高效液相色譜在食品防腐劑檢測(cè)中的應(yīng)用

陳延銘

摘 要：近些年以來，食品安全問題備受民眾關(guān)注，特別是食品添加劑問題更是尤為突出，食品添加劑以防腐劑最為常見，如何對(duì)防腐劑進(jìn)行有效的測(cè)定就成為研究食品防腐劑的關(guān)鍵，從而達(dá)到了研究防腐劑、認(rèn)識(shí)防腐劑的目的。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜 防腐劑 應(yīng)用

中圖分類號(hào)：TS207 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2017）03（a）-0071-02

從古至今，食品一直是人類不可或缺并賴以生存的基本物質(zhì)，人類既要從食品中獲取能量，又要從中獲得生長和生存所必須的碳水化合物、豐富的蛋白質(zhì)和脂肪類營養(yǎng)物質(zhì)。在食品長期的存放過程中，在外界微生物和有害生物的作用下，導(dǎo)致食品腐爛變質(zhì)。人們?cè)诔Ｄ甑慕?jīng)驗(yàn)和知識(shí)的積累中找到了很多防止食物變質(zhì)的方法，如低溫冷藏、干燥、隔絕空氣、射線輻射等方法來殺菌和抑菌。在生產(chǎn)生活中，人們更愿意用化學(xué)方法來殺菌和抑菌，也就是在食品中添加一定種類和一定計(jì)量的防腐劑，隨之而來的就產(chǎn)生了食品防腐劑的檢測(cè)和檢定問題。

常用的食品防腐劑主要有苯甲酸鈉和山梨酸鉀兩種，其原理是通過未解離分子及鹽類轉(zhuǎn)變成相應(yīng)的酸后起到抗菌的作用，所以，他們?cè)谒岫容^低的食品中效果最佳，在中性環(huán)境的食品中表現(xiàn)的較為欠佳，故稱這類防腐劑為酸性防腐劑，它們是目前市面上最常用和常見的防腐劑。山梨酸是一種不飽和脂肪酸，別名又叫B二烯酸，花楸酸，Sorbistat?；瘜W(xué)名稱：2，4-己二烯酸，分子式：C6H8O2，中文名稱：山梨酸、己二烯酸、清涼茶酸、2，4-己二烯酸、2-丙烯基丙烯酸，相對(duì)分子量或原子量：112.13，密度：1.204（19 ℃），熔點(diǎn)：132 ℃～135 ℃，沸點(diǎn)：228 ℃（分解），閃點(diǎn)：127 ℃，白色針狀或粉末狀晶體，有特臭。在乙醇中易溶，在乙醚中溶解，在水中極微溶解。從安全性方面來講，山梨酸是一種國際公認(rèn)安全（GRAS）的防腐劑，安全性很高，聯(lián)合國糧農(nóng)組織、世界衛(wèi)生組織、美國FDA都對(duì)其安全性給予了肯定，但如果食品中添加的山梨酸超標(biāo)嚴(yán)重，消費(fèi)者長期服用，在一定程度上會(huì)抑制骨骼生長，危害腎、肝臟的健康。苯甲酸又稱安息香酸（carboxybenzene）、苯酸（phenylformic acid）、苯蟻酸、benzoic acid，分子式：C7H6O2，分子量：122.121 4，結(jié)構(gòu)簡式：C6H5-COOH（苯環(huán)-COOH），鱗片狀或針狀結(jié)晶，具有苯或甲醛的臭味，服用過多會(huì)對(duì)人體肝臟產(chǎn)生危害，甚至致癌。

高效液相色譜是在20世紀(jì)60年代末期，從氣相色譜和經(jīng)典液相色譜的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的新型分離、分析技術(shù)。它采用了新型高壓輸液泵、高靈敏檢測(cè)器及高效微粒固定相，在分離速度、分離效能及檢測(cè)靈敏度和自動(dòng)化方面都達(dá)到了完美的程度，其方法特點(diǎn)有以下方面。

