陳桂林

(浙江省長興縣太湖高級中學(xué) 313100)

1 溶酶體中的H+

在動物、真菌和一些植物的細(xì)胞中，含有一些由單位膜包被的小泡，即溶酶體，它是高爾基體斷裂后形成的，屬于細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)的一部分。溶酶體中含有60種以上的水解酶，可以快速降解多糖、蛋白質(zhì)、核酸和脂質(zhì)。溶酶體的功能是消化胞吞的顆粒和細(xì)胞自身產(chǎn)生的碎渣(如線粒體等)，是細(xì)胞內(nèi)消化“器官”，對維持細(xì)胞正常代謝及防御微生物侵染都有重要意義。

溶酶體中的消化酶在粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體上合成，后轉(zhuǎn)至高爾基體經(jīng)出芽方式轉(zhuǎn)運到溶酶體中。溶酶體中的消化酶在pH 5.0左右時催化活性最大，那么溶酶體是如何保持其內(nèi)部的低pH的呢？溶酶體的膜上嵌有質(zhì)子泵，水解ATP供能將H+泵入溶酶體內(nèi)(圖1)[1]，使溶酶體內(nèi)的H+濃度比細(xì)胞質(zhì)中高100倍以上，而細(xì)胞質(zhì)中pH約為7.0到7.3。因此，即使有少量溶酶體酶漏出到細(xì)胞質(zhì)中，但酶活性大大降低，不會降解細(xì)胞質(zhì)中的成分。

圖1 溶酶體pH圖解

2 協(xié)同轉(zhuǎn)運中的H+

洋蔥表皮細(xì)胞在30 g/L的蔗糖溶液中發(fā)生質(zhì)壁分離后能否自動復(fù)原呢？有關(guān)實驗[2]證明，細(xì)胞只要保持在濕潤環(huán)境中，時間足夠長(如一晚上)，就能夠自動發(fā)生質(zhì)壁分離的復(fù)原。那是否就意味著植物細(xì)胞能吸收蔗糖分子？植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中加入蔗糖便是蔗糖能被細(xì)胞吸收的佐證。植物組織培養(yǎng)實驗中，植物細(xì)胞對蔗糖的利用方式可能是次級主動轉(zhuǎn)運，即利用主動轉(zhuǎn)運的ATP酶和質(zhì)子泵建立的質(zhì)子濃度梯度進行物質(zhì)運輸。主要過程是：質(zhì)子泵把細(xì)胞內(nèi)的H+泵出，導(dǎo)致細(xì)胞外H+濃度較高，建立細(xì)胞內(nèi)外的H+濃度梯度；蔗糖-質(zhì)子共運輸載體順H+濃度梯度把H+和蔗糖分子運輸進入細(xì)胞，即協(xié)同轉(zhuǎn)運(圖2)[3]。

圖2 植物細(xì)胞膜上H+驅(qū)動協(xié)同轉(zhuǎn)運蔗糖分子

3 光合作用中的H+

光合作用的光反應(yīng)是在葉綠體的類囊體膜上進行的，類囊體膜上光系統(tǒng)II利用光能氧化水和還原質(zhì)體醌。水裂解產(chǎn)生電子、氧氣和H+，其中H+釋放到類囊體腔中。還原質(zhì)體醌時利用葉綠體基質(zhì)中的H+，其電子傳遞后將H+釋放到類囊體腔中。這種類囊體內(nèi)高外低的H+濃度差導(dǎo)致H+順濃度梯度出膜，在ATP合酶催化下，ADP和Pi生成ATP[3]。同時，光系統(tǒng)II的電子經(jīng)傳遞到達光系統(tǒng)I，光系統(tǒng)I吸收光能，最終將電子傳給NADP+，結(jié)合H+生成NADPH。NADPH是一種強還原劑，是碳反應(yīng)中利用的能源物質(zhì)。

