腦梗死血漿正五聚蛋白3的動態(tài)改變及與頸動脈不穩(wěn)定斑塊的關(guān)系

李巧思畢國榮張曉天黃瑞

·論 著·

腦梗死血漿正五聚蛋白3的動態(tài)改變及與頸動脈不穩(wěn)定斑塊的關(guān)系

李巧思*畢國榮*張曉天*黃瑞*

目的 研究急性缺血性腦卒中與血漿正五聚蛋白3（pentraxin 3,PTX3）水平的關(guān)系，并探索血漿PTX3水平與頸動脈粥樣硬化的關(guān)系。方法 納入急性缺血性腦卒中患者共103例，對照組患者83例。應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測所有患者入院時的血漿PTX3水平，以及急性缺血性腦卒中患者規(guī)律治療第7天的血漿PTX3水平。對急性缺血性腦卒中患者進(jìn)行頸部多普勒血管超聲檢查，根據(jù)頸動脈斑塊穩(wěn)定性將患者分為兩組。研究血漿PTX3水平與急性缺血性腦卒中及頸部斑塊穩(wěn)定性之間的關(guān)系。結(jié)果 ①急性缺血性腦卒中組的血漿PTX3水平明顯高于對照組（P＜0.05），經(jīng)規(guī)律治療7 d后，恢復(fù)期的血漿PTX3水平明顯低于急性期（P＜0.05），但仍高于對照組（P＜0.05）。經(jīng)多因素Logistic回歸后提示血漿PTX3水平與急性缺血性腦卒中密切相關(guān)（OR=15.043，95%CI：3.46～65.45，P＜0.001）。②急性缺血性腦卒中組中，不穩(wěn)定斑塊組急性期和恢復(fù)期的血漿PTX3水平均高于無斑塊與穩(wěn)定斑塊組（P＜0.05）。結(jié)論 急性缺血性腦卒中患者具有較高的血漿PTX3水平，伴有頸動脈不穩(wěn)定斑塊的急性缺血性腦卒中患者血漿PTX3水平更高。血漿PTX3水平與急性缺血性腦卒中密切相關(guān)。

正五聚蛋白3 腦卒中 頸動脈粥樣硬化

腦卒中是高致死率、高致殘率的疾病[1]。出于這個原因，對疾病嚴(yán)重程度的評估和早期對危險因素的評估顯得至關(guān)重要[2]。動脈粥樣硬化是缺血性腦卒中的主要病因[3]，而炎癥在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程中起到重要作用。已經(jīng)提出一些炎性因子，如正五聚蛋白3（pentraxin 3，PTX3）、脂肪酶、高敏C反應(yīng)蛋白（high-sensitivity c-reactive protein，hs-CRP），可以作為腦卒中預(yù)測的指標(biāo)之一[4]。很多研究人員發(fā)現(xiàn)PTX3作為一種炎癥因子，在動脈粥樣硬化和心血管病中起到重要作用，并不斷探索其中的發(fā)病機(jī)制。高水平的PTX3與心血管疾病的發(fā)病率增加和死亡率增加都有關(guān)[5-9]。近幾年已經(jīng)有一些基礎(chǔ)實驗表明，PTX3在腦缺血后起到重要的作用[10-13]。然而，PTX3與缺血性腦卒中之間的臨床研究甚少，本文旨在明確急性缺血性腦卒中和頸動脈粥樣硬化與血漿正五聚蛋白3水平的關(guān)系。

