阮紅剛 付潮泓 許臘梅

·藥物研究·

慢性化膿性中耳炎膿液的病原菌分布及藥敏性分析

阮紅剛 付潮泓 許臘梅

目的 研究慢性化膿性中耳炎(CSOM)膿液中病原菌的種類(lèi)分布和對(duì)抗菌藥物敏感性。方法 研究對(duì)象選取2015年2月到2016年6月間收治的CSOM患者121例，提取患者耳道分泌的膿液，進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)檢測(cè)，并對(duì)所有患者的培養(yǎng)陽(yáng)性病原菌種類(lèi)及藥物敏感性結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 本研究病原菌檢出率為89.26%。其中革蘭陽(yáng)性球菌比例為51.85%，以金黃色葡萄球菌為主(28.70%)；革蘭陰性球菌比例為36.11%，以銅綠假單孢菌為主(13.89%)。金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對(duì)利奈唑胺和呋喃妥因的藥物敏感性最高(100%)，銅綠假單孢菌、變形桿菌及大腸埃希菌等主要革蘭陰性球菌對(duì)大多抗菌藥物均具有較高藥敏性。結(jié)論 引起CSOM發(fā)生的病原菌主要以金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌等，不同病原菌對(duì)抗菌藥物的敏感性存在明顯差異，對(duì)病原菌種類(lèi)及藥敏的檢測(cè)，可為臨床選擇合適抗菌藥物治療提高依據(jù)，具有重要臨床價(jià)值。

慢性化膿性中耳炎；病原菌種類(lèi)；抗菌藥物敏感性

慢性化膿性中耳炎(CSOM)是耳鼻喉科常見(jiàn)的疾病，常指炎癥侵襲到耳黏膜、骨膜甚至骨質(zhì)的慢性化膿性炎癥，且多數(shù)患者并發(fā)有乳突的炎癥[1]。臨床急性炎癥久治不愈、咽鼓管功能障礙、鄰近器官的炎癥病變、自身免疫力低下等因素均可引起該病發(fā)生，臨床研究顯示，急性化膿性中耳炎致病病原菌毒性過(guò)強(qiáng)，及治療不當(dāng)、延遲等因素是臨床引起CSOM發(fā)生的主要原因[2]?；颊吲R床常表現(xiàn)為耳內(nèi)持續(xù)性或間斷的膿液生成、鼓膜損傷及聽(tīng)力的集聚下降，如未得到及時(shí)有效治療，后期可導(dǎo)致患者失聰，甚至引起中耳骨質(zhì)的破壞，出現(xiàn)顱內(nèi)及路外感染，危及患者生命[3]。臨床治療CSOM以抗菌藥物為主，通過(guò)對(duì)致病菌的抑制可取得較好療效，但隨著近年來(lái)抗菌藥物在臨床使用泛濫，許多患者自身不合理用藥，加之CSOM致病菌種類(lèi)繁多，導(dǎo)致病原菌對(duì)藥物敏感性降低，對(duì)耐藥株的報(bào)道逐漸增加[4]。研究顯示，近年來(lái)常規(guī)抗菌藥物治療方案對(duì)CSOM的療效發(fā)現(xiàn)顯著降低，難治性病例逐年增加，因此加強(qiáng)對(duì)CSOM患者病原菌及對(duì)病原菌藥敏的檢測(cè)，對(duì)于臨床科學(xué)使用抗菌藥物意義重大[5]。為了解我院CSOM患者病原菌分析及藥敏特點(diǎn)，為臨床治療提高科學(xué)指導(dǎo)，提高治療療效，筆者選取108例CSOM患者進(jìn)行研究，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對(duì)象選取我院2015年2月到2016年6月間收治的CSOM患者121例，納入標(biāo)準(zhǔn)[6]：(1)均滿足臨床關(guān)于CSOM診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)無(wú)合并耳鼻喉科其他感染；(3)無(wú)嚴(yán)重免疫系統(tǒng)、血液系統(tǒng)等疾??；(4)無(wú)合并心腦血管肝腎肺等器官組織疾?。?5)所有患者檢查前均停止服用抗菌藥物48 h以上。其中男74例，女47例;年齡4～71歲，平均年齡(39.56±12.73)歲;病程7個(gè)月～31年，平均病程(13.84±4.67)年；其中未成年患者(<18歲)共26例，中青年患者(18～60歲)共70例，老年患者(>60歲)共25例;其中慢性單純性中耳炎患者共95例、肉芽型中耳炎患者共11例、乳突手術(shù)后中耳炎患者共9例、膽脂瘤型中耳炎患者共6例。

