溫穎婉 陳鈺婷 鐘柳芳

中藥材黑棗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

溫穎婉 陳鈺婷 鐘柳芳

目的建立黑棗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。方法參考2015年版《中國藥典》，制訂中藥材黑棗質(zhì)量控制方法，包括性狀鑒別、顯微鑒別、薄層色譜鑒別和總灰分檢查。結(jié)果薄層色譜斑點(diǎn)清晰，專屬性強(qiáng)，適應(yīng)性好；總灰分測(cè)定平均值為1.6%，初步擬定為不超過2.0%。結(jié)論該研究制定的方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好，可有效控制黑棗的質(zhì)量。

黑棗；中藥材；質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

黑棗又稱熏棗、紫晶棗、馬牙棗、狗頭棗[1]，來源于鼠李科植物棗。大棗又名紅棗、干棗、棗子，起源于中國，在中國已有八千多年的種植歷史，自古以來就被列為“五果”（桃、李、梅、杏、棗）之一。大棗富含多種有機(jī)成分、無機(jī)成分及微量元素，微量元素中維生素C含量在“五果”中位居第一，素有維生素王之美稱[2]。而黑棗，為選用熟鮮大棗，經(jīng)水煮、窯熏、陰涼等工藝加工而成，含氨基酸、蛋白質(zhì)、膳食纖維、總糖、黃酮、胡蘿卜素等人體所需元素，具有補(bǔ)中益氣、養(yǎng)血安神作用，用于脾虛食少，具有健脾養(yǎng)胃、滋補(bǔ)肝腎、潤(rùn)燥生津的功效。經(jīng)現(xiàn)代研究發(fā)現(xiàn)，多樣成分的大棗具有多種藥理活性，主要集中于延緩衰老、抗氧化、抗腫瘤、保肝護(hù)肝、降血脂等方面，其主要活性物質(zhì)是大棗多糖。國內(nèi)學(xué)者認(rèn)為大棗補(bǔ)氣生血的基礎(chǔ)是大棗多糖，多糖不僅是能量基礎(chǔ)同時(shí)能激活體內(nèi)免疫細(xì)胞[3]。除多糖外，從大棗中分離得到的三萜酸類物質(zhì)具有抑制癌細(xì)胞增長(zhǎng)活性，且具有一定選擇性，尤其對(duì)乳腺癌細(xì)胞選擇性更高，大棗三萜酸類物質(zhì)已成為抗腫瘤治療的研究熱點(diǎn)。另外，大棗中的環(huán)磷酸腺苷（Cyclic Adenosine monophosphate,cAMP）含量比其他果類均高，而cAMP作為人體內(nèi)第2信使具有放大激素傳導(dǎo)和直接控制遺傳信息作用，主要功能為舒張平滑肌、激活蛋白質(zhì)、擴(kuò)張毛細(xì)血管等，對(duì)多種疾病具有顯著療效，如心臟相關(guān)疾病休克、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病、心肌梗死等，此外對(duì)頑固性牛皮癬也有一定療效。

黑棗作為廣東地區(qū)常用中藥材，又稱為“烏棗”或“熏棗”；大棗廣東習(xí)稱“紅棗”，一般不作配方用，只作果品或煲湯料”；第3種廣東稱為“南棗”，為經(jīng)干燥烘培炮制而成的棗，民間多當(dāng)作茶葉使用或作為藥酒浸泡藥材。同一大棗經(jīng) 3種不同炮制方法，形態(tài)和作用均有改變，有別于蒙藥中廣棗（來源漆樹科）[4]。近年來，北方市場(chǎng)出現(xiàn)一種“黑棗”食品，其來源是落葉喬木柿屬柿科的君遷子，《本草綱目》稱之為軟棗[5]，與廣東地區(qū)常用中藥材黑棗有顯著差別。黑棗作為地方民間用藥研究甚少，尤其對(duì)于其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，缺少相關(guān)科學(xué)文獻(xiàn)，與《藥典》收載的品種同名異物，引起混名混用。為了規(guī)范臨床用藥名稱和確保質(zhì)量，本研究制定黑棗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為其臨床應(yīng)用及開發(fā)提供理論依據(jù)，以保證臨床用藥的安全有效。

