TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與中國(guó)慢性阻塞性肺疾病易感性的Meta分析

李小莉，徐 健，王君麗，張丹丹

(南方醫(yī)科大學(xué)深圳醫(yī)院呼吸內(nèi)科，廣東 深圳 518101)

慢性阻塞性肺疾病(慢阻肺)具有較高的流行率和病死率，已成為全球性公共健康問(wèn)題，嚴(yán)重危害大眾健康[1]。該病以肺實(shí)質(zhì)破壞及終末氣道炎癥為主要特征[2]。慢阻肺病因復(fù)雜，目前認(rèn)為吸煙是主要病因之一，但其他因素如環(huán)境、遺傳基因也越來(lái)越引起重視。既往的有關(guān)遺傳方面研究發(fā)現(xiàn)，基因因素能增加慢阻肺易感性。近年來(lái)，研究表明遺傳多態(tài)性的基因分布對(duì)慢阻肺進(jìn)展有較大的影響。目前已報(bào)道某些候選基因如IL-6、ACE及TNF-α等與慢阻肺的易感性[3-5]。其中TNF-α基因多態(tài)性與慢阻肺易感性較為關(guān)注。

目前已有多篇報(bào)道TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺的易感性，但由于地域、種族等因素不同，研究結(jié)果存在爭(zhēng)議。本研究收集TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與我國(guó)慢阻肺的病例對(duì)照研究文獻(xiàn)進(jìn)行Meta分析，為明確其是否與我國(guó)慢阻肺發(fā)病相關(guān)。

1 資料與方法

1.1 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.1.1 納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)有關(guān)TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺相關(guān)性研究的中文和英文病例對(duì)照研究；(2)有直接的原始數(shù)據(jù)或經(jīng)計(jì)算后獲得的間接數(shù)據(jù)；(3)同一單位、同一作者發(fā)表的相似的研究，只納入數(shù)據(jù)更充分的文獻(xiàn)。

1.1.2 排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)原始文獻(xiàn)內(nèi)容未涉及TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)研究；(2)不能得到完整數(shù)據(jù)或重復(fù)發(fā)表文獻(xiàn)；(3)非病例對(duì)照研究，如會(huì)議摘要和評(píng)論。

1.2 文獻(xiàn)檢索

計(jì)算機(jī)檢索包括檢索PubMed、Embase、Cochrane Library、中國(guó)學(xué)術(shù)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù)(1979-2016.11)、維普數(shù)據(jù)庫(kù)(1989-2016.11)和萬(wàn)方資源數(shù)據(jù)庫(kù)(2000-2016.11)。檢索詞包括：Chronic obstructive pulmonary disease、TNF-α、Polymorphism、慢性阻塞性肺疾病、TNF-α、基因。

1.3 質(zhì)量評(píng)價(jià)

按照STREGA[6]原則進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)：(1)樣本量是否充分；(2)診斷標(biāo)準(zhǔn)是否清楚；(3)分組匹配是否合理；(4)對(duì)照組與病例組是否具有可比性，對(duì)照組基因型分布需符合Hardy-Weinberg(H-W)遺傳平衡定律；(5)基因檢測(cè)方法是否合理；(6)數(shù)據(jù)是否充分。以上6項(xiàng)，每滿(mǎn)足一項(xiàng)記為1分，總分≥3分者，質(zhì)量可靠。

1.4 文獻(xiàn)篩選

2位研究者計(jì)算機(jī)檢索相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)，分別閱讀所獲文獻(xiàn)的文題、摘要進(jìn)行初篩，而后閱讀全文進(jìn)行復(fù)篩，根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，最終納入文獻(xiàn)。

1.5 資料提取

通過(guò)統(tǒng)一的資料提取表，非盲法提取以下文獻(xiàn)數(shù)據(jù)：第一作者姓名、文獻(xiàn)發(fā)表年限、研究對(duì)象地區(qū)、樣本量、病例組和對(duì)照組基因型、各組等位基因頻率及H-W平衡檢驗(yàn)結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

