陳鵬典 黎杰運(yùn) 陳德寧 寧艷 劉芳 邱婷婷 尹紹鍇 林婉珊

加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈對少弱精子癥大鼠內(nèi)分泌的影響

陳鵬典 黎杰運(yùn) 陳德寧 寧艷 劉芳 邱婷婷 尹紹鍇 林婉珊

目的 探討加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈對少弱精子癥模型大鼠內(nèi)分泌的影響。方法 80只健康SD雄性大鼠, 隨機(jī)分為G1、G2、G3、G4組, G1組為正常對照組, G2組為少弱精子癥模型組, G3組為加味聚精食療方治療組, G4組為加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈組, 每組20只。采用免疫放射法檢測各組外周血睪酮(T)、促卵泡生成素(FSH)和促黃體生成素(LH)水平, 并測量各組睪丸的體積及其重量。結(jié)果 G2、G3、G4組的睪丸體積均明顯低于G1組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；G2、G3組的睪丸重量、T、FSH、LH水平均明顯低于G1組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；G3、G4組的睪丸體積、重量、T、FSH、LH水平均明顯高于G2組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；G4組的睪丸體積和重量、T、FSH、LH水平均明顯高于G3組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。結(jié)論 加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈具有協(xié)同效應(yīng), 可通過干預(yù)少弱精子癥大鼠外周血T、FSH和LH水平, 復(fù)蘇生殖功能, 提高其生育能力, 效果優(yōu)于單純加味聚精食療方。

加味聚精食療方；督脈；電針；少弱精子癥；內(nèi)分泌

不育癥是男科臨床的常見病, 也是當(dāng)今全球生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的熱題難題。少弱精子癥是導(dǎo)致男性不育的重要原因之一, 而各種病因引起少弱精子癥的機(jī)制尚未完全闡明。前期研究［1,2］表明, 加味聚精食療方可有效改善少弱精子癥大鼠曲細(xì)精管組織結(jié)構(gòu)的受損狀態(tài), 提高其附睪中的精子密度、a級精子和精子總活率(a+b+c級), 而其機(jī)制可能與上調(diào)大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞表皮生長因子(EGF)及其受體(EGFR)的表達(dá)水平有關(guān)［3］。傳統(tǒng)中醫(yī)理論認(rèn)為, 督脈為“陽脈之?！? 主陽主氣, 可能通過溫煦作用來調(diào)節(jié)精子成熟和促進(jìn)其生精功能。本研究通過加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈對模型大鼠進(jìn)行干預(yù), 旨在觀察其外周血性激素水平的改變, 為未來針?biāo)幗Y(jié)合治療少弱精子癥提供前沿的思路和研究基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物 本研究動物為健康S D雄性大鼠, 共80只,來源于廣東省醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心, 體重約200 g。將80只大鼠隨機(jī)分為G 1、G 2、G 3、G 4組, G 1組為正常對照組, G 2組為少弱精子癥模型組, G 3組為加味聚精食療方治療組, G 4組為加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈組, 每組20只。

1.2 實(shí)驗(yàn)用藥及試劑 雷公藤多苷片(遠(yuǎn)大醫(yī)藥黃石飛云制藥有限公司, 生產(chǎn)批號20150617, 國藥準(zhǔn)字Z 42021212)；T、F S H和L H放射免疫分析藥盒(天津九鼎醫(yī)學(xué)生物工程有限公司)；加味聚精食療方［深圳市中醫(yī)院制劑室制備, 20ml/(k g·d)連續(xù)灌胃26 d］。

1.3 動物模型制備 除了G 1組外, 其他組均采用雷公藤多苷片加雙蒸水配成5mg/m l的懸混液, 以懸混液20mg/k g連續(xù)給予灌胃26 d造成少弱精子癥模型。G 3組給予加味聚精食療方6.3g/kg連續(xù)灌胃治療26 d, 1次/d。G 4組給予加味聚精食療方6.3 g/kg連續(xù)灌胃聯(lián)合電針治療26 d, 1次/d。穴位選用督脈經(jīng)穴命門、腰陽關(guān)和十七椎。采用電針儀疏密波刺激(疏波30Hz, 密波100Hz), 強(qiáng)度6～15 V, 以身體相應(yīng)部位出現(xiàn)輕微顫動為準(zhǔn), 持續(xù)20min。

1.4 取材 受試大鼠在干預(yù)治療26 d后稱重, 股主動脈抽血, 4℃冰箱暫時保存。以5%水合氯醛腹腔注射(3ml/kg)麻醉, 剖開腹腔, 在無菌條件下快速取出大鼠雙側(cè)睪丸稱重,放入盛有2ml蒸餾水的10ml量杯中, 其杯水增加容積即為睪丸體積。

1.5 檢測 采用免疫放射法檢測各組外周血T、FSH和L H水平, 并測量各組睪丸的體積及其重量。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示, 采用單因素方差分析比較。對資料方差齊性進(jìn)行Levene檢驗(yàn), 按α=0.10水準(zhǔn), 若方差齊, 則應(yīng)用least significant difference t檢驗(yàn)(LSD-t檢驗(yàn))；若方差不齊, 則應(yīng)用Cochran & Cox近似t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

G2、G3、G4組的睪丸體積均明顯低于G1組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；G2、G3組的睪丸重量、T、FSH、LH水平均明顯低于G1組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)； G3、G4組的睪丸體積和重量、T、FSH、LH水平均明顯高于G2組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；G4組的睪丸體積和重量、T、FSH、LH水平均明顯高于G3組, 差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。見表1。