1.2 方法

1.2.1 檢測(cè)方法:檢測(cè)前采用75.0%醫(yī)用乙醇消毒患者外耳周?chē)つw及外耳道前1/2處，將滅菌兒科棉簽置入0.9%氯化鈉溶液浸潤(rùn)后，緩慢進(jìn)入外耳道直至鼓室、鼓膜穿孔部位或是外耳道深處采集中耳分泌膿液，隨后將膿液置入無(wú)菌培養(yǎng)試管內(nèi)待檢查，以上步驟均嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作，并在30 min內(nèi)將培養(yǎng)物送至細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行涂片鏡檢、細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)，所有實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)步驟均準(zhǔn)守《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)定》進(jìn)行，采用巧克力平板、血瓊脂平板、葡萄糖蛋白胨真菌培養(yǎng)基對(duì)病原菌進(jìn)行培養(yǎng)，并參考相關(guān)文獻(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行鑒定。參考WHO指定的K-B法進(jìn)行細(xì)菌藥檢測(cè)，采用法國(guó)生物-梅里埃公司生產(chǎn)實(shí)際FOUNG3對(duì)真菌進(jìn)行藥敏檢測(cè)，同樣采用該公司生成的頭孢硝噻吩紙片對(duì)葡萄球菌的β-內(nèi)酰胺酶檢測(cè)，藥敏試驗(yàn)結(jié)果則參照2012年CLSI擬定標(biāo)準(zhǔn)。

1.2.2 試劑[7]:巧克力平板、血瓊脂平板、葡萄糖蛋白胨真菌培養(yǎng)基均由英國(guó)OXOID公司生成，質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌(ATCC 25923)、大腸埃希菌(ATCC 25922)、銅綠假單胞菌(ATCC 27853)、表皮葡萄球菌(ATCC 1228)、變形菌屬(ATCC 12453)均由衛(wèi)生部臨檢中心提供，采用梅里埃公司生產(chǎn)的全自動(dòng)微生物分析儀VITEK2-compact進(jìn)行病原菌鑒定，采用上海博訊有限公司生產(chǎn)的全自動(dòng)生物安全柜。

1.3 觀察指標(biāo) 分析所有患者的病原菌種類(lèi)分布，及每種病原菌對(duì)抗菌藥物敏感性結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 所有患者病原菌種類(lèi)分布 121例患者中共檢測(cè)出108株病原菌，病原菌檢出率為89.26%。其中革蘭陽(yáng)性球菌共56株，所占百分比為51.85%；革蘭陰性球菌共39株，所占百分比為36.11%；真菌共13株，所占百分比為12.04%。革蘭陽(yáng)性球菌中金黃色葡萄球菌為主，共31株，所占百分比為28.70%，其次是表皮葡萄球菌，共13株，所占百分比為12.04%；革蘭陰性球菌中以銅綠假單孢菌為主，共15株，所占百分比為13.89%，其次為變形桿菌，共11例，所占百分比為10.19%，再其次為大腸埃希菌，共10例，所占百分比為9.26%。見(jiàn)表1。

表1 所有患者病原菌種類(lèi)分布

2.2 主要革蘭陽(yáng)性球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果 所有抗菌藥物中，金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對(duì)利奈唑胺和呋喃妥因的藥物敏感性最高，達(dá)100%，同時(shí)萬(wàn)古霉素藥敏性也較高，分別為96.77%和100%。見(jiàn)表2。

表2 主要革蘭陽(yáng)性球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果

2.3 主要革蘭陰性球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果 所有抗菌物中，銅綠假單孢菌對(duì)阿米卡星、美羅培南及亞胺培南的藥敏性較高，達(dá)100%，而對(duì)頭孢西丁和氨卡西林的藥敏性為0。變形桿菌和大腸埃希菌對(duì)所有抗菌藥物均有較高的藥敏性。見(jiàn)表3。