4 細(xì)胞呼吸中的H+

需氧呼吸包括三個階段：糖酵解、檸檬酸循環(huán)和電子傳遞鏈。①糖酵解是在細(xì)胞溶膠中進行的一系列反應(yīng)，將1個葡萄糖分子最終分解為2個丙酮酸分子，最終凈產(chǎn)生2個ATP分子。2個電子載體NAD+(煙酰胺腺嘌呤二核苷酸)接受2個電子后被還原為2個NADH和2個H+。在缺氧狀態(tài)下，含有乳酸脫氫酶的細(xì)胞中，丙酮酸被NADH和H+還原為乳酸；含有丙酮酸脫羧酶的細(xì)胞中，丙酮酸在丙酮酸脫氫酶作用下生成乙醛，乙醛在乙醛脫氫酶作用下，被NADH和H+還原為乙醇。②檸檬酸循環(huán)過程中亦發(fā)生NAD+被還原為 NADH和H+。③電子傳遞鏈存在于線粒體內(nèi)膜上，由3種蛋白質(zhì)復(fù)合體組成。NADH和FADH2在電子傳遞鏈的上游釋放出電子，隨后電子從膜上的蛋白質(zhì)一步一步地傳遞到末端，并逐步釋放能量，同時蛋白質(zhì)復(fù)合體利用這些能量將線粒體基質(zhì)中的H+轉(zhuǎn)移到線粒體內(nèi)外膜間隙中，形成內(nèi)膜兩側(cè)的H+濃度差?？鐑?nèi)膜的H+濃度差為ATP的合成提供了能量，如同光合作用中類囊體膜上的質(zhì)子泵。電子傳遞鏈下游最終的電子受體是氧，細(xì)胞呼吸到最后一步才用到氧，氧接受4個H+和4個電子，生產(chǎn)2分子水[4]。

5 植物生長素與H+

植物生長素(IAA)促進細(xì)胞生長的機理是什么呢？為什么IAA進行極性運輸呢？這些都與H+有關(guān)。

酸生長假說能說明生長素促進細(xì)胞伸長生長。生長素使靶細(xì)胞通過主動轉(zhuǎn)運將H+從細(xì)胞質(zhì)到細(xì)胞壁中，使細(xì)胞壁的pH降低，活化相關(guān)酶，使細(xì)胞壁松弛，從而增強細(xì)胞滲透吸水能力，液泡增大，細(xì)胞伸長。

生長素的極性運輸是指從植物體的形態(tài)學(xué)上端向下端運輸，化學(xué)滲透假說解釋了極性運輸?shù)臋C制。質(zhì)膜的質(zhì)子泵分解ATP，把H+從細(xì)胞質(zhì)主動運輸?shù)郊?xì)胞壁，因此細(xì)胞壁空間的pH較低，生長素在酸性環(huán)境中羧基不易解離，主要呈非解離型(IAAH)，較親脂，可通過擴散跨膜運輸。而陰離子型的IAA-通過載體與H+協(xié)同轉(zhuǎn)運進入細(xì)胞溶膠。這樣在細(xì)胞的頂部生長素通過擴散或載體的協(xié)助進入細(xì)胞溶膠，在細(xì)胞基部的質(zhì)膜上有生長素輸出載體，將IAA-輸出細(xì)胞。如此反復(fù)，形成了生長素的極性運輸(圖3)[3]。

圖3 IAA化學(xué)滲透極性擴散假說

H+的跨膜運輸有的與質(zhì)子泵有關(guān)。質(zhì)子泵分為兩種類型：即V-型質(zhì)子泵和F-型質(zhì)子泵。例如，在溶酶體膜、進行生長素極性運輸細(xì)胞的細(xì)胞膜上的質(zhì)子泵屬于V-型質(zhì)子泵，利用ATP水解供能把細(xì)胞溶膠中的H+逆濃度梯度泵入溶酶體、泵出細(xì)胞等，以維持細(xì)胞溶膠中pH中性。F-型質(zhì)子泵存在于細(xì)菌質(zhì)膜、線粒體內(nèi)膜和葉綠體類囊體膜上，H+順濃度梯度跨膜運輸，所釋放的能量將ADP和Pi合成為ATP[5]。