時(shí)間和溫度對(duì)人血標(biāo)本中氨濃度的影響

唐偉杰

（沈陽(yáng)體育學(xué)院附屬競(jìng)技體校，遼寧沈陽(yáng)110102）

時(shí)間和溫度對(duì)人血標(biāo)本中氨濃度的影響

唐偉杰

（沈陽(yáng)體育學(xué)院附屬競(jìng)技體校，遼寧沈陽(yáng)110102）

目的：分析時(shí)間和溫度對(duì)于血氨濃度的檢測(cè)影響。方法：利用美國(guó)強(qiáng)生Vitros250干化學(xué)分析儀通過(guò)比色法對(duì)血氨濃度進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：在其他條件一定的情況下，室溫與冷藏條件下的血氨濃度的變化不同。血氨標(biāo)本儲(chǔ)存在22～24℃室溫超過(guò)30min后與原對(duì)照組濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。而血氨標(biāo)本儲(chǔ)存在4～8℃超過(guò)180min后才與原對(duì)照組濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：血氨標(biāo)本應(yīng)該及時(shí)地送檢，檢測(cè)的時(shí)間不能超過(guò)20min，如果來(lái)不及檢測(cè)，最好要將其放在冰箱內(nèi)冷藏保存，但不應(yīng)超過(guò)150min，否則將影響其檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

血液標(biāo)本；氨；干化學(xué)分析儀

氨是蛋白質(zhì)的代謝產(chǎn)物，它對(duì)人和動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)有著潛在的毒副作用。血氨異常升高可繼發(fā)于一些氨基酸與有機(jī)酸的代謝障礙，比如鳥(niǎo)氨酸循環(huán)的氨基酸代謝缺陷［1］，也可見(jiàn)于遺傳性尿素循環(huán)障礙。另外，血氨異常升高很有可能預(yù)示著肝性腦病、肝硬化晚期的肝昏迷、肝衰竭、急性或亞急性肝壞死以及雷氏綜合征等［2］。在過(guò)量食用蛋白質(zhì)時(shí)也容易出現(xiàn)高氨血癥［3］。血漿中氨濃度的測(cè)定受標(biāo)本存放的時(shí)間長(zhǎng)短和溫度高低等因素的影響［4］。提供準(zhǔn)確以及可靠的血氨檢測(cè)結(jié)果對(duì)于患者的臨床診斷以及病因分析有極其重大的意義。由于紅細(xì)胞氨游離會(huì)在血液放置時(shí)使血氨濃度升高；肌肉活動(dòng)或者進(jìn)餐后對(duì)血氨濃度也會(huì)有一定程度的影響［4］。所以應(yīng)該在空腹安靜的狀態(tài)下進(jìn)行取血。血液樣本放置過(guò)久也會(huì)影響血氨檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。在本次試驗(yàn)中，現(xiàn)收集錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院急診科患者血氨標(biāo)本40例，分別在22～24℃室溫3個(gè)時(shí)間點(diǎn)檢測(cè)和4～8℃冷藏狀態(tài)下進(jìn)行5個(gè)時(shí)間點(diǎn)的檢測(cè)，并分析影響血氨濃度檢測(cè)結(jié)果的因素。

1 材料與方法

1.1 材料收集錦州醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院急診科患者血液標(biāo)本40例。標(biāo)本均在同一時(shí)間采集，并在采集后5～10min內(nèi)送至實(shí)驗(yàn)室。血氨標(biāo)本正常參考范圍：11～33μmol/L。

1.2 檢測(cè)指標(biāo)檢測(cè)血氨標(biāo)本的濃度作為標(biāo)本檢測(cè)對(duì)照值（0min），并將每一份血氨標(biāo)本分裝成兩份。將其中一份血氨標(biāo)本放置在22～24℃室溫下，分別檢測(cè)第10、20、30min血氨的濃度。將另外一份血氨標(biāo)本放置在2～8℃冰箱中，分別檢測(cè)第30、60、120、150、180min血氨的濃度。

1.3 基本方法采用美國(guó)強(qiáng)生Vitros250全自動(dòng)干化學(xué)分析儀及血氨干片（批號(hào)為1013-2403）。將一滴患者樣本滴在干片上，通過(guò)擴(kuò)散層均勻分布到下面的試劑層，水和非蛋白組分?jǐn)U散到下面的緩沖試劑層，氨離子轉(zhuǎn)化為氣態(tài)氨，半透膜只允許氨通過(guò)，并且阻止緩沖液或氫氧基離子到達(dá)指示劑層。經(jīng)過(guò)固定的孵育時(shí)間后，可將擴(kuò)散層作為白色背景測(cè)定顯色劑的反應(yīng)強(qiáng)度。反應(yīng)原理：氨+溴酚藍(lán)（氨指示劑）→藍(lán)染劑。

1.4 血氨檢測(cè)方法收集所有標(biāo)本均用肝素抗凝，經(jīng)2 500 r/min離心5min分離出血漿后，立即用全自動(dòng)干化學(xué)分析儀對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)作為檢測(cè)對(duì)照值。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 20.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，配對(duì)設(shè)計(jì)資料采用t檢驗(yàn)，檢測(cè)數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

