2，Li Shengjing3，Zhang Yu3
（1. Zhangye Animal Disease Prevention and Control Center，Zhangye，Gansu 734000；2. Gansu Animal Disease Prevention and Control Center；Lanzhou，Gansu 730000；3. Linze Animal Disease Prevention and Control Center，Linze，Gansu 734200）

In order to investigate the immune responses in sheep after simultaneous vaccination with Brucellosis live vaccine and Foot and mouth disease（FMD）inactivated vaccine，50 fattening sheep were immunized with both the Brucellosis live vaccine（strain M5）and FMD divalent vaccine（type O and Asia I）. 30 days after immunization，the post-vaccination antibodies of the sheep were detected. Results showed that the positive rate of antibodies against Brucellosis was 100% according to the Rose Bengal plate agglutination test，indicating a strong positive reaction. In addition，the qualifi cation rates of antibodies against FMD of type O and Asia I were 78% and 80%，respectively. As a conclusion，these preliminary results demonstrated that a desired immune effect could be achieved by simultaneously immunizing sheep with Brucellosis live vaccine（strain M5）and FMD divalent vaccine（type O and Asia1）.

Brucellosis；Foot and mouth disease；immune effect；sheep

S852.4

：B

：1005-944X（2017）05-0099-03

10.3969/j.issn.1005-944X.2017.05.027

曹麗萍