3 討論

CSOM是臨床常見(jiàn)的疾病，具有較高的臨床發(fā)病率，臨床常表現(xiàn)為聽(tīng)力進(jìn)行性下降、鼓膜穿孔及反復(fù)膿液流出等癥狀，如不及時(shí)有效治療，還可引起嚴(yán)重并發(fā)癥發(fā)生，甚至出現(xiàn)嚴(yán)重的顱內(nèi)外感染，危及患者生命。抗菌藥物是CSOM的主要治療方法，短時(shí)間內(nèi)服用可取得較理想療效[8]。但研究發(fā)現(xiàn)，近年來(lái)隨著經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展，抗菌藥物醫(yī)源性使用不當(dāng)及自身不合理使用等因素，導(dǎo)致抗菌藥物耐藥率逐年增加，出現(xiàn)多種耐藥病原株，極大提高臨床治療難度[9]。國(guó)內(nèi)外大量對(duì)CSOM患者膿液病原菌培養(yǎng)研究顯示，大多患者均以混合感染為主，同時(shí)病原菌混合種類(lèi)方式多樣化，且不同地區(qū)、不同年齡患者的病原菌種類(lèi)均存在差異，造成國(guó)內(nèi)外對(duì)病原菌種類(lèi)分布遲遲未達(dá)成一致[10]。準(zhǔn)確檢測(cè)患者病原菌種類(lèi)，并進(jìn)行藥敏檢試驗(yàn)指導(dǎo)抗菌藥物的使用，對(duì)臨床治療CSOM具有重要意義[11]。CSOM病原菌種類(lèi)檢測(cè)顯示，病原菌感染多以革蘭陽(yáng)性球菌為主，且革蘭陰性球菌也具有較大比例，其中又以金黃色葡萄球菌最為常見(jiàn)，同時(shí)表皮葡萄球菌和凝固酶陰性葡萄球菌感染也較多，本研究結(jié)果顯示，革蘭陽(yáng)性球菌感染比例為51.85%，這與劉春玲等[12]報(bào)道的50.00%基本一致。這其中又以金黃色葡萄球菌感染最為常見(jiàn)，本研究結(jié)果為28.70%，與部分文獻(xiàn)報(bào)道存在差異，其原因可能與地域及年齡等因素有關(guān)。同時(shí)國(guó)內(nèi)學(xué)者發(fā)現(xiàn)，近年來(lái)CSOM的真菌感染率呈上升趨勢(shì)，本研究結(jié)果顯示，真菌感染率為12.04%，具有較高的診斷率，同時(shí)排除實(shí)驗(yàn)室污染可能，與目前研究基本[13]一致。

表3 主要革蘭陰性球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果

既往研究已證實(shí)，對(duì)病原菌藥敏試驗(yàn)對(duì)于臨床合理使用抗菌藥物，提高CSOM治療療效具有重要作用[14]。本研究對(duì)各類(lèi)革蘭陽(yáng)性球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果顯示，金黃色葡萄球菌和表皮葡萄球菌對(duì)抗菌藥物敏感性種類(lèi)基本相似，均對(duì)利奈唑胺、呋喃妥因及萬(wàn)古霉素具有較高的藥敏性，均達(dá)到95.00%以上，同時(shí)對(duì)慶大霉素和頭孢西汀也具有一定藥敏性，但對(duì)于紅霉素及青霉素的藥敏性較低，均在20.00%以下。對(duì)各類(lèi)革蘭陰性球菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果則顯示，銅綠假單孢菌、變形桿菌及大腸埃希菌等主要革蘭陰性球菌對(duì)大多抗菌藥物均具有較高藥敏性，這其中僅銅綠假單孢菌對(duì)頭孢噻肟、甲氧芐啶、頭孢西丁、氨卡西林的藥敏性較低，和變形桿菌對(duì)甲氧芐啶的36.36%的藥敏性。本研究結(jié)果證實(shí)，不同病原菌種類(lèi)對(duì)抗菌藥物敏感性存在明顯差異，因此臨床治療過(guò)程中需針對(duì)不同種類(lèi)病原菌采用不同抗菌藥物治療，是提高CSOM臨床治愈率的關(guān)鍵。但同時(shí)需注意各抗菌藥物存在的不良反應(yīng)，如氨基糖苷類(lèi)抗菌藥物對(duì)兒童存在一定腎毒性和耳毒性[15]，喹諾酮類(lèi)抗菌藥物則可引起關(guān)節(jié)軟骨壞死等嚴(yán)重并發(fā)癥，同時(shí)慶大霉素則對(duì)兒童存在耳毒性，因此諸類(lèi)藥物在兒童中應(yīng)謹(jǐn)慎使用。且本研究對(duì)真菌感染患者研究發(fā)現(xiàn)，多數(shù)為中耳乳突術(shù)后常規(guī)換藥不能干耳患者，因此對(duì)于耳乳突術(shù)后長(zhǎng)時(shí)間抗菌藥物不能治愈患者，應(yīng)考慮真菌感染可能，并針對(duì)進(jìn)行抗菌藥物使用，但本研究由于實(shí)驗(yàn)條件限制，未對(duì)真菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，需在日后工作中進(jìn)一步完善。