表1 四組大鼠睪丸體積、重量以及外周血T、F S H、L H水平比較()

表1 四組大鼠睪丸體積、重量以及外周血T、F S H、L H水平比較()

注：與G 1組比較,aP＜0.01；與G 2組比較,bP＜0.01；與G 3組比較,cP＜0.01

組別 只數(shù)睪丸體積(m l)睪丸重量(g)T(n m o l/L)F S H(U/L)L H(U/L) G 1組203.66±0.213.61±0.2125.23±2.745.59±0.515.50±0.57 G 2組202.10±0.17a2.13±0.23a11.21±0.54a2.52±0.44a2.52±0.31aG 3組20 2.74±0.13ab3.07±0.18ab20.75±1.34ab4.42±0.48ab4.56±0.53abG 4組20 3.36±0.18abc3.48±0.11bc24.70±2.62bc5.64±0.45bc5.70±0.37bc

3 討論

目前, 發(fā)達(dá)國家約有5%～8%的夫婦受到不育癥的影響,發(fā)展中國家一些地區(qū)不育癥的患病率高達(dá)30%［4］。少弱精子癥是導(dǎo)致男性不育的重要原因之一, 而各種病因引起少弱精子癥的機(jī)制尚未完全闡明。近年來研究顯示, 男性精液質(zhì)量隨不同年代急劇下降, 不但給患者造成極大的心理壓力和創(chuàng)傷, 甚至?xí)绊懙交橐觥⒓彝ズ蜕鐣确矫妫?］。

加味聚精食療方的組成部分主要包括魚鰾、龜板膠、枸杞、人參和瘦豬肉, 選藥精煉, 組方嚴(yán)謹(jǐn), 脾腎同治, 藥食結(jié)合, 口感頗佳［6-9］。督脈起于胞中, 下出會陰, 為生命之所系, 一身元?dú)庵冢?0］。臨床上, 督脈經(jīng)穴如命門、腰陽關(guān)、十七椎等治療不育癥也多用醫(yī)家涉臘。從西醫(yī)生理學(xué)和解剖學(xué)角度上看, 以上三穴都位于腰骶部, 骶叢神經(jīng)分布較為豐富, 深部是脊髓中樞。針刺以上穴位可能通過刺激脊神經(jīng)中樞而作用于丘腦下部-垂體-睪丸軸, 促進(jìn)其對性腺激素的產(chǎn)生和調(diào)節(jié), 從而通過干預(yù)性激素的釋放而改善精子質(zhì)量。

綜上所述, 加味聚精食療方聯(lián)合電針督脈具有協(xié)同效應(yīng),可通過干預(yù)少弱精子癥大鼠外周血T、FSH和LH水平, 復(fù)蘇生殖功能, 提高其生育能力, 且效果優(yōu)于單純加味聚精食療方。

［1］ 陳慰填, 陳德寧, 覃湛, 等.加味聚精食療湯對少精弱精癥大鼠曲細(xì)精管結(jié)構(gòu)改善的實(shí)驗(yàn)研究.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2009(9):178-180.

［2］ 陳慰填, 陳德寧, 覃湛, 等.加味聚精食療湯對少精、弱精癥大鼠附睪中精子質(zhì)量影響的實(shí)驗(yàn)研究.新中醫(yī), 2009(4):96-98.

［3］ 陳德寧, 洪志明, 周文彬, 等.加味聚精食療方對少、弱精子癥大鼠EGF、EGFR睪丸內(nèi)表達(dá)的影響.世界中西醫(yī)結(jié)合雜志, 2011, 6(11):940-943.

［4］ Kleiman SE, Almog R, Yogev L, et al.Screening for partial AZFa microdeletions in the Y chromosome of infertile men: is it of clinical relevance? Journal of Urology, 2012, 98(1):43-47.

［5］ Abolfotouh MA, Alabdrabalnabi AA, Albacker RB, et al.Knowledge, attitude, and practices of infertility among Saudi couples.International Journal of General Medicine, 2013, 6(default):563-573.

［6］ 陳德寧, 覃湛, 馬慶輝, 等.加味聚精食療方對少精子癥患者精子質(zhì)量的影響.南京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào), 2007, 23(3):184-185.

［7］ 洪志明.加味聚精食療方治療脾腎兩虛型少精子癥的臨床及實(shí)驗(yàn)研究.廣州中醫(yī)藥大學(xué), 2010.

［8］ 任曉艷, 洪志明, 洪金標(biāo), 等.加味聚精食療方配合護(hù)理干預(yù)對少弱精子癥病人的影響.護(hù)理研究, 2013, 27(17):1732-1733.

［9］ 洪志明, 陳德寧, 王全, 等.加味聚精食療方對DS動物模型精子質(zhì)量及睪丸組織中CR16表達(dá)的影響.中華中醫(yī)藥學(xué)刊, 2015(11):2690-2693.

［10］ 陳鵬典, 楊卓欣, 黎杰運(yùn), 等.任督脈與孕育的相關(guān)性探析.中國民族民間醫(yī)藥, 2016, 25(13):49-50.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.16.115

2017-06-05］

深圳市科技計(jì)劃基礎(chǔ)研究項(xiàng)目(項(xiàng)目編號：JCYJ20150402090413003)

518028 深圳市婦幼保健院(陳鵬典 寧艷 劉芳邱婷婷)；北京大學(xué)深圳醫(yī)院(黎杰運(yùn))；廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬深圳市中醫(yī)院(陳德寧 尹紹鍇 林婉珊)

黎杰運(yùn)