黃建軍，馬雙雙

國(guó)防科技大學(xué)醫(yī)院防檢所(長(zhǎng)沙，410000)

乙肝檢驗(yàn)假陽(yáng)性與假陰性原因分析

黃建軍，馬雙雙

國(guó)防科技大學(xué)醫(yī)院防檢所(長(zhǎng)沙，410000)

目的 研究分析乙肝檢驗(yàn)結(jié)果為假陽(yáng)性與假陰性的原因。方法 運(yùn)用MK-2酶標(biāo)儀、 試劑盒、 酶聯(lián)免疫吸附法、 膠體金測(cè)試卡對(duì)6000名體檢人員進(jìn)行乙肝檢驗(yàn)。統(tǒng)計(jì)分析假陽(yáng)性與假陰性的原因。結(jié)果 ①假陽(yáng)性檢測(cè)錯(cuò)誤原因： 實(shí)驗(yàn)室操作(51.41)、 試劑(33.75%)、 檢驗(yàn)方法(14.38%)等因素與其他原因(0.46%)差異顯著(P<0.05)； ②假陰性檢測(cè)錯(cuò)誤原因： 實(shí)驗(yàn)室操作(53.57%)、 試劑(23.57%)、 檢驗(yàn)方法(22.14%)等因素與其他原因(0.72%)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論 實(shí)驗(yàn)室操作、 試劑、 檢驗(yàn)方法規(guī)范， 可保障乙肝檢驗(yàn)結(jié)果的真實(shí)性。

乙肝檢驗(yàn)； 假陽(yáng)性； 假陰性

乙肝最為普遍的傳染途徑是血液傳播、 血液制品傳播[1]。該病在全球范圍內(nèi)引起了高度重視， 但近些年乙肝發(fā)病率沒有任何下降的趨勢(shì)， 臨床的乙肝篩查工作也越來越重要。本次針對(duì)乙肝篩查過程中出現(xiàn)乙肝假陽(yáng)性、 乙肝假陰性的原因進(jìn)行分析， 希望能夠促進(jìn)臨床乙肝檢驗(yàn)的規(guī)范化發(fā)展。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年2月-2016年5月期間6 000名在我院檢查乙肝的體檢人員作為研究對(duì)象。男2 817名， 女3 183名； 年齡分布在22～76歲， 平均年齡(53.5 12.5)歲。所有體檢人員的乙肝檢驗(yàn)均由3位檢驗(yàn)科的專業(yè)醫(yī)生親自操作。

1.2 方法

回顧性分析6 000名體檢人員的體檢記錄， 統(tǒng)計(jì)其假陰性、 假陽(yáng)性的出現(xiàn)次數(shù)， 經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理進(jìn)一步分析假陰性與假陽(yáng)性的原因。乙肝檢驗(yàn)方法如下： ①選擇MK-2酶標(biāo)儀作為檢測(cè)儀器； ②試劑盒選擇英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)的乙型肝炎五項(xiàng)產(chǎn)品； ③檢測(cè)方法為酶聯(lián)免疫吸附法； ④選擇英科新創(chuàng)科技有限公司生產(chǎn)的膠體金測(cè)試卡。檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)如下： A≥0.210 0為陽(yáng)性， 0.105 0≤A<0.210 0為疑似陽(yáng)性， 假陰性率=假陰性率+陰性率， 假陽(yáng)性率=假陽(yáng)性率+陽(yáng)性率。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

2 結(jié)果

6 000名體檢人員中， 13%檢查錯(cuò)誤， 共780例。其中， 假陽(yáng)性640例， 占82.05%； 假陰性140例， 占17.95%。假陽(yáng)性病例中， 51.41%檢查錯(cuò)誤與實(shí)驗(yàn)室操作有關(guān)， 33.75%與試劑相關(guān)， 14.38%與檢驗(yàn)方法具有緊密聯(lián)系， 0.46%屬于其他原因造成檢查錯(cuò)誤； 假陰性病例中， 53.57%檢查錯(cuò)誤與實(shí)驗(yàn)室操作有關(guān)， 23.57%與試劑相關(guān)， 22.14%與檢驗(yàn)方法具有緊密聯(lián)系， 0.72%屬于其他原因造成檢查錯(cuò)誤。由此得知， 實(shí)驗(yàn)室操作、 試劑、 檢查方法等因素與其他因素差異顯著(P<0.05)， 具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳情見表1。

表1 乙肝檢驗(yàn)假陽(yáng)性與假陰性的原因分析 [n(%)]

3 討論

對(duì)乙肝檢查者的檢驗(yàn)標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)時(shí)， 許多因素可在不經(jīng)意間參與乙肝的疾病發(fā)展， 嚴(yán)重影響了疾病轉(zhuǎn)歸[2]。通常， 臨床將人體免疫應(yīng)答作為乙肝的感染指標(biāo)， 并從中觀察乙肝病毒的相互作用。檢驗(yàn)科醫(yī)師辨識(shí)乙肝疾病時(shí)， 或因個(gè)人疏忽， 或因?qū)I(yè)能力不強(qiáng)， 再或因試劑經(jīng)驗(yàn)過少， 導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)室操作、 檢驗(yàn)方法、 試劑存在很大的問題， 對(duì)臨床乙肝檢驗(yàn)工作造成了影響， 因而出現(xiàn)了假陽(yáng)性與假陰性。建議臨床運(yùn)用酶聯(lián)免疫法對(duì)乙肝病毒或檢驗(yàn)標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)， 該檢驗(yàn)法具有敏感性高、 操作簡(jiǎn)單的特點(diǎn)， 北京萬泰、 上?？迫A的試劑能夠批量操作， 敏感度與特異度均高達(dá)100%或95%以上[3]。

