聶盼水 譚文波
(湖北民族學院體育學院,湖北 恩施 445000)
富硒板黨對小鼠運動能力的影響及機制
聶盼水 譚文波1
(湖北民族學院體育學院,湖北 恩施 445000)
目的 研究富硒板黨對小鼠運動能力的影響及機制。方法 50只小鼠隨機分為安靜對照組、力竭運動對照組、力竭運動給藥組、力竭恢復對照組和力竭恢復給藥組,根據(jù)實驗要求給藥處理28 d后,觀測各組小鼠力竭游泳時間,檢測各組小鼠血清及骨骼肌組織乳酸(LA)、血糖(BG)、肝糖原(HG)、肌糖原(MG)和血清、肝組織及骨骼肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的含量。結(jié)果 力竭給藥組較力竭對照組力竭游泳時間明顯延長,延長率為18.76%;與安靜對照組比較,力竭運動對照組和力竭運動給藥組LA、MDA含量和SOD活性顯著增加,BG、HG、 MG含量顯著降低,力竭恢復給藥組LA、BG、MDA、HG、 MG含量和SOD活性無顯著差異(P>0.05);與力竭運動對照組比較,力竭運動給藥組BG、HG、 MG含量和SOD活性顯著增加,LA、MDA顯著降低;與力竭恢復對照組比較,力竭恢復給藥組BG、HG、 MG含量顯著增加,LA、MDA顯著降低。結(jié)論 富硒板黨能夠延緩疲勞的發(fā)生和促進疲勞恢復,提高小鼠的運動能力,其機制可能與調(diào)節(jié)機體的代謝狀態(tài)和緩解器官的氧化損傷有關。
運動性疲勞;能源物質(zhì);乳酸;超氧化物歧化酶;丙二醛
隨著競技體育高度發(fā)展,越來越多的輔助手段被用于提高運動競技水平,尤其是某些能在延緩疲勞發(fā)生和促進疲勞恢復方面發(fā)揮重要作用,又不含違禁藥物成分的物質(zhì)。富硒板黨具有補氣生血、提神養(yǎng)肺、增加食欲、抗疲勞等強身健體作用〔1〕,本文擬觀察富硒板黨對小鼠運動能力及其運動代謝的影響。
1.1 藥品與試劑 富硒板黨水溶液的制備〔2〕:將適量富硒板黨干燥根打粉、過篩,加水浸泡30 min,經(jīng)超聲提取2次,每次45 min,然后合并濾液,濃縮,過濾,加適量蒸餾水,將溶液pH調(diào)至近中性,G4垂熔玻璃漏斗過濾,使其成為1 g/ml水溶液,滅菌,冷藏備用。小鼠乳酸(LA)、血糖(BG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肝糖原(HG)和肌糖原(MG)試劑盒(上海豐翔生物科技有限公司)。
1.2 主要儀器 UV-2450分光光度儀,GL-20GII型高速低溫離心機,Multikan MK3酶標儀,DW40-120低溫冰箱,BS224S電子分析天平,HFJ-10內(nèi)切式勻漿機。
1.3 動物分組及給藥 3月齡雄性KM種小鼠50只,體重(22.5±2.1)g,由華中科技大學同濟醫(yī)學院動物中心提供。適應性喂養(yǎng)2 d后,隨機分為安靜對照組、力竭運動對照組、力竭運動給藥組、力竭恢復對照組和力竭恢復給藥組,每組10只,各給藥組按5 ml·kg-1·d-1灌服富硒板黨水溶液,各對照組按0.4 ml/d 灌服0.5%羧甲基纖維素鈉,連續(xù)灌胃28 d。 末次給藥后禁食2 h,將小鼠(安靜對照組除外)尾根部負荷3%體重鉛絲,置于Morris水迷宮中游泳,水深約30 cm,水溫(25±0.5)℃,記錄小鼠自游泳開始至游泳力竭(沉入水面下10 s不能上浮)的時間,作為小鼠力竭游泳時間。安靜對照組、力竭運動對照組和力竭運動給藥組即刻摘眼球采血后,脫頸椎處死,剖腹取出肝臟右葉一塊,于左后肢取腓腸肌一塊備用。力竭恢復對照組和力竭恢復給藥組恢復24 h后再做同樣處理。
1.4 血清和肝、骨骼肌組織勻漿的制備 將各組取血置于4℃ 冰箱靜置保存2 h后,3 000 r/min,離心10 min,取上清液,即為血清,于4℃保存血清備用。將所取肝、骨骼肌組織分別放入冰冷的生理鹽水中漂洗,除去血液,濾紙拭干,剪碎,分別稱取肝和骨骼肌組織各50 mg放入玻璃勻漿器中,加入冷生理鹽450 ml,用內(nèi)切式勻漿機進行勻漿。將制備好的10%組織勻漿用高速低溫離心機3 000 r/min左右離心10~15 min,取離心好的勻漿上清液待測。