1 對象及方法

1.1 研究對象 收集2015年12月至2016年5月于中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科住院的急性缺血性腦卒中的患者作為病例組，選擇同期入院的非腦梗死患者作為對照組。病例組的納入標(biāo)準(zhǔn)：病例均符合中國急性缺血性腦卒中診治指南2014[14]；②均在癥狀發(fā)生后3 d內(nèi)完善頭部磁共振序列平掃、彌散加權(quán)成像，及頸動脈多普勒超聲；③年齡均大于18歲且小于90歲，且發(fā)病后在急性期與恢復(fù)期兩次靜脈采取血樣。病例組的排除標(biāo)準(zhǔn)如下：①既往有過的腦卒中病史；②發(fā)病7天內(nèi)有出血性轉(zhuǎn)化；③冠心?。ㄐ慕g痛、心肌梗死）病史；心衰；嚴(yán)重的肝腎功能不全；嚴(yán)重感染及慢性炎癥性疾?。荒[瘤；結(jié)締組織病等自身免疫性疾??；④近期使用過炎癥抑制藥物；⑤近期外傷手術(shù)史。對照組的納入標(biāo)準(zhǔn)：①既往無癥狀性腦梗死，本次入院無新發(fā)急性腦梗死；②年齡均大于18歲且小于90歲，入院后次日內(nèi)接受靜脈采取血樣。對照組的排除標(biāo)準(zhǔn)：①冠心?。ㄐ慕g痛、心肌梗死）病史；心衰；嚴(yán)重的肝腎功能不全；嚴(yán)重感染及慢性炎癥性疾??；腫瘤；結(jié)締組織病等自身免疫性疾??；②近期使用過炎癥抑制藥物；③近期外傷手術(shù)史。最終，病例組納入103例，男性72例，女性31例，平均年齡（63.8±12.1）歲；對照組納入83例，男性28例，女性55例，平均年齡（64.2±11.1）歲。本實驗已取得盛京醫(yī)院倫理委員會同意并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 一般資料收集 全面收集患者各項臨床資料、各項實驗室指標(biāo)及輔助檢查。一般資料包括：年齡、性別、高血壓病史、糖尿病病史、吸煙史。實驗室指標(biāo)包括：低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、甘油三脂、總膽固醇、空腹血糖、白細(xì)胞計數(shù)、血小板計數(shù)、纖維蛋白原、同型半胱氨酸及尿酸等；輔助檢查包括：頭磁共振成像及彌散成像、頸動脈多普勒超聲。實驗室指標(biāo)均在入院次日清晨空腹收集，影像學(xué)于入院后72 h內(nèi)完成。

1.2.2 標(biāo)本收集及PTX3水平檢測 每例患者均在入院后第2天清晨，及急性缺血性腦卒中患者規(guī)律治療第7天的清晨，空腹平臥位采靜脈血3 mL，置于EDTA抗凝管中混勻，以3000 r/min離心15 min，取上層清液后儲存于-80℃冰箱保存待測。采用武漢優(yōu)爾生公司試劑，以免疫吸附法（ELISA）檢測，所有操作步驟均按照說明書進(jìn)行。

1.2.3 頸動脈超聲檢查 入院后72 h內(nèi)，使用彩色多普勒超聲儀對患者進(jìn)行檢查。報告分為無斑塊、弱回聲斑塊、強回聲斑塊及混合回聲斑塊，將強回聲斑塊歸為穩(wěn)定斑塊，弱回聲及混合回聲斑塊歸為不穩(wěn)定斑塊。

1.2.4 統(tǒng)計學(xué)方法 統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS21.0軟件，正態(tài)分布的計量資料以（±s）表示，兩兩比較采用獨立樣本t檢驗；非正態(tài)分布的計量資料以中位數(shù)（四分位間距）表示，采用秩和檢驗。計數(shù)資料以陽性例數(shù)、構(gòu)成比表示，采用χ2檢驗。多因素分析采用Logistic回歸分析，以比值比（OR）值及95%置信區(qū)間（95%CI）估計各因素的危險度，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 病例組與對照組分析 本實驗中，病例組與對照組相比，病例組中低密度脂蛋白（low-density lipoprotein,LDL）、高密度脂蛋白（high-density lipoprotein,HDL）、總膽固醇（total cholesterol,TC）、白細(xì)胞計數(shù)（white blood count,WBC）、空腹血糖（fasting plasma glucose,FPG）、同型半胱氨酸、急性期血漿PTX3水平、恢復(fù)期血漿PTX3水平、男性比例、高血壓比例及吸煙比例均高于對照組（P＜0.05），上述結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。而兩組中年齡、纖維蛋白原（plasma fibrinogen,FIB）、尿酸、甘油三酯（triglyceride,TG）、血小板計數(shù)及糖尿病比例的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）（表1）。病例組患者恢復(fù)期的血漿PTX3水平（9.78±2.63 ng/mL）明顯低于急性期（12.74±3.15 ng/mL）（P＜0.001），但病例組患者恢復(fù)期的血漿PTX3水平（9.78± 2.63 ng/mL）仍高于對照組（6.68±1.25 ng/mL）（P＜0.001）。以急性缺血性腦卒中發(fā)生為因變量，急性期血漿PTX3水平為自變量，調(diào)整可能存在的混雜因素，經(jīng)多因素Logistic回歸顯示，急性期血漿PTX3水平與急性缺血性腦卒中發(fā)生的密切相關(guān)（P＜0.001）（表2）。