通過(guò)Stata 12.0軟件進(jìn)行Meta分析。采用χ2檢驗(yàn)檢測(cè)各研究間的異質(zhì)性。若納入研究無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)異質(zhì)性，采用固定效應(yīng)模型合并分析；若各研究有統(tǒng)計(jì)異質(zhì)性，則采用隨機(jī)效應(yīng)模型合并分析。同時(shí)計(jì)算對(duì)照組的H-W平衡，若對(duì)照組滿(mǎn)足H-W平衡則采用優(yōu)勢(shì)比(OR)及其95%CI評(píng)估TNF-α+489 G/A和慢阻肺的相關(guān)性，以P≤0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。最后運(yùn)用Begg’s檢驗(yàn)評(píng)估發(fā)表偏倚。

2 結(jié)果

2.1 檢索結(jié)果

根據(jù)檢索策略初步檢索到文獻(xiàn)235篇。閱讀標(biāo)題、摘要，排除重復(fù)發(fā)表、非臨床研究文獻(xiàn)共188篇，剩余47篇進(jìn)一步閱讀全文。根據(jù)本研究設(shè)定的納入與排除標(biāo)準(zhǔn)，最終納入6個(gè)研究[7-12]。其基本特征，見(jiàn)表1。

表1 納入研究的基本特征

注： H-W：Hardy-Weinberg遺傳平衡檢測(cè)。

2.2 Meta分析結(jié)果

2.2.1 A vs.G與慢阻肺的關(guān)系:各研究結(jié)果不存在異質(zhì)性(P=0.057，I2=53.5%)，故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。結(jié)果顯示：基因型A vs.G多態(tài)性與慢阻肺有相關(guān)性[OR=1.545，95%(1.024，2.332)，P=0.038]。

2.2.2 AA vs.GG與慢阻肺的關(guān)系:各研究結(jié)果無(wú)異質(zhì)性(P=0.962，I2=0.0%)，故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。結(jié)果顯示：基因型AA vs.GG多態(tài)性與慢阻肺存在相關(guān)性[OR=2.916，95%(1.120，7.592)，P=0.028]。

2.2.3 AA+GA vs.GG與慢阻肺的關(guān)系:各研究結(jié)果不存在異質(zhì)性(P=0.052，I2=54.4%)，故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。結(jié)果顯示：基因型AA+GA vs.GG多態(tài)性與慢阻肺之間有相關(guān)性[OR=1.752，95%(1.320，2.325)，P=0.000]。

2.2.4 AA vs.GG+GA與慢阻肺關(guān)系:各研究結(jié)果無(wú)異質(zhì)性(P=0.977，I2=0.0%)，故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。結(jié)果顯示：基因型AA vs.GG+GA多態(tài)性與慢阻肺易感性之間存在相關(guān)性[OR=2.680，95%(1.028，6.986)，P=0.044]。

2.2.5 AA+GG vs.GA與慢阻肺相關(guān)性:各研究結(jié)果不存在異質(zhì)性(P=0.051，I2=54.7%)，故采用固定效應(yīng)模型進(jìn)行Meta分析。結(jié)果顯示：基因型AA+GG vs.GA多態(tài)性與慢阻肺易感性之間有相關(guān)性[OR=0.620，95%(0.464～0.827)，P=0.001]，見(jiàn)表2。

表2 TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺易感性meta分析

2.3 發(fā)表偏倚

通過(guò)Begg’s檢驗(yàn)判斷發(fā)表偏倚，結(jié)果可見(jiàn)(A vs.G：P=0.452；AA vs.GG：P=0.707；AA+GA vs.GG：P=0.452；AA vs.GG+GA：P=1.000；AA+GG vs.GA：P=0.707)均不存在任何發(fā)表偏倚。