綜上所述，金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、銅綠假單胞菌等是引起CSOM的主要病原菌，不同病原菌對(duì)抗菌藥物的敏感性存在明顯差異，對(duì)病原菌種類(lèi)及藥敏的檢測(cè)，可為臨床選擇合適抗菌藥物治療提高依據(jù)，具有重要臨床價(jià)值。

1 李穎,任紅波,韓富根,等.慢性化膿性中耳炎患兒感染病原菌分布與藥敏分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2016,26:1647-1649.

2 Aduda DSO,Macharia IM,Mugwe P,et al.Bacteriology of chronic suppurative otitis media (CSOM)in children in garissa district,kenya:a point prevalence study.International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology,2013,77:1107-1111.

3 郝春艷,劉紅宇,張貴,等.慢性化膿性中耳炎患者耳道分泌物病原菌培養(yǎng)及藥敏結(jié)果分析.山東醫(yī)藥,2016,56:273-274.

4 Orji FT,Dike BO.Observations on the current bacteriological profile of chronic suppurative otitis media in South eastern Nigeria.Annals of Medical & Health Sciences Research,2015,5:124-128.

5 孫小嬌,崔萬(wàn)明.DGGE法分析慢性化膿性中耳炎耳道菌群變化及藥敏試驗(yàn)研究.中國(guó)微生態(tài)學(xué)雜志,2014,26:400-403.

6 Tiedt NJ,Butler IR,Hallbauer UM,et al.Paediatric chronic suppurative otitis media in the Free State Province:clinical and audiological features.Samj South African Medical Journal,2013,103:467-470.

7 王慧敏,連榮,余文發(fā),等.慢性化膿性中耳炎患者膿液中病原菌分布及藥物敏感性分析.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2013,23:1199-1200.

8 Weckwerth PH,At DMF,Ca DML,et al.Bacterial pathogens related to chronic suppurative otitis media in individuals with cleft palate:bacteriological culture and polymerase chain reaction.Cleft Palate-Craniofacial Journal,2014,51:145-153.

9 龍彬,韓淑貞,王玉杰,等.慢性化膿性中耳炎患者的病原菌特點(diǎn)及藥敏分析.中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志,2013,26:1993-1995.

10 Asish J,Amar M,Hajare V,et al.To study the bacteriological and mycological profile of chronic suppurative otitis media patients and their antibiotic sensitivity pattern.International Journal of Pharma & Bio Sciences,2013,4:186-199.

11 吳學(xué)文,王風(fēng)君,高可雷,等.我國(guó)慢性化膿性中耳炎患者的病原學(xué)及其動(dòng)態(tài)變化分析.中國(guó)耳鼻咽喉顱底外科雜志,2016,22:1034-1039.

12 劉春玲,利顯民,陳妙兒.慢性化膿性中耳炎主要病原菌種類(lèi)及耐藥性分析.中國(guó)當(dāng)代醫(yī)藥,2012,19:176-177.

13 Gu X,Niu L,Keyonmu Y,et al.The analysis of the main pathogenic bacteria and drug sensitivity in patients with chronic suppurative otitis media and patients with middle ear cholesteatoma in xinjiang.Journal of Audiology & Speech Pathology,2014,22:489-493.

14 楊麗,王晉超.新疆各民族慢性化膿性中耳炎病原菌及耐藥性分析.中華全科醫(yī)學(xué),2013,11:1524-1525.

15 張偉琳.慢性化膿性中耳炎膿液的菌種分布和藥物敏感性分析.臨床合理用藥雜志,2014,15:54.

10.3969/j.issn.1002-7386.2017.15.040

442000 湖北省十堰市，湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)醫(yī)院檢驗(yàn)科(阮紅剛、付潮泓),手術(shù)室(許臘梅)

付潮泓，442000 湖北省十堰市，湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬東風(fēng)醫(yī)院檢驗(yàn)科；

E-mail:fuchaohong20@163.com

R 764.21

A

1002-7386(2017)15-2375-04

2017-02-06)