查閱檢查錯(cuò)誤的780名被檢人員的臨床資料、 體檢記錄， 發(fā)現(xiàn)： ①假陰性結(jié)果成因： 抗原體與酶化合物的濃度較低， 對(duì)其吸光功能的影響較為明顯， 具有形成假陰性結(jié)果的良好條件； 抗原體與酶化合物的濃度較高， 吸光度會(huì)顯著增加， 容易導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果不能正常顯示， 漏診率高[4]。②假陽(yáng)性結(jié)果成因： 運(yùn)用酶聯(lián)免疫法經(jīng)驗(yàn)時(shí)， 試劑、 檢驗(yàn)方式、 血清分離操作水平對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果的影響較為明顯， 血液樣本檢驗(yàn)或離心處理的不規(guī)范可提高假陽(yáng)性率。無論是臨床失誤造成的誤診， 還是吸光度增加導(dǎo)致的漏診， 臨床都應(yīng)予以重視， 將乙肝檢查工作規(guī)范化， 提高乙肝檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性， 以便及時(shí)地為患者制定有效的治療方案。

在本次研究中， 780例乙肝假陽(yáng)性或假陰性分析結(jié)果與文獻(xiàn)[5]中的研究結(jié)果基本一致， 均認(rèn)為乙肝檢驗(yàn)結(jié)果受到了實(shí)驗(yàn)室操作、 檢驗(yàn)方法與試劑的制約。

針對(duì)假陰性、 假陽(yáng)性問題， 應(yīng)采取以下措施： ①使用樣品前先將試劑盒溫度與室溫保持一致； ②溶血標(biāo)本存在“不可檢驗(yàn)”的情況時(shí)， 重新抽血制作標(biāo)本， 并予以檢驗(yàn)； ③完成抽血后， 將樣品在溫水中放置2 h使其凝塊收縮， 對(duì)其加大離心時(shí)間， 以3 000 r/min的速度離心， 從而將紅細(xì)胞、 纖維蛋白完全沉淀； ④將標(biāo)本放置10 h,然后對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)， 確保血凝塊的收縮情況良好， 從而讓標(biāo)本非特異性活性物質(zhì)全部或部分失活， 并降低非特異性反應(yīng)?？傊?提高樣本檢驗(yàn)的規(guī)范性， 能夠有效解決假陰性、 假陽(yáng)性問題。

綜上所述， 實(shí)驗(yàn)室操作、 檢驗(yàn)方法試劑等因素對(duì)乙肝檢驗(yàn)結(jié)果存在很多的影響， 既會(huì)形成乙肝假陰性， 又會(huì)形成乙肝假陽(yáng)性， 臨床需要將樣本檢驗(yàn)的規(guī)范性提高， 才能增加乙肝檢驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

[1] 嚴(yán)紅平.乙肝檢驗(yàn)的假陰性與假陽(yáng)性結(jié)果原因研究[J].醫(yī)藥前沿,2014,02(35):78-79.

[2] 韓霞.乙型肝炎檢驗(yàn)的假陰性與假陽(yáng)性結(jié)果原因分析[J].中國(guó)保健營(yíng)養(yǎng)(下旬刊),2013,23(7):4112-4113.

[3] 莊岳鵬,莊惠萍,吳雙,等.影響乙肝表面抗原檢測(cè)結(jié)果的因素及對(duì)策[J].標(biāo)記免疫分析與臨床,2012,19(6):380-382.

[4] 劉娟,康金賢,劉運(yùn)東,等.應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)乙肝核心抗體設(shè)定灰區(qū)在結(jié)果判讀中的意義[J].廣東醫(yī)學(xué),2011,32(6):695-697.

[5] 譚旭明.乙型肝炎檢驗(yàn)的假陰性與假陽(yáng)性結(jié)果原因分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床,2012,09(48):1105-1106.

Causes Analysis of False Positive and False Negative on Hepatitis B

HUANG Jianjun, MA Shuangshuang

Inspection Office, Hospital of National University of Defense Technology (Changsha, 410000)

Objective To study the causes of false positive and false negative detection results on hepatitis B. Methods Hepatitis B test was carried out on 6 000 physical examination people by the methods of MK-2 ELISA kit, ELISA kit and colloidal gold test card. Then, the reasons of the false positives and false negatives were statistically analyzed. Results The causes for false positive detection included laboratory operation (51.41), reagents (33.75%), test methods (14.38%) and other factors (0.46%) (P<0.05) while the causes of the false negative detection included laboratory operation (53.57%), reagents (23.57%), test methods (22.14%) and other reasons (0.72%) (P<0.05). Conclusion Specification of laboratory operation, reagents and test methods can ensure the authenticity of hepatitis B test results.

hepatitis B test, false positive, false negative

10.3969/j.issn.1674-1242.2017.02.017

黃建軍，E-mail:chenbiaoqiang@126.com

R446.6

A

1674-1242(2017)02-0108-02

2016-11-9)