張彥平,賀軍濤,魏 偉,袁曉紅
西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院(西安 710004)
·臨床檢驗(yàn)·
異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息在CellaVision DM96中的驗(yàn)證
張彥平,賀軍濤△,魏 偉,袁曉紅
西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院(西安 710004)
目的:比較Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息與CellaVision DM96檢測(cè)結(jié)果的一致性。方法:隨機(jī)選取門診病人EDTA抗凝全血標(biāo)本322份,用XE-2100血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè)并統(tǒng)計(jì)報(bào)警信息,同時(shí)用CellaVision DM96檢測(cè),兩組結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果:對(duì)Sysmex XE-2100 血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果與CellaVision DM96檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比較,以CellaVision DM96的結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),得出靈敏度75.6%,特異度99.3%,陰性預(yù)測(cè)值96.5%,陽性預(yù)測(cè)值93.9%。結(jié)論:Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀能夠?qū)ν庵苎械漠愋土馨图?xì)胞及時(shí)報(bào)警,具有一定的可靠性,但是假陰性率較高,仍需要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行復(fù)檢,確保結(jié)果的準(zhǔn)確性。
異型淋巴細(xì)胞是外周血中出現(xiàn)的一種形態(tài)變異,甚至發(fā)生母細(xì)胞化或正在返幼的T淋巴細(xì)胞,細(xì)胞特點(diǎn)是細(xì)胞體較大, 細(xì)胞質(zhì)有很強(qiáng)的嗜堿性,細(xì)胞核大,染色質(zhì)疏松,甚至?xí)霈F(xiàn)模糊的核仁或核分裂象[1]。健康人外周偶見異型淋巴細(xì)胞。臨床上異型淋巴細(xì)胞增多主要見于傳染性單核細(xì)胞增多癥、病毒性肝炎、流行性出血熱、濕疹等病毒性疾病和過敏性疾病[2]。
1 材料來源 隨機(jī)選取西安交通大學(xué)第二附屬醫(yī)院2015年11~12月門診EDTA抗凝全血標(biāo)本共322例,年齡0~78歲,男性159例,女性163例。
2 儀器與試劑 XE-2100血細(xì)胞分析儀(日本Sysmex公司);SP-1000i自動(dòng)推片染色儀(日本Sysmex公司);DM96自動(dòng)化數(shù)字圖像分析系統(tǒng)(瑞典CellaVision AB公司);試劑均為其原裝配套試劑;室內(nèi)質(zhì)控良好。
3 研究方法 將收集的322份標(biāo)本用XE-2100血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢測(cè),記錄異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息,同時(shí)用Sysmex SP-1000i儀器對(duì)標(biāo)本進(jìn)行推片染色,將染好的血涂片放入DM96進(jìn)行細(xì)胞預(yù)分類,然后人工審核,記錄結(jié)果。
4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用統(tǒng)SPSS18.0計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,所有指標(biāo)均進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),計(jì)數(shù)資料數(shù)據(jù)以%表示,組間比較采用卡方檢驗(yàn),以P<0.05為結(jié)果差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義
1 Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀檢測(cè)與DM96檢測(cè)結(jié)果的比較 以DM96的檢測(cè)結(jié)果作為金標(biāo)準(zhǔn),計(jì)數(shù)200個(gè)白細(xì)胞,可見2個(gè)以上異型淋巴細(xì)胞即百分比大于1%判定為陽性,以XE-2100散點(diǎn)圖出現(xiàn)Atypical Ly報(bào)警信息為陽性。經(jīng)過計(jì)算,XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警提示的敏感度為75.6%,特異度為99.3%,陰性預(yù)測(cè)值為96.5%,陽性預(yù)測(cè)值為93.9%,假陰性率為24.4%,假陽性率為0.7%。通過SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件計(jì)算,P<0.01,因此可以得出異型淋巴細(xì)胞Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果與DM96檢測(cè)結(jié)果差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀檢測(cè)與DM96檢測(cè)結(jié)果的比較,見表1。
表1 XE-2100檢測(cè)結(jié)果與DM96檢測(cè)結(jié)果比較(例)