1.5 生化指標的檢測 采用動力學酶法測定血清和骨骼肌組織LA含量,黃嘌呤氧化酶法檢測血清和肝、骨骼肌組織SOD的活性,硫代巴比妥酸法測定血清和肝、骨骼肌MDA含量,葡萄糖氧化酶法測定BG含量,蒽酮比色法測定HG、 MG含量。
1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS16.0軟件進行t檢驗。
2.1 富硒板黨對小鼠力竭游泳時間的影響 與力竭對照組比,力竭給藥組能顯著地延長小鼠力竭游泳時間〔(62.22±11.03)vs(77.45±13.19)min,P<0.01〕,其延長率為18.76%。
2.2 富硒板黨對小鼠血清生化指標的影響 力竭運動對照組和力竭運動給藥組血清的LA、SOD和MDA顯著高于安靜對照組,血清BG顯著低于安靜對照組(P<0.01);力竭運動給藥組血清SOD、BG顯著高于力竭運動對照組(P<0.01),血清LA、MDA顯著低于力竭運動對照組;力竭恢復給藥組血清BG顯著高于力竭恢復對照組,力竭恢復給藥組血清LA、MDA顯著低于力竭恢復對照組(均P<0.01);力竭恢復對照組血清LA、BG、SOD和MDA與安靜對照組無顯著差異(P>0.05)。見表1。
2.3 富硒板黨對肝臟SOD、MDA和HG的影響 力竭運動對照組和力竭運動給藥組肝組織SOD、MDA顯著高于安靜對照組,HG顯著低于安靜對照組;力竭運動給藥組和力竭恢復對照組肝組織SOD、MDA顯著高于力竭運動對照組,力竭運動給藥組和力竭恢復對照組HG顯著低于力竭運動對照組(P<0.01);力竭恢復給藥組HG顯著高于力竭恢復對照組,力竭恢復給藥組肝組織MDA顯著低于力竭恢復對照組(均P<0.01);力竭恢復對照組肝臟MDA、HG與安靜對照組無顯著性差異(P>0.05)。見表2。
2.4 富硒板黨對骨骼肌LA 、SOD、MDA和MG的影響 力竭運動對照組和力竭運動給藥組骨骼肌的LA、SOD和MDA顯著高于安靜對照組,MG顯著低于安靜對照組(均P<0.01);力竭運動給藥組骨骼肌SOD和MG顯著高于力竭運動對照組,力竭運動給藥組LA和 MDA顯著低于力竭運動對照組(均P<0.01);力竭恢復給藥組MG顯著高于力竭恢復對照組,力竭恢復給藥組骨骼肌LA和 MDA顯著低于力竭恢復對照組(均P<0.01);力竭恢復對照組骨骼肌LA、MDA和MG與安靜對照組無顯著差異(P>0.05)。見表1。
表1 富硒板黨對小鼠血清生化指標及骨骼肌LA 、SOD、MDA和MG的影響
與安靜對照組比較:1)P<0.01;與力竭運動對照組比較:2)P<0.01;與力竭恢復對照組比較:3)P<0.01,下表同
表2 富硒板黨對肝臟SOD、MDA和HG的影響
力竭游泳時間是體能的綜合表現(xiàn),是評價運動能力的常用指標,對抗疲勞物質(zhì)進行評價時,力竭游泳時間結(jié)果呈陽性是認定該物質(zhì)具有抗疲勞作用的必要條件〔3〕。本文發(fā)現(xiàn)富硒板黨能顯著地延長小鼠力竭游泳時間,具有明顯的抗疲勞用,能夠提高小鼠的運動能力,其作用機制可能與下列因素有關。
疲勞的“衰竭”學說認為運動過程中體內(nèi)能源物質(zhì)大量消耗而得不到及時的補充,就會產(chǎn)生疲勞,使運動能力顯著下降。當人體進行大強度的持續(xù)運動時,肌肉不僅消耗肌糖原,而且大量吸收和利用血糖,其攝取速度大于肝糖原分解入血的速度,因而引起血糖降低,使幾乎全部依賴血糖供能的中樞神經(jīng)系統(tǒng)和紅細胞出現(xiàn)功能障礙,直接產(chǎn)生中樞性疲勞,紅細胞運輸氧的能力下降和運動肌糖供應不足,會導致骨骼肌通過有氧氧化和無氧酵解獲得的供能減少,而出現(xiàn)外周性疲勞并最終導致運動能力下降〔4〕。本研究結(jié)果,表明富硒板黨可以調(diào)節(jié)小鼠的新陳代謝,既能夠在一定程度上防止小鼠在力竭運動狀態(tài)下BG和LG/NG濃度的過度降低,又能加快其在力竭運動后濃度的恢復,從而顯著地延長小鼠力竭游泳時間,促進疲勞的恢復,提高小鼠的運動能力。