1 材料與儀器

1.1 材料普通硅膠G預(yù)制板（煙臺(tái)化學(xué)工業(yè)研究所，批號(hào)：100422；青島海洋化工廠分廠，批號(hào)：20080515；德國 Merck默克公司，批號(hào)：HX42524826）；所用化學(xué)試劑均為分析純；齊墩果酸和白樺脂酸對(duì)照品均購自中國食品藥品檢定研究院，批號(hào)分別為110709-201206、111802-201001；黑棗對(duì)照藥材由康美藥業(yè)股份有限公司提供，經(jīng)廣東省食品藥品檢驗(yàn)所鑒定；黑棗供試品 5批自行收集（經(jīng)鑒定），自編號(hào)為1-5。

1.2 儀器十萬分之一電子天平（島津AUW120D）；生物顯微鏡（奧林巴斯 BX43）；高頻數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司，型號(hào)：KQ-500TDB）；研磨機(jī)（IKA A11 BS25）；四用紫外分析儀（上海嘉鵬科技有限公司，型號(hào)：ZF-8）。

2 方法與結(jié)果

2.1 鑒別

2.1.1 性狀鑒別 本品長(zhǎng)1.5～3.0 cm，直徑0.5～2.0 cm，呈類橢圓干癟狀，整顆果實(shí)表面有皺褶呈紫黑色，表面光澤，果皮輕薄，肉質(zhì)呈黑褐色，油潤(rùn)而柔軟，氣香而味甜，糖分豐富；果核呈類紡捶形狀，呈褐色，質(zhì)地硬。實(shí)物見圖1。

圖1 黑棗性狀圖

2.1.2 顯微鑒別 黑棗研磨成粉末后呈黑褐色，顯微下觀察外果皮有多種形狀，主要以方形居多，具有厚實(shí)角質(zhì)層，細(xì)胞內(nèi)充滿棕紅色物質(zhì)；內(nèi)皮細(xì)胞呈長(zhǎng)方形、多邊形，細(xì)胞壁層較厚呈黃棕色或黃色，充斥草酸鈣簇晶和方晶；果核細(xì)胞多邊形居多，細(xì)胞內(nèi)充滿淺黃色或棕黃色物質(zhì)，細(xì)胞各層之間明顯，致密排列。見圖2。

圖2 黑棗粉末顯微特征1. 表皮細(xì)胞 2. 表皮下細(xì)胞 3. 草酸鈣簇晶4. 果核石細(xì)胞 5. 草酸鈣砂晶 6. 草酸鈣方晶

2.1.3 薄層色譜鑒別 本品為大棗加工炮制品，含齊墩果酸、白樺脂酸、氨基酸、蛋白質(zhì)、膳食纖維、總糖、黃胴、胡蘿卜素等化學(xué)成分[6]，故參照《中國藥典》2015年版中大棗檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)[7]，選定齊墩果酸與白樺脂酸建立相應(yīng)薄層色譜鑒別方法。稱取本品2.0 g置于25 ml錐形瓶中，量取高沸點(diǎn)石油醚10 ml浸泡，時(shí)間10 min之后超聲處理10 min，抽濾瓶過濾，濾餅晾干后置于25 ml錐形瓶中，量取乙醚20 ml浸泡60 min之后超聲處理15 min，抽濾瓶過濾，收集濾液濃縮至 1 ml，濃縮液放置冰箱作為供試品保存?zhèn)溆谩Ａ砣∫环莺跅棇?duì)照藥材粉末2.0 g，處理方法同供試品，得到對(duì)照品溶液。分別稱取齊墩果酸對(duì)照品和白樺脂酸對(duì)照品5.0 mg，分別用5 ml乙醇溶解，制備成濃度為1 mg/ml對(duì)照品溶液備用。依照2015年版《中華人民共和國藥典》中薄層色譜法通則，采用甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（14:4:0.5）為展開劑，采用點(diǎn)樣針吸取10 μl供試品溶液、10 μl對(duì)照藥材溶液、3 μ1對(duì)照品溶液點(diǎn)樣于預(yù)制硅膠G板上，放入展開缸中進(jìn)行飽和并展開，之后取出晾干，噴灑 10%硫酸乙醇溶液進(jìn)行顯色，加熱處理薄層板，在365 nm紫外燈下進(jìn)行檢視。結(jié)果顯示，與對(duì)照藥材、對(duì)照品比較，供試品藥材具有相同顏色斑點(diǎn)。薄層圖譜見圖3。

2.1.3.1 不同薄層板比較 選取不同品牌硅膠預(yù)制薄層板，分別按擬定試驗(yàn)方法試驗(yàn)。結(jié)果表明，3種薄層板均能達(dá)到鑒別要求，其中默克硅膠預(yù)制薄層板斑點(diǎn)相對(duì)清晰，分離度較好，色譜效果更佳，見圖4-6。