（1）分離效能高由新型高效的填出原料作為固定相，色譜柱的柱效可達(dá)每米30 000塊理論塔板數(shù)。

（2）在高效液相色譜中檢測(cè)靈敏度很高且最為廣泛使用的檢測(cè)器是紫外吸收檢測(cè)器，其最小的檢測(cè)量可達(dá)10-9 g。

（3）分析速度較快高效液相色譜采用了高壓泵，輸液的壓力可達(dá)40 MPa，是流動(dòng)相的流速大大加快，達(dá)到1～10 mL/min，做完一個(gè)樣品的時(shí)間大幅減少，僅需幾分鐘。

（4）分析樣品范圍較廣高效液相色譜的分析范圍較廣，還可以分析相似的旋光異構(gòu)體。

（5）流動(dòng)相的種類多高效液相色譜可選擇的流動(dòng)相較為廣泛并且便于制作。

我們用于檢測(cè)山梨酸鉀和苯甲酸鈉所用的高效液相色譜儀是由日本島津公司生產(chǎn)的型號(hào)為LC-2010A的一款帶自動(dòng)進(jìn)樣器的液相色譜，其特點(diǎn)是分析高效率，有效性確認(rèn)自動(dòng)化，它由脫氣單元、低壓梯度單元、泵單元、混合器、自動(dòng)進(jìn)樣器、柱溫箱以及UV-VIS檢測(cè)器構(gòu)成，使用標(biāo)準(zhǔn)化配置管構(gòu)成一體化裝置，提高了系統(tǒng)的可靠性，它幾乎沒有裝置間的差異，方法轉(zhuǎn)換簡便[1]。流量的準(zhǔn)確性、梯度濃度的準(zhǔn)確性以及幾乎不產(chǎn)生交叉污染的進(jìn)樣準(zhǔn)確性，使數(shù)據(jù)可靠性大幅提高。

山梨酸鉀和苯甲酸鈉的檢測(cè)如下。

（1）標(biāo)準(zhǔn)樣品的制備各取濃度為10 mg/mL的苯甲酸鈉和山梨酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mL定容至100 mL，配成濃度為0.1 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，混勻并過0.45 mm濾膜。

（2）流動(dòng)相的配制流動(dòng)相A稱取1.54 g乙酸銨溶于1 000 mL容量瓶，經(jīng)0.45 mm膜過濾。流動(dòng)相B甲醇（色譜純）過0.45膜。

（3）樣品的處理稱取4～5 g樣品定容至25 mL，固體樣品1～2 g粉碎浸泡過夜并搖勻，調(diào)pH值至中性，上離心機(jī)取上層澄清液體過0.45 mm濾膜，上機(jī)備用。

（4）高效液相色譜儀的檢測(cè)條件設(shè)定流速：1.0 mL/min，柱溫箱溫度：40 ℃，流動(dòng)相配比：流動(dòng)相A96%、流動(dòng)相B 4%，檢測(cè)器波長230 μm，進(jìn)樣量20 μL（見圖1）。

從圖1中可以清晰地看高效液相色譜儀對(duì)苯甲酸鈉和山梨酸鉀的分離效果非常明顯，并且在定量分析和定性分析上都能給予明確的指示。說明高效液相色譜儀在苯甲酸鈉和山梨酸鉀的分析中能起到辨別與定量的作用，給檢測(cè)分析人員予以幫助，在防腐劑檢測(cè)中可行有效。為了能使食品保持更長時(shí)間不變質(zhì)，大部分食品企業(yè)的產(chǎn)品都會(huì)加入這兩種常見的防腐劑，但防腐劑歸根結(jié)底都是藥品，有一定的不良反應(yīng)，對(duì)人體還是有傷害的。建立一系列的防腐劑檢測(cè)方法，對(duì)研究防腐劑有很重大的意義，也對(duì)食品行業(yè)監(jiān)管起到數(shù)據(jù)支撐。高效液相色譜法檢測(cè)防腐劑具有精度高，檢測(cè)方法簡便、快速的特點(diǎn)與優(yōu)勢(shì)，成為食品防腐劑檢測(cè)的常用方法。該次實(shí)驗(yàn)用高效液相色譜儀對(duì)山梨酸鉀、苯甲酸鈉進(jìn)行了準(zhǔn)確的檢測(cè)，對(duì)檢測(cè)食品種防腐劑技術(shù)提供了一定的幫助，足以滿足實(shí)際工作與生活的需要。

參考文獻(xiàn)

[1] 劉珍.化驗(yàn)員讀本下冊(cè)：儀器分析[M].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2003.