疲勞的“堵塞”學說認為長時間或者高強度運動,糖酵解供能急劇增加,會產(chǎn)生大量乳酸,在肌肉組織中堆積,H+濃度升高,pH 值下降,可中和神經(jīng)-肌肉接頭處突觸間隙中的乙酰膽堿,阻礙神經(jīng)-肌肉接頭處興奮的傳遞;抑制肌酸激酶、ATP酶、磷酸果糖激酶、磷酸化酶激酶、腺苷酸環(huán)化酶和脂肪酶的活性,使ATP 產(chǎn)生減少 ;還能降低肌質(zhì)網(wǎng)Ca2+的重攝取能力,使肌肉收縮能力減弱〔5〕。 本實驗結(jié)果證明富硒板黨能夠通過抑制LA的積累和加速LA的清除來發(fā)揮抗疲勞作用。
疲勞的“自由基”學說認為急性運動可以產(chǎn)生大量自由基,引起骨骼肌組織發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應,脂質(zhì)過氧化反應的終產(chǎn)物MDA不僅可以抑制骨骼肌、心肌Ca2+-ATP酶和Na+-K+-ATP酶等與運動相關酶類的活性,還能夠使肌細胞膜和線粒體膜等生物膜的完整性遭到破壞和損傷,細胞代謝紊亂,細胞結(jié)構與功能破壞,從而降低機體的運動能力〔6〕。研究證明SOD作為機體內(nèi)直接清除自由基的成分之一,與有氧運動能力密切相關〔7〕。本實驗證明富硒板黨能夠通過增強機體的抗氧化能力,減輕脂質(zhì)過氧化損傷,提高機體的運動能力。
1 龔晉文.黨參系列保健產(chǎn)品開發(fā)可行性探析〔J〕.山西職工醫(yī)學院學報,2011;21(3):56-7.
2 王振富,鐘 靈,肖本見.富硒板黨對力竭運動大鼠心肌線粒體抗氧化作用的影響〔J〕.中國應用生理學雜志,2013;29(2):177-8.
3 Yan F,Wang B,Zhang Y.Polysaccharides from Cordyceps sinensis mycelium ameliorate exhaustive swimming exercise-induced oxidative stress 〔J〕.Pharm Biol,2014;52(2):157-61.
4 Yeh TS,Huang CC,Chuang HL,etal.Angelica sinensis improves exercise performance and protects against physical fatigue in trained mice 〔J〕.Molecules,2014;19(4):3926-39.
5 Huang CC,Chen YM,Kan NW,etal.Cornu cervi pantotrichum supplementation improves exercise performance and protects against physical fatigue in mice 〔J〕.Molecules,2014;19(4):4669-80.
6 Su KY,Yu CY,Chen YW,etal.Rutin,a flavonoid and principal component of saussurea involucrata,attenuates physical fatigue in a forced swimming mouse model 〔J〕.Int J Med Sci,2014;11(5):528-37.
7 Li J,Wang Y.Effect of different methods of hypoxic exercise training on free radical oxidation and antioxidant enzyme activity in the rat brain 〔J〕.Biomed Rep,2013;1(6):925-9.
〔2016-02-13修回〕
(編輯 曹夢園)
譚文波(1974-),男,副教授,主要從事中藥延緩衰老與防治老年病機制研究。
聶盼水(1974-),男,碩士,講師,主要從事運動保健研究。
R285.5
A
1005-9202(2017)10-2401-02;
10.3969/j.issn.1005-9202.2017.10.022
1 湖北民族學院醫(yī)學院