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      發(fā)酵豆粕對(duì)斷奶~2月齡肉兔生長(zhǎng)發(fā)育、血清生化及腸道發(fā)育的影響

      2017-09-09 08:47:34孫海濤楊麗萍姜文學(xué)麻名文孫作為白莉雅高淑霞
      山東農(nóng)業(yè)科學(xué) 2017年8期
      關(guān)鍵詞:生長(zhǎng)性能

      孫海濤+楊麗萍+姜文學(xué)+麻名文+孫作為+白莉雅+高淑霞

      摘要:為研究飼糧不同發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔生長(zhǎng)性能、血清指標(biāo)及腸道發(fā)育的影響,選用平均體重為(748±50)g的斷奶肉兔150只,隨機(jī)分成5組,各組間初始體重?zé)o顯著差異,分別飼喂在基礎(chǔ)飼糧中添加0(對(duì)照)、3%、6%、9%和12%發(fā)酵豆粕的試驗(yàn)飼糧,預(yù)試期7 d,正試期23 d。結(jié)果表明:飼糧發(fā)酵豆粕添加水平對(duì)平均日采食量(ADI)、平均日增重(ADG)、料肉比(F/G)無(wú)顯著影響(P>0.05)。對(duì)血清總蛋白、堿性磷酸酶含量無(wú)顯著影響(P>0.05),但血清尿素氮含量有下降趨勢(shì)(P=0.0562),對(duì)血清膽固醇含量影響顯著(P<0.05)。飼糧發(fā)酵豆粕添加水平對(duì)十二指腸絨毛高度、肥大細(xì)胞數(shù)量及乳酸菌、大腸桿菌含量影響顯著(P<0.05)。綜合本試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo),飼糧不同發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔的生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)顯著影響,但能顯著促進(jìn)其腸道發(fā)育,改善盲腸微生物菌群。

      關(guān)鍵詞:肉兔;發(fā)酵豆粕;生長(zhǎng)性能;血清指標(biāo);腸道發(fā)育

      中圖分類(lèi)號(hào):S829.15 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào):A 文章編號(hào):1001-4942(2017)08-0131-05

      Abstract This experiment was conducted to research the effects of fermented soybean meal on growth performance, serum biochemistry and intestinal development of weaner to 2-month-old growing meat rabbits. One hundred and fifty weanling meat rabbits with average body weight of (748±50) g were randomly divided into 5 groups. The rabbits in the 5 groups were fed experimental diets containing 0, 3%, 6%, 9% and 12% fermented soybean meal respectively. The experiment included a pretrial period of 7 days and an experimental period of 23 days. The results were as follows: dietary fermented soybean meal level had no significant influence on average daily feed intake (ADI), average daily gain (ADG) and ratio of feed to gain (F/G). Dietary fermented soybean meal level significantly affected the contents of serum cholesterol (CHO) (P<0.05), but had no significant influence on total protein (TP) and alkaline phosphatase (AKP) (P>0.05). With the increase of fermented soybean meal level, the serum urine nitrogen (SUN) showed a down trend (P=0.0562). The dietary fermented soybean meal level also had significant effect on villous height of duodenum, mast cell number, lactobacillus and colibacillus (P<0.05). In conclusion, the dietary fermented soybean meal level had no significant influence on growing performance, but could promote the intestine development and improve the microbial population status of weaner to 2-month-old meat rabbits.

      Keywords Meat rabbit; Fermented soybean meal; Growing performance; Serum index; Intestinal development

      作為主要植物性蛋白質(zhì)原料的豆粕,含有多種抗?fàn)I養(yǎng)因子,影響其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用。發(fā)酵豆粕利用現(xiàn)代生物工程技術(shù),將豆粕中大分子蛋白質(zhì)酶解成多肽、小肽及游離氨基酸,并可產(chǎn)生大量的益生菌、寡肽、乳酸、谷氨酸、維生素以及未知生長(zhǎng)因子等物質(zhì),某些小肽還具有特殊的生理作用[1]。目前,發(fā)酵豆粕對(duì)提高仔豬及肉仔雞的生產(chǎn)性能和養(yǎng)分消化率、改善微生態(tài)菌群、提高抗氧化能力等方面的報(bào)道較多,但發(fā)酵豆粕對(duì)于幼齡肉兔生長(zhǎng)發(fā)育各方面影響的研究鮮見(jiàn)報(bào)道。本試驗(yàn)旨在通過(guò)肉兔飼糧添加不同水平發(fā)酵豆粕,研究其對(duì)斷奶~2月齡肉兔生長(zhǎng)性能、血清指標(biāo)及腸道發(fā)育方面的影響。

      1 材料與方法

      1.1 試驗(yàn)飼糧

      基礎(chǔ)飼糧參照NRC(1977)肉兔飼養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)配制而成,飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。在基礎(chǔ)飼糧中分別添加0(對(duì)照)、3%、6%、9%和12%發(fā)酵豆粕(由山東和實(shí)集團(tuán)公司提供,粗蛋白≥48%,水溶蛋白≥10%,有機(jī)酸≥3.5%),制成5種試驗(yàn)飼糧。