3 討論

TNF-α是一個(gè)主要的促炎性細(xì)胞因子，主要由激活的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，也可由幾個(gè)其他類(lèi)型的細(xì)胞，如淋巴細(xì)胞(T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞)，中性粒細(xì)胞，嗜酸性粒細(xì)胞，肥大細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞，成纖維細(xì)胞，與神經(jīng)元等產(chǎn)生[13]。參與組織和器官多種生理學(xué)和病理學(xué)的重要過(guò)程，包括炎癥、免疫調(diào)節(jié)、增殖和凋亡[14]。TNF-α從血液循環(huán)中募集白細(xì)胞到肺組織，因此是肺部炎癥反應(yīng)的一個(gè)重要決定因素。TNF-α水平增加對(duì)脂代謝、凝血和內(nèi)皮功能有嚴(yán)重影響，可能有助于慢阻肺的進(jìn)展。

眾所周知，慢阻肺是一種慢性氣道炎癥性疾病，包括TNF-a在內(nèi)的炎癥介質(zhì)和炎癥因子在慢阻肺發(fā)病機(jī)制中起重要作用，而TNF-α是慢阻肺慢性氣道炎癥的重要細(xì)胞因子之一。TNF-α基因位于染色體6p21.3，跨度約3 kb，包含四個(gè)外顯子。在其啟動(dòng)子的遺傳變異可以改變TNF-α的代謝和功能。其中+489 G/A多態(tài)性研究相對(duì)較少。有研究表明，此位點(diǎn)多態(tài)性與TNF-α的釋放增加有關(guān)。但尚未發(fā)現(xiàn)TNF-α+489 G/A與我國(guó)慢阻肺易感性的系統(tǒng)評(píng)價(jià)，因此我們進(jìn)行了相關(guān)的研究。

我們的Meta分析包括6個(gè)病例對(duì)照研究，探討TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺關(guān)系。經(jīng)Begg’s檢驗(yàn)對(duì)所納入的研究進(jìn)行檢驗(yàn)，我們未發(fā)現(xiàn)發(fā)表偏倚，表明所納入的研究具有較好的代表性。同時(shí)，對(duì)納入研究進(jìn)行異質(zhì)性檢(P>0.05)，表明所有研究同質(zhì)性較好，結(jié)果可信度高。我們研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α+489 G/A基因型(A vs.G；AA vs.GG；AA+GA vs.GG；AA vs.GG+GA；AA+GG vs.GA)多態(tài)性與慢阻肺易感性之間均有相關(guān)性。梁歡等[15]對(duì)TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺患者的Meta分析發(fā)現(xiàn)，總?cè)巳篢NF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺不存在相關(guān)性，隨后以種族和吸煙人群的亞組分析也未發(fā)現(xiàn)其與慢阻肺存在易感性。他們認(rèn)為T(mén)NF-α+489基因多態(tài)性與COPD的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)可能不存在相關(guān)性。而Cui K等人對(duì)TNF-α+489基因多態(tài)性與亞洲人群慢阻肺相關(guān)性研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α+489能增加亞洲慢阻肺患者易感性[16]。其結(jié)果與我們研究結(jié)果存在一致性。我們研究限制了種族和地域，因而能在最大程度上減少其對(duì)基因分布的影響，因此結(jié)果相對(duì)可靠。本研究發(fā)現(xiàn)TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)存在相關(guān)性，為慢阻肺遺傳易感性再添循證醫(yī)學(xué)證據(jù)。

但本研究也有不足之處：(1)各個(gè)原始研究納入的對(duì)照組的定義并沒(méi)有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，因而可能影響結(jié)果的可靠性。(2)雖然本研究未發(fā)現(xiàn)發(fā)表偏倚，但由于納入文獻(xiàn)較少，可能存在偏倚；(3)本研究納入文獻(xiàn)語(yǔ)種限定為中英文，雖然未發(fā)現(xiàn)明顯的發(fā)表偏倚，仍不能排除發(fā)表偏倚存在的可能。(4)慢阻肺是一種多基因、多因素共同參與的慢性疾病，由于原始數(shù)據(jù)的缺乏，未能分析其他因素如吸煙、年齡、職業(yè)和生活工作環(huán)境，及其他基因的相互作用。

綜上所述，TNF-α+489 G/A基因多態(tài)性與慢阻肺的易感性存在相關(guān)性，然而由于納入研究的數(shù)量有限，尚需開(kāi)展更多多中心、高質(zhì)量、同質(zhì)性好的病例對(duì)照研究予以證實(shí)。

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