2.1.3.2 不同溫度比較 取點(diǎn)樣后的薄層板，分別在低溫9 ℃和常溫24 ℃環(huán)境下進(jìn)行展開。結(jié)果表明，該方法對(duì)不同溫度的適應(yīng)性均較好，見圖7、8。

圖4 煙臺(tái)硅膠C預(yù)制板1. 齊墩果酸對(duì)照品 2. 白樺脂酸對(duì)照品 3.黑棗對(duì)照藥材4-8. 供試品（編號(hào)1-5）

圖5 青島硅膠C預(yù)制板1. 齊墩果酸對(duì)照品 2. 白樺脂酸對(duì)照品 3.黑棗對(duì)照藥材4-8. 供試品（編號(hào)1-5）

圖6 默克硅膠C預(yù)制板1. 齊墩果酸對(duì)照品 2. 白樺脂酸對(duì)照品 3.黑棗對(duì)照藥材4-8. 供試品（編號(hào)1-5）

圖7 低溫（9 ℃）的展開效果1. 齊墩果酸對(duì)照品 2. 白樺脂酸對(duì)照品 3.黑棗對(duì)照藥材4-8. 供試品（編號(hào)1-5）

圖8 常溫（24 ℃）的展開效果1. 齊墩果酸對(duì)照品 2. 白樺脂酸對(duì)照品 3.黑棗對(duì)照藥材4-8. 供試品（編號(hào)1-5）

2.1.3.3 不同濕度比較 取點(diǎn)樣后的薄層板，分別在32%和88%濕度中展開。結(jié)果表明該方法對(duì)不同濕度環(huán)境適應(yīng)性均較好，見圖9、10。

圖10 高濕（88%） 展開結(jié)果

圖9 低濕（32%）展開結(jié)果

2.2 檢查 按照灰分測(cè)定法（《中國藥典》2015年版通則2302）測(cè)定。實(shí)測(cè)樣品5批，結(jié)果為1.5%～1.6%，平均值 1.6%。以平均值的 120%為限，規(guī)定本品總灰分不得超過2.0%。測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 總灰分測(cè)定結(jié)果

3 討論

根據(jù)方法學(xué)考察結(jié)果，薄層色譜鑒別方法適應(yīng)性強(qiáng)，色譜斑點(diǎn)清晰，專屬性強(qiáng)。該研究中還對(duì)黑棗的水分和浸出物進(jìn)行限度測(cè)定，由于黑棗為肉質(zhì)，糖分較高具黏性，粉碎困難，顆粒大小（粉末粗細(xì)）對(duì)干燥時(shí)長(zhǎng)、水分結(jié)果具有明顯影響，難以恒重，操作不便，而浸出物檢查則需要以扣除水分后的干燥品為計(jì)算基準(zhǔn)。參考《中國藥典》2015年版1部大棗的檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)，沒有收載水分和浸出物檢查項(xiàng)。綜上，只把總灰分檢查納入黑棗的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢查項(xiàng)目中。

本實(shí)驗(yàn)參照藥典制定的黑棗質(zhì)量控制方法，包括性狀鑒別、顯微鑒別、薄層色譜鑒別和總灰分檢查，總灰分測(cè)定平均值為1.6%，初步擬定為不超過2.0%。該研究制訂的方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，重現(xiàn)性好，可有效控制黑棗質(zhì)量，為臨床安全有效使用提供依據(jù)。

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Study on Quality Standard of Fumabat jujubae fructus

Wen Yingwan Chen Yuting Zhong Liufang

ObjectiveTo establish the quality standard of Fumabat jujubae fructusMethodsAccording to the methods in Chinese Pharmacopeia 2015,the quality standard including characteristic identification,microscopic identification,TLC identification and determination of total ash has been identified.ResultsClear spots appeared in TLC had strong specificity and good adaptability. It was initially proposed that Determination of total ash was not more than 2.0% with an average value of 1.6%.ConclusionsThe methods are simple,reliable and reproducible.The quality of medicinal materials can be effectively controlled.

Fumabat jujubae fructus;Traditional Chinese medicinal materials;Quality Standard

10.12010/j.issn.1673-5846.2017.05.008

廣州市番禺區(qū)食品藥品檢驗(yàn)所，廣東廣州 511400

溫穎婉（1983-），主管中藥師。研究方向：藥品檢驗(yàn)及實(shí)驗(yàn)室管理