肖翠娥+彭鵬++胡時均
摘 要:為分析A、B、C 3個廠家O型口蹄疫合成肽苗的免疫效果,將80頭蘇太雜交仔豬隨機(jī)分成4組,I組為空白對照,II~I(xiàn)V組按廠家推薦劑量分別肌肉注射3種不同的O型口蹄疫合成肽苗,每組編號為1~10的供試豬45日齡免疫一次,編號為11~20的供試豬45日齡和73日齡分別免疫一次。結(jié)果表明,3個廠家合成肽苗免疫副反應(yīng)均較小;3種合成肽苗抗體合格率二免較一免均無顯著差異(P>0.05),但B、C廠家合成肽苗可使機(jī)體在短時間內(nèi)獲得較高水平的抗體滴度,且維持時間較長。
關(guān)鍵詞:豬;O型口蹄疫;合成肽苗;抗體
中圖分類號 S858.28 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 A 文章編號 1007-7731(2017)10-0133-02
豬口蹄疫是目前危害養(yǎng)豬業(yè)較為嚴(yán)重的一種烈性傳染病。近年來,我國口蹄疫推行強(qiáng)制免疫制度,但由于免疫效果并不理想,應(yīng)激反應(yīng)大,導(dǎo)致重復(fù)加強(qiáng)免疫,工作量大,養(yǎng)殖戶積極性不高,使得推行口蹄疫免疫遇到了一定困難。為此,本研究對當(dāng)?shù)仞B(yǎng)殖戶常用的O型口蹄疫合成肽苗進(jìn)行免疫效果評估,以期從中篩選出一種或多種免疫副反應(yīng)小、免疫抗體效價高的疫苗,為O型口蹄疫防控提供科學(xué)指導(dǎo)。
1 材料與方法
1.1 材料 A廠家豬O型口蹄疫合成肽苗、B廠家豬O型口蹄疫合成肽苗、C廠家豬O型口蹄疫合成肽苗。VP1結(jié)構(gòu)蛋白抗體ELISA檢測試劑盒(上海優(yōu)耐特,批號:201604001)、口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白3ABC抗體檢測試劑盒(蘭州獸醫(yī)研究所,批號:2016012031)。注射器、保定繩索、采血管、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、單多道移液器、80頭蘇太雜交仔豬。
1.2 方法
1.2.1 供試豬分組 80頭仔豬隨機(jī)分成4組,每組20頭,組編號分別為I、II、III、IV。所有供試豬統(tǒng)一飼養(yǎng)管理,禁用免疫抑制和免疫增強(qiáng)類藥物。
1.2.2 供試豬免疫 為減少免疫抑制對實驗的干擾,所有供試豬28日齡免疫高致病性豬藍(lán)耳病疫苗,35日齡免疫豬圓環(huán)病毒疫苗。I組為空白對照,II~I(xiàn)V組按廠家推薦劑量分別肌肉注射3種不同的O型口蹄疫合成肽苗,每組編號為1~10的供試豬免疫1次(45日齡免疫一次,簡稱一免),編號為11~20的供試豬免疫2次(45日齡首免,73日齡再次免疫,簡稱二免)。
1.2.3 供試豬的抗體效價檢測 45日齡、73日齡、101日齡、129日齡、157日齡分別采血。先用口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測試劑盒對血樣進(jìn)行檢測,如口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白抗體檢測呈陽性,則說明該供試豬已感染口蹄疫,該血樣予以排除,然后用相應(yīng)試劑盒檢測陰性血樣的抗體效價。供試豬免疫O型口蹄疫合成肽苗后7d內(nèi)連續(xù)觀察豬只出現(xiàn)的不良反應(yīng)。
2 結(jié)果與分析
2.1 不同廠家O型口蹄疫合成肽苗免疫副反應(yīng)情況 由表1可知,B廠家合成肽苗對豬只未產(chǎn)生副反應(yīng),A、C廠家合成肽苗雖對豬只產(chǎn)生副反應(yīng)(10.00%、13.33%),但與B廠家合成肽苗無顯著差異(P>0.05)。從一免和二免來看,C廠家合成肽苗二免較一免的副反應(yīng)率顯著升高(P<0.05),其他廠家合成肽苗一免和二免的副反應(yīng)率無顯著(表1)。
2.2 不同廠家O型口蹄疫合成肽苗免疫抗體檢測情況 45日齡抗體檢測結(jié)果顯示,供試豬均存在一定滴度的母源抗體,除B廠家合成肽苗二免實驗組的母源抗體平均滴度略高于陽性臨界值,其他各組均低于陽性臨界值。從一免來看,A、B、C三廠家合成肽苗抗體平均滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢,并于157日齡達(dá)到峰值(表2)。B、C兩廠家合成肽苗一免后各階段抗體合率均維持在80%以上,A廠家合成肽苗一免后抗體滴度雖呈增長趨勢,但73日齡抗體合格率僅50%,直到101日齡抗體合格率才達(dá)到 90%,那么45~101日齡期間可能存在免疫保護(hù)率不高的問題。從二免來看,A、B、C三廠家合成肽苗抗體平均滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢,并于157日齡達(dá)到峰值。3種合成肽苗二免較一免抗體平均滴度均有所升高,其中A、B兩廠家合成肽苗二免較一免抗體平均滴度顯著升高(P<0.05),但3種合成肽苗抗體合格率二免較一免均無顯著差異(P>0.05)。
3 討論
試驗過程中,A、C兩廠家合成肽苗對少數(shù)供試豬產(chǎn)生了諸如短時間發(fā)熱和減料等輕微副反應(yīng)[1],但副反應(yīng)均在短時間內(nèi)消除,且三廠家合成肽苗副反應(yīng)率無顯著差異,這說明3種合成肽苗用于豬口蹄疫預(yù)防免疫是相對安全、穩(wěn)定的。
三廠家合成肽苗在一免或二免后,抗體滴度均隨供試豬日齡呈增長態(tài)勢,B、C兩廠家合成肽苗一免和二免兩種免疫程序均能達(dá)到較為理想的免疫效果,但從經(jīng)濟(jì)和勞動強(qiáng)度角度出發(fā),進(jìn)行一免即可。A廠家合成肽苗雖101日齡以后能達(dá)到較高的抗體滴度和抗體合格率,但前期抗體平均滴度和抗體合格率均不高,存在感染O型口蹄疫病毒的風(fēng)險。
試驗過程中,筆者發(fā)現(xiàn)無論是一免或二免后,抗體滴度隨供試豬日齡呈緩慢增長,直至整個試驗結(jié)束,這似乎不符合抗體動態(tài)變化的規(guī)律[2],可能原因,一是母源抗體的影響,但許多研究已表明,母源抗體的半衰期為20d左右,而本實驗45日齡開始接種,同時檢測結(jié)果也表明供試豬45日齡的母源抗體水平都不是很高;另一個原因可能是供試豬患有免疫抑制性疫病,影響了機(jī)體的免疫應(yīng)答,個別疫苗的效果不佳可能與此有關(guān)。
參考文獻(xiàn)
[1]朱玉華,陳亮.生豬注射口蹄疫滅火苗引起免疫應(yīng)激的防治[J].安徽農(nóng)學(xué)通報,2007,13(18):223.
[2]司興奎,羅汝灶,戴宜發(fā),等.豬O型合成肽與油乳滅活疫苗免疫后抗體水平的比較[J].中國獸醫(yī)雜志,2010,46(5):6-9.
(責(zé)編:張宏民)