陳艷+張紅建+謝更祥+趙闊+羅山+王濤+鄭聯(lián)合

摘 要 采用FAO推薦的儲(chǔ)糧害蟲(chóng)磷化氫抗藥性測(cè)定方法，測(cè)定出海南地區(qū)8個(gè)品系的赤擬谷盜成蟲(chóng)磷化氫抗性系數(shù)范圍為612～1 045，全部品系均到達(dá)極高抗性水平（Rf>160）。200 mL/m3磷化氫濃度條件下Rf612、Rf826.4、Rf1045品系完全致死時(shí)間分別為8、9、11 d。

關(guān)鍵詞 赤擬谷盜 ；抗藥性 ；致死濃度 ；磷化氫

中圖分類(lèi)號(hào) Q949，96 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A Doi：10.12008/j.issn.1009-2196.2017.05.012

Resistance of Tribolium castaneum to Phosphine and the Relation Between

Lethal Phosphine Concentration and Exposure Time in Hainan Province

CHEN Yan ZHANG Hongjian XIE Gengxian

ZHAO Kuo LUO Shan， WANG Tao ZHENG Lianhe

（Hainan Institute of Grain and Oils Sciences， Qionghai， Hainan 571400）

Abstract Using the phosphine resistance determination method recommended by the Food and Agriculture Organization （FAO）， 8 strains of Tribolium castaneum adults collected from Hainan Province were determined. The results showed that the resistance coefficients for these 8 strains of T. castaneum adultswere in the range of 612～1 045， indicating that the adults of all the strains were resistant to phosphine at a high level （Rf >160）. When treated with phosphine at a concentration of of 200 mL/m3， the strains Rf612， Rf826.4 and Rf1045 had a lethal time of 8 d， 9 d and 11 d， respectively .

Keywords Tribolium castaneum ； resistance ； concentration ； phosphine

赤擬谷盜（Tribolium castaneum）屬鞘翅目擬步甲科，是一種危害嚴(yán)重的第二食性儲(chǔ)糧害蟲(chóng)[1]。赤擬谷盜食性廣、危害大，除對(duì)谷物、面粉、油料等進(jìn)行直接取食破壞外，其成蟲(chóng)體表還可分泌含苯醌等致癌物質(zhì)，使被害物結(jié)塊、變色而不能食用[2-3]。

目前，對(duì)赤擬谷盜的防治方法以磷化氫熏蒸為主，但長(zhǎng)期、過(guò)度、不規(guī)范的使用將會(huì)引起嚴(yán)重的“3R”問(wèn)題，造成生態(tài)環(huán)境和人類(lèi)健康的負(fù)面影響[4-5]。海南為高溫、高濕、高鹽地區(qū)，儲(chǔ)糧害蟲(chóng)極易滋生，磷化氫熏蒸次數(shù)相對(duì)較多，因此，儲(chǔ)糧害蟲(chóng)抗藥性的增加尤為嚴(yán)重。

為掌握海南地區(qū)赤擬谷盜對(duì)磷化氫抗藥性情況，本文對(duì)海南8個(gè)市縣的糧庫(kù)中赤擬谷盜成蟲(chóng)對(duì)磷化氫的抗藥性進(jìn)行測(cè)定，并計(jì)算其完全致死時(shí)間與濃度，以期為海南地區(qū)科學(xué)、綠色儲(chǔ)糧提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器與設(shè)備

DHG-9123A型電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱，天津市泰斯特儀器有限公司生產(chǎn)；美國(guó)產(chǎn)微量氣密性注射器；AL104電子天平，梅特勒-托利多儀器有限公司生產(chǎn)；德國(guó)Drager PacⅢ型氣體檢測(cè)儀；LRH-150-S恒溫恒濕培養(yǎng)箱，廣東省醫(yī)療器械廠生產(chǎn)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)材料

供試害蟲(chóng)：赤擬谷盜采自海南省8個(gè)代表性市縣地方儲(chǔ)備糧庫(kù)。將成蟲(chóng)接種于裝有60%燕麥片+30%全麥粉+10%酵母的試瓶中，在（27±1）℃、（75±5）%相對(duì)濕度條件下培養(yǎng)10代。待11代成蟲(chóng)出現(xiàn)7 d后，篩出成蟲(chóng)供試驗(yàn)用[6]。供試害蟲(chóng)樣品采集于海南省各地糧庫(kù)。具體試蟲(chóng)來(lái)源見(jiàn)表1。