2 XE-2100血細(xì)胞分析儀出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息散點(diǎn)圖及異型淋巴細(xì)胞形態(tài)圖 Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息,Q-flags為220時(shí)異型淋巴細(xì)胞Q-flags報(bào)警見圖1。
當(dāng)Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警時(shí),可見散點(diǎn)圖淋巴細(xì)胞區(qū)域增大,出現(xiàn)Atypical Ly等報(bào)警提示,見圖2。
CellaVision DM96分類出的異型淋巴細(xì)胞形態(tài),可見細(xì)胞胞體較大,外形不規(guī)則,胞質(zhì)豐富,染色質(zhì)較粗糙,見圖3。
Sysmex XE-2100全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀的白細(xì)胞分類檢測(cè)原理為:采用半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù),結(jié)合核酸熒光染色技術(shù)進(jìn)行白細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類。半導(dǎo)體激光照射在通過鞘流技術(shù)處理的細(xì)胞上,根據(jù)每個(gè)細(xì)胞所產(chǎn)生的三種信號(hào)來鑒別細(xì)胞類別[3]。DIFF 通道根據(jù)不同類型及不同成熟度的白細(xì)胞對(duì)熒光染料著色能力的差異,檢測(cè)散射光信號(hào)以區(qū)分淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞。橫坐標(biāo)是側(cè)向散射光,反映細(xì)胞內(nèi)容物,如核和顆粒等;縱坐標(biāo)是側(cè)向熒光強(qiáng)度,反映細(xì)胞內(nèi) DNA 和 RNA 的含量[4]。當(dāng)儀器懷疑有異型淋巴細(xì)胞時(shí),會(huì)出現(xiàn)Atypical Ly等報(bào)警提示[5]。CellaVision DM96自動(dòng)化數(shù)字圖像分析系統(tǒng)采用與血細(xì)胞分析儀的流式細(xì)胞術(shù)完全不同的技術(shù),是一種結(jié)合傳統(tǒng)顯微鏡檢查和現(xiàn)代神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)技術(shù)的新型細(xì)胞分析技術(shù),用于血細(xì)胞形態(tài)分析[6]。異型淋巴細(xì)胞也稱不典型淋巴細(xì)胞,指淋巴細(xì)胞經(jīng)抗原(多數(shù)為EBV)或絲裂原刺激后,DNA大量復(fù)制,并相繼合成大量RNA向幼稚細(xì)胞或漿細(xì)胞方向轉(zhuǎn)化,這種處于轉(zhuǎn)化過程中,具有一些新的形態(tài)特點(diǎn)的細(xì)胞[7]。臨床上根據(jù)形態(tài)不同將異型淋巴細(xì)胞分為3型:1型為空泡型,Ⅱ型為幼稚型,Ⅲ型為不規(guī)則形。
本研究表明,XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)異型淋巴細(xì)胞的陽性預(yù)測(cè)值為93.9%,敏感度75.6%,說明XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)異型淋巴細(xì)胞有一定的篩查功能;結(jié)果得出假陰性率24.4%,這是因?yàn)閄E-2100規(guī)定: 標(biāo)本中異型淋巴細(xì)胞的Q-flags>100時(shí),XE-2100血細(xì)胞分析儀即做出異常報(bào)警;我們將異型淋巴細(xì)胞作為疾病診斷的一個(gè)很重要的信息,因此,對(duì)于DM96來說,只要異型淋巴細(xì)胞數(shù)量大于%1即可報(bào)警,因此才出現(xiàn)了這么高的假陰性率,要消除這種假陰性,我們可將Q-flags的值降低在100以下;出現(xiàn)假陽性的原因則是XE-2100血細(xì)胞分析儀不能明確的把異型淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞、幼稚細(xì)胞區(qū)別開。因此,要為臨床醫(yī)生提供一份準(zhǔn)確可靠的信息還需要進(jìn)行復(fù)檢,以防漏診。本院對(duì)于異型淋巴細(xì)胞的復(fù)檢規(guī)則為:淋巴細(xì)胞數(shù)量>70%且出現(xiàn)異型淋巴細(xì)胞,則推片。
綜上所述,Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀對(duì)異型淋巴細(xì)胞報(bào)警具有一定的可靠性,可以作為初篩工具,但同時(shí)具有一定的假陰性率,我們需要儀器與人工鏡檢相結(jié)合,確保結(jié)果的準(zhǔn)確性,但是由于人工鏡檢的主觀性和困難性,耗費(fèi)了檢驗(yàn)人員的時(shí)間,因此我們可以利用DM96來預(yù)分類細(xì)胞,然后人工審核,在DM96進(jìn)行預(yù)分類的同時(shí)可以做一些其他工作,這樣不僅節(jié)省了時(shí)間,也提高了工作效率。同時(shí),因?yàn)镈M96的圖像保存系統(tǒng),我們還可以用于教學(xué),也便于病人結(jié)果的復(fù)查。我們這次只研究了異型淋巴細(xì)胞報(bào)警信息結(jié)果的可靠性,在接下來的時(shí)間里,我們還會(huì)繼續(xù)研究白細(xì)胞中其他細(xì)胞報(bào)警信息結(jié)果的可靠性。
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(收稿:2016-11-01)
@血細(xì)胞分析儀 @報(bào)警信息 @DM96 淋巴細(xì)胞
R446
A
10.3969/j.issn.1000-7377.2017.07.056
△通訊作者