2.2 頸部超聲結(jié)果與血漿PTX3水平的關(guān)系 根據(jù)頸動脈超聲多普勒檢查結(jié)果，將病例組患者分為兩組：無斑塊患者23例（22.3%）與穩(wěn)定斑塊患者17例（16.5%）合并為一組，以及不穩(wěn)定斑塊組63例（61.2%）。無斑塊患者與穩(wěn)定斑塊患者急性期血漿 PTX3水平 [（11.01±2.90 ng/mL） vs. （11.32±2.28 ng/mL）]和恢復(fù)期血漿PTX3水平[（8.56±2.60 ng/mL）vs.（9.04±1.92 ng/mL）]都無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.1），但無斑塊患者與穩(wěn)定斑塊患者急性期和恢復(fù)期的血漿PTX3水平都顯著低于不穩(wěn)定斑塊患者（P＜0.05）（表3）。

3 討論

在很多國家，缺血性腦卒中是導(dǎo)致死亡的主要病因之一，在發(fā)病的第1年內(nèi)，死亡率為21%~ 27%，而15%~30%的人會留下明顯的殘疾[1]。腦缺血可引起神經(jīng)細(xì)胞壞死及氧自由基產(chǎn)生，觸發(fā)一系列缺血所致的炎性級聯(lián)反應(yīng)，促進(jìn)炎性細(xì)胞因子、趨化因子及粘附因子等釋放。很多研究都表明炎癥在缺血性腦卒中的發(fā)生發(fā)展中起到重要的作用[15]。PTX3是與炎癥反應(yīng)相關(guān)的炎性指標(biāo)之一，它與hs-CRP同屬于Pentraxin家族。hs-CRP主要由促炎因子白細(xì)胞介素-6（IL-6）刺激肝細(xì)胞產(chǎn)生[16]，而PTX3由促炎因子如白細(xì)胞介素-1（IL-1）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）、氧化的低密度脂蛋白及某些細(xì)菌成分[16-17]，刺激巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞及血管平滑肌細(xì)胞等產(chǎn)生，所以PTX3的釋放可以看作成對于血管損傷后一個特殊的反應(yīng)，暗示著PTX3與其他炎性分子（如hs-CRP）相比，可能在動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展過程中會提供一些更明確的信息[5]。PTX3作為一種急性期的炎癥標(biāo)記物，能迅速反應(yīng)局部組織的炎癥及損傷程度[18]。

表1 病例組與對照組一般資料比較

表2 急性缺血性腦卒中危險因素的Logistic多元回歸分析

表3 病例組頸部超聲結(jié)果與血漿PTX3水平的關(guān)系

在一項臨床研究中，SEZER等[19]將急性缺血性腦卒中患者與對照組患者的血漿PTX3水平作比較，他們發(fā)現(xiàn)急性缺血性腦卒中患者的血漿PTX3水平明顯高于對照組，且與腦卒中的嚴(yán)重程度相關(guān)。評估PTX3水平與缺血性腦卒中患者預(yù)后的關(guān)系時，RYU等[20]發(fā)現(xiàn)腦卒中患者的PTX3水平增高，且在死亡患者中更高，PTX3水平可以作為急性缺血性腦卒中患者長期預(yù)后的獨立危險因素。本研究中發(fā)現(xiàn)急性缺血性腦卒中患者的血漿PTX3水平明顯高于對照組，且具有統(tǒng)計學(xué)意義，與既往研究結(jié)果一致。且本實驗中還得出，經(jīng)規(guī)律治療7 d后，病例組恢復(fù)期的血漿PTX3水平明顯低于急性期水平，但明顯高于對照組，且均具有統(tǒng)計學(xué)意義。其具體機(jī)制仍然不明，可能為急性期炎癥反應(yīng)較重，經(jīng)規(guī)律治療后，斑塊趨于穩(wěn)定或炎癥較急性期有所減輕，血漿PTX3水平下降。血漿PTX3是否有助于區(qū)別腦卒中患者與非腦卒中患者，還需大量臨床試驗進(jìn)行探索。