1.2 方法

1.2.1 抗性測(cè)定

采用聯(lián)合國(guó)糧農(nóng)組織（FAO）1975（6）推薦的熏蒸劑抗性測(cè)定方法測(cè)定。即在25℃、RH 70%下熏蒸20 h，之后在原培養(yǎng)條件下培養(yǎng)14 d 檢查害蟲(chóng)死亡情況，計(jì)算死亡率、校正死亡率、抗性系數(shù)（Rf值）。

1.2.2 不同濃度磷化氫對(duì)赤擬谷盜完全致死時(shí)間測(cè)定

小型環(huán)流熏蒸室采用王殿軒等方案制作[8]。將50頭羽化7 d的成蟲(chóng)放入兩端開(kāi)口的玻璃管中，并放入7 g上述飼料，兩端再用紗布封口。每種品系設(shè)2個(gè)平行，同時(shí)設(shè)對(duì)照組。試驗(yàn)過(guò)程中不同的熏蒸室內(nèi)磷化氫濃度分別設(shè)置為100、200、300、400、500 mL/m3，并每天測(cè)試熏蒸室內(nèi)磷化氫濃度，當(dāng)磷化氫濃度低于目標(biāo)濃度時(shí)及時(shí)做補(bǔ)充。試蟲(chóng)處理時(shí)間到達(dá)規(guī)定時(shí)間后，將試蟲(chóng)放入（27±1）℃，（75±5）%相對(duì)濕度條件下培養(yǎng)14 d，檢查害蟲(chóng)死亡情況。

1.2.3 Ct值

Ct值表示的是一定濃度磷化氫與該濃度條件下赤擬谷盜完全致死時(shí)間的乘積[9]。

1.2.4 數(shù)據(jù)處理

實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)采用SPSS、Microsoft Excel處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 赤擬谷盜磷化氫抗性測(cè)定結(jié)果

海南地區(qū)不同品系赤擬谷盜對(duì)磷化氫抗性的測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

由表2可知，海南地區(qū)赤擬谷盜對(duì)磷化氫的抗性系數(shù)均較高，最低Rf612.6，最高Rf1 045。全部品系均到達(dá)極高抗性水平（Rf>160）。

2.2 磷化氫完全致死不同抗性赤擬谷盜品系時(shí)間測(cè)定結(jié)果

不同抗性赤擬谷盜品系的磷化氫完全致死時(shí)間見(jiàn)表3。

從表3可以看出，同一品系條件下，當(dāng)磷化氫濃度一定時(shí)，熏蒸時(shí)間越長(zhǎng)，赤擬谷盜致死率越高；當(dāng)熏蒸時(shí)間一定時(shí)，磷化氫濃度越高，赤擬谷盜致死速率越快。如：2號(hào)品系赤擬谷盜在100 mL/m3磷化氫條件下完全致死所需時(shí)間為9 d，當(dāng)磷化氫濃度增加到500 mL/m3時(shí)，其完全致死時(shí)間僅需5 d。

從不同品系來(lái)看，不同磷化氫抗性的赤擬谷盜，在相同熏蒸時(shí)間及磷化氫濃度條件下，其死亡率存在著較大差異。200 mL/m3濃度的磷化氫在8 d后可使Rf612的2號(hào)品系赤擬谷盜全部致死，而Rf826.4的1號(hào)品系赤擬谷盜致死率為95%，Rf1 045的5號(hào)品系赤擬谷盜的致死率僅為92%。

2.3 不同磷化氫完全致死不同抗性赤擬谷盜品系的Ct值

不同磷化氫濃度完全致死不同抗性赤擬谷盜品系的Ct值見(jiàn)表4。

由表4可知，同一品系不同磷化氫條件下赤擬谷盜的Ct值不同，且隨著磷化氫濃度的增加Ct值不斷增加。當(dāng)磷化氫濃度從100 mL/m3升高至500 mL/m3時(shí)，2號(hào)品系Ct值從900升高至2 500，1號(hào)品系Ct值從1 000升高至3 000，5號(hào)品系Ct值由1 200升高至3 500。不同品系間Ct值也不同，且品系抗性越高，Ct值越大。當(dāng)抗性系數(shù)為612時(shí)，Ct值為900，當(dāng)抗性系數(shù)為1 045時(shí)，Ct值升至1 200。