血氨濃度與保存時(shí)間、溫度的關(guān)系，見(jiàn)表1、2。

表1 22～24℃條件下測(cè)定40例血氨標(biāo)本濃度結(jié)果（μmol/L）

表2 2～8℃條件下測(cè)定40例血氨標(biāo)本濃度結(jié)果（μmol/L）

3 討論

人體中氨的主要來(lái)源是氨基酸脫氨基，胺類分解，腎小管上皮細(xì)胞分泌氨。氨的去路有兩種，丙氨酸經(jīng)血液運(yùn)送到肝，在肝中，丙氨酸通過(guò)聯(lián)合脫氨基作用，釋放出氨，合成尿素。轉(zhuǎn)氨基后生成的丙酮酸可經(jīng)糖異生成葡萄糖。葡萄糖再由血液輸送到肌肉組織，沿糖分解途徑轉(zhuǎn)變成丙酮酸，后者接收氨基生成丙氨酸，這就是丙氨酸-葡萄糖循環(huán)過(guò)程，它使肌肉中的氨以無(wú)毒的丙氨酸形式運(yùn)送到肝，同時(shí)，肝又為肌肉提供了生成丙酮酸的葡萄糖。另一種是腦、肌肉等組織以谷氨酰胺的形式向肝、腎運(yùn)輸氨。

血氨升高可見(jiàn)于遺傳性尿素循環(huán)障礙，亦繼發(fā)于某些氨基酸與有機(jī)酸的代謝障礙，如鳥(niǎo)氨酸循環(huán)的氨基酸代謝缺陷，也可預(yù)示肝性腦病、肝硬化末期肝昏迷、肝衰竭、急性或亞急性肝壞死和雷氏綜合征，飲食蛋白過(guò)多攝入時(shí)也可發(fā)生高氨血癥。因此在檢驗(yàn)的過(guò)程中，血氨檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性非常重要。而通過(guò)本次試驗(yàn)的結(jié)果顯示血氨檢測(cè)的準(zhǔn)確性與保存的時(shí)間與溫度息息相關(guān)。標(biāo)本放置時(shí)間越長(zhǎng)，其血氨濃度越高；低溫下保存，氨濃度保持不變的時(shí)間更長(zhǎng)。主要原因可能是血液細(xì)胞自身代謝或部分微生物代謝后產(chǎn)生氨致使其血氨濃度升高［5］。因此為保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確應(yīng)明確要求，檢測(cè)血氨的標(biāo)本采血后應(yīng)注名采集時(shí)間，立即送檢，迅速測(cè)定。如果血氨標(biāo)本要及時(shí)送檢，檢測(cè)的時(shí)間應(yīng)在20min內(nèi)完成，如果來(lái)不及檢測(cè)，那么最好要將其放在冰箱內(nèi)冷藏保存，但不應(yīng)超過(guò)150min，否則將影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

［1］侯臨平.急診血氨的檢測(cè)分析［J］.實(shí)用醫(yī)技雜志，2004，11（11）：2252-2253.

［2］郭麗潔，鄒大偉，趙明.Amon試劑在Vitros250干化學(xué)儀內(nèi)放置時(shí)間對(duì)其血氨測(cè)定值的影響［J］.中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2008，12（4）：539-539.

［3］Daniotti M，la Marca G，F(xiàn)iorini P，et al.New developments in the treatment of hyperammonemia：emerging use of carglumic acid［J］.Int JGen Med，2011，4：21-28.

［4］楊小波，楊帆，王聰慧，杜婕.兩種血氨檢測(cè)方法的討論與評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)（臨床醫(yī)學(xué)學(xué)刊），2009，18（10）：131-132.

［5］全國(guó)衛(wèi)生專業(yè)技術(shù)資格考試專家委員會(huì).臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)（師）［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2010：369.

（吳迪編輯）

Effect of Tem perature and Duration of Storage on Ammonia Concentration in Human Blood Sam p les

TANGWeijie
（SportSchoolAffiliated to Shenyang SportUniversity，Shenyang110102，China）

Objective：To investigate the effectof temperature and duration of storage on ammonia concentration in human blood samples.Method：Fourty blood samples were collected random ly and blood ammonia concentration wasmeasured by colorimetric method using Johnson&Johnson Vitros-250 dry chemical analyzer.Results：The results of themeasurement showed that the change of blood ammonia concentration was different under room temperature（22-24℃）and refrigerated condition（2-8℃）.Blood samples stored at room temperature for 30min，ammonia concentration increased significantly than the initial concentration，while ammonia concentration of blood samples stored at 2-8℃formore than 180min showed a significant increase.Conclusions：Blood samplesshould be promptlymeasured and the detection time can notbemore than 20min.If it is too late to detect，it isbest to store itat2-8℃，butnotmore than150min，otherwise itwillaffect the accuracy of its test results.

blood sample；ammonia；dry chemicalanalyzer

R446.1

A

1008-2344（2017）03-0240-02

10.16753/j.cnki.1008-2344.2017.03.018

2017-01-28