炎癥反應(yīng)參與動脈粥樣硬化整個發(fā)生發(fā)展過程，炎癥因子PTX3在動物模型和人的動脈粥樣硬化斑塊中均呈高表達(dá)[21-22]。INOUE等[9]的實驗中發(fā)現(xiàn)PTX3濃度可以反映斑塊的不穩(wěn)定性。劉華等[23]在動物模型中發(fā)現(xiàn)動脈粥樣硬化斑塊中PTX3 mRNA和蛋白的表達(dá)量更高，說明PTX3是參與動脈粥樣硬化發(fā)生和發(fā)展的重要炎癥因子之一。本實驗中發(fā)現(xiàn)，急性缺血性腦卒中患者頸動脈無斑塊組與穩(wěn)定斑塊組的血漿PTX3水平相比較后未見明顯差異，但二者水平顯著低于不穩(wěn)定斑塊組。將無斑塊組和穩(wěn)定斑塊組合并為一組后，無論急性期還是恢復(fù)期的血漿PTX3水平都明顯高于不穩(wěn)定斑塊組，其結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義。PTX3可能影響動脈粥樣硬化，與斑塊的穩(wěn)定性相關(guān)，具體的機(jī)制還需要更多實驗來研究。

本實驗也有一定的局限性：首先，由于兩次采血，我們不能獲得所有缺血性腦卒中患者的血液樣本，及各種臨床及生化信息的缺乏，不能納入所有患者，導(dǎo)致選擇性偏倚；此外，本實驗樣本量較少，組與組之間病例個數(shù)分布不均勻，且性別構(gòu)成比存在差異；最后，本實驗未能監(jiān)測hs-CRP水平變化，無法與PTX3水平相比較，也未能收集其他炎癥標(biāo)記物的水平，如IL-1、TNF-α。

本實驗提示急性缺血性腦卒中患者血漿PTX3水平較高，且伴有頸動脈不穩(wěn)定斑塊者具有更高的血漿PTX3水平。血漿PTX3水平與急性缺血性腦卒中密切相關(guān)。急性缺血性腦卒中急性期炎癥反應(yīng)較明顯，治療炎癥反應(yīng)，可能成為改善動脈粥樣硬化的一個新興目標(biāo)。PTX3作為一個新型炎癥標(biāo)記物，有助于對急性缺血性腦卒中患者進(jìn)行分層。仍需要大量的臨床試驗及基礎(chǔ)試驗進(jìn)一步研究，PTX3在急性缺血性腦卒中起到的作用，從而指導(dǎo)治療，改善預(yù)后。

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The dynamic change of plasma Pentraxin 3 levels in Acute Ischemic Stroke and its association with theCarotid Artery Atherosclerosis unstable plaques.

LI Qiaosi,BI Guorong,ZHANG Xiaotian,HUANG Rui.Department of Neurology,Sheng Jing Hospital Affiliated to China Medical University,Shenyang 110000,China.Tel:024-96615.

Objective The aim of this study was to examine the association between plasma Pentraxin 3(PTX3) levels with acute ischemic stroke and carotid artery atherosclerosis.Methods We enrolled 103 patients with acute ischemic stroke(AIS)and 83 control subjects.The levels of plasma PTX3 were measured by using Enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)at admission and after 7 days treatment in the AIS group.The carotid artery plaques in the AIS group were detected by using Color Doppler Ultrasound.Patients with AIS were divided into two groups according to the stability of carotid artery atherosclerosis plaques.The association between plasma PTX3 levels with acute ischemic stroke and the stability of carotid artery atherosclerosis plaques was examined.Results① The plasma PTX3 levels were significantly higher in the AIS group than in the control group(P＜0.05).After 7 days standard treatment,the plasma PTX3 levels in AIS group were significantly decreased(P＜0.05),but still higher than those in control group(P＜0.05).Multivariable logistic regression suggested that the plasma PTX3 levels had a close relationship with AIS (OR=15.043,95%CI:3.46～65.45,P＜0.001).② In the AIS group,the plasma PTX3 levels before and after treatment were significantly higher in unstable plaque group than in no plaque and stable plaque group(P<0.05).Conclusion The plasma PTX3 levels are higher in patients with acute ischemic stroke.The plasma PTX3 levels are signif-icantly higher in AIS group with unstable plaque.The plasma PTX3 levels are closely associated with acute ischemic stroke.

Pentraxin 3 Stroke Carotid artery atherosclerosis

R743.3

A

2016-08-18）

（責(zé)任編輯：李立）

10.3969/j.issn.1002-0152.2017.03.001

* 中國醫(yī)科大學(xué)附屬盛京醫(yī)院(沈陽110000)

通信作者（E-mail:bigr@sj-hospital.org）