3 結(jié)論與討論

本文對(duì)取自海南8個(gè)不同市縣糧庫(kù)中的赤擬谷盜抗藥性進(jìn)行測(cè)試，發(fā)現(xiàn)該地區(qū)赤擬谷盜對(duì)磷化氫的抗性極強(qiáng)，全部達(dá)到高抗性或極高抗性等級(jí)。我國(guó)現(xiàn)階段對(duì)儲(chǔ)糧害蟲(chóng)防治仍以磷化氫熏蒸為主，磷化氫長(zhǎng)期、不規(guī)范、過(guò)度的使用極易造成儲(chǔ)糧害蟲(chóng)抗性增加。海南為高溫、高濕地區(qū)，糧食儲(chǔ)藏過(guò)程中容易造成害蟲(chóng)滋生，相比于北方低溫地區(qū)，海南磷化氫熏蒸次數(shù)偏多，再加上糧庫(kù)氣密性較差，每次熏蒸時(shí)磷化氫用量高于一般水平，這是造成海南各地區(qū)赤擬谷盜產(chǎn)生高抗性的主要原因[10]。

從磷化氫完全致死不同抗性赤擬谷盜時(shí)間結(jié)果及其Ct值來(lái)看，即使Rf1 045的極高抗性赤擬谷盜，只要相對(duì)延長(zhǎng)熏蒸時(shí)間，在100 mL/m3磷化氫條件下也可將其徹底殺滅。從經(jīng)濟(jì)及環(huán)境方面考慮，在對(duì)儲(chǔ)糧害蟲(chóng)殺滅過(guò)程因盡量采用低濃度、長(zhǎng)時(shí)間的操作方案。

參考文獻(xiàn)

[1] 陸馳宇，史家浩，李紹勤. 13種植物精油和茴香腦對(duì)赤擬谷盜成蟲(chóng)熏蒸活性研究[J]. 中國(guó)糧油學(xué)報(bào)，2014，29（2）： 72-75.

[2] 鄧天福，王爭(zhēng)艷，尉吉乾，等. 4種植物提取物對(duì)兩種儲(chǔ)糧害蟲(chóng)的驅(qū)避作用[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2008，36（2）：614-615.

[3] 張紅建，鄭聯(lián)合，趙 闊，等. 植物提取物對(duì)赤擬谷盜的生物活性研究[J]. 糧食儲(chǔ)藏，2015（6）：1-4.

[4] Pugazhvendan S R， Ronald Ross P， Elumalai K. Insecticidal and repellant activities of plants oil against stored grain pest，Tribolium castaneum （Herbst）（Coleoptera：Tenebrionidae）[J]. Asian Pacific Journal of Tropical Disease， 2012（1）： 412-415.

[5] Fariba Senfi， Mohammad Hassan Safaralizadeh，Seyed Ali Safavi el. Fumigant toxicity of Laurus nobilis and Myrtus communis essential oils on larvae and adults of the Red flour beetle， Tribolium castaneum Herbst （Col. ：Tenebrionidate）[J]. Archives of Phytopathology and Plant Protection， 2014， 47（4）： 472-476.

[6] 曹 陽(yáng). 我國(guó)谷蠹、赤擬谷盜、銹赤扁谷盜和土耳其扁谷盜磷化氫抗藥性調(diào)查[J] . 河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2006，27（1）：1-6.

[7] Anonymous. Recommended methods for the detection and measurement of resistance of agricultural pests to pesticides. Tentative method for adults of some major pest species of stored cereal，with methyl bromide and phosphine[M]. FAO Plant Prorection Bulletin， 1975， 23： 12-26.

[8] 王殿軒，陳吉漢，周慧星，等. 磷化氫對(duì)3種儲(chǔ)糧書(shū)虱致死濃度與時(shí)間的比較研究[J]. 植物檢疫，2010，24（2）：10-12.

[9] 王殿軒. 磷化氫對(duì)赤擬谷盜的毒理學(xué)及熏蒸關(guān)鍵技術(shù)研究[D]. 北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)，2006.

[10] 謝更祥，唐 易，張連中，等. 海南地區(qū)扁谷盜抗藥性和實(shí)倉(cāng)防治研究[J]. 糧食儲(chǔ)藏，2013（1）：9-12.