      1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理endprint

      選用150只體重(748±50) g的斷奶伊拉肉兔,隨機(jī)分為5組,各組間體重差異不顯著,每組15個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)2只兔子,分別飼喂以上5種試驗(yàn)飼糧,預(yù)試期7 d,正式期23 d。試驗(yàn)兔每籠2只進(jìn)行飼養(yǎng),自由采食、飲水,常規(guī)免疫程序,自然采光、通風(fēng)。

      1.3 樣品的采集與制備

      試驗(yàn)開(kāi)始后第30 d早晨空腹稱重后每組選取6只試驗(yàn)兔心臟采血10 mL,室溫避光靜置30 min后,3 000 r/min離心10 min,分離所得血清分裝于Eppendorf管中,置于-20℃冷凍保存待測(cè)。試驗(yàn)兔采血后屠宰取胸腺及脾臟并稱重。取盲腸內(nèi)容物稱重,并取部分內(nèi)容物于凍存管中液氮冷凍備測(cè)。

      1.4 測(cè)定指標(biāo)和方法

      1.4.1 生產(chǎn)性能指標(biāo) 測(cè)定斷奶和飼養(yǎng)試驗(yàn)結(jié)束時(shí)試驗(yàn)兔體重,并統(tǒng)計(jì)斷奶~2月齡試驗(yàn)兔的采食量,計(jì)算平均日采食量(ADI)、平均日增重(ADG)和料肉比(F/G)。

      1.4.2 血清生化指標(biāo)的測(cè)定 血清中堿性磷酸酶(AKP)、白蛋白(ALP)、總蛋白(TP)、尿素氮(BUN)和膽固醇(CHO)的測(cè)定采用日本和光提供的試劑盒檢測(cè),按說(shuō)明書(shū)操作,測(cè)定儀器采用日立7020型全自動(dòng)生化分析儀。

      1.4.3 腸道發(fā)育指標(biāo) ①十二指腸切片制作與觀察:統(tǒng)一取幽門(mén)下5 cm處十二指腸,磷酸鹽緩沖液洗干凈,置于固定液[卡諾氏(Carnoys)]中固定4 h,經(jīng)脫水、透明、石蠟包埋,切片4~6 μm;采用蘇木精-伊紅(HE)染色觀察十二指腸絨毛高度,采用甲苯胺藍(lán)染色觀察肥大細(xì)胞數(shù)量。顯微鏡觀察并拍照,應(yīng)用Image-Pro Plus 6.0軟件對(duì)每張照片進(jìn)行分析得出每張照片上十二指腸絨毛高度及對(duì)應(yīng)絨毛上肥大細(xì)胞數(shù)量。

      ②盲腸微生物培養(yǎng)試驗(yàn):無(wú)菌取盲腸內(nèi)容物1 g于裝有99 mL滅菌生理菌水及玻璃珠的錐形瓶中,稀釋均勻后取該稀釋液0.5 mL加入盛有4.5 mL滅菌生理鹽水的試管中,依次進(jìn)行10-3~10-7稀釋。乳酸菌和大腸桿菌經(jīng)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)后采用平板計(jì)數(shù)法進(jìn)行計(jì)數(shù)。

      1.5 數(shù)據(jù)處理

      采用SAS 9.4統(tǒng)計(jì)軟件中的GLM進(jìn)行方差分析,分別以P<0.05和P>0.05作為差異顯著和不顯著的判斷標(biāo)準(zhǔn)。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 飼糧發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔生長(zhǎng)性能的影響

      由表2可知,在初始體重?zé)o顯著差異的情況下,飼糧中不同發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡伊拉肉兔平均日采食量(ADI)、平均日增重(ADG)及料重比(F/G)影響均不顯著(P>0.05)。

      2.2 飼糧發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔血清指標(biāo)的影響

      由表3可知,飼糧不同發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔的血清總蛋白(TP)及堿性磷酸酶(AKP)含量的影響差異不顯著(P>0.05);對(duì)斷奶~2月齡伊拉肉兔的血清膽固醇(CHO)含量影響顯著(P<0.05), 9%和12%發(fā)酵豆粕添加組CHO水平顯著低于對(duì)照組并在12%添加組水平達(dá)到最低;飼糧不同發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡伊拉肉兔的血清尿素氮(SUN)含量影響不顯著(P=0.0562),但隨著發(fā)酵豆粕添加水平的提高,尿素氮含量呈下降趨勢(shì)。

      2.3 飼糧發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔腸道發(fā)育的影響

      由表4可知,飼糧不同發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔的十二指腸絨毛高度影響顯著(P<0.05),其中6%、9%和12%發(fā)酵豆粕組顯著高于對(duì)照組;對(duì)肥大細(xì)胞數(shù)量影響顯著(P<0.05),其中9%及12%發(fā)酵豆粕組肥大細(xì)胞數(shù)量顯著高于對(duì)照組,并在9%發(fā)酵豆粕添加組數(shù)量達(dá)到最大。

      2.4 飼糧發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔盲腸微生物的影響

      由表5可知,飼糧不同發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔的盲腸內(nèi)容物大腸桿菌含量影響差異顯著(P<0.05),6%、9%及12%發(fā)酵豆粕添加組盲腸大腸桿菌含量顯著低于對(duì)照組;對(duì)盲腸內(nèi)容物乳酸菌含量影響差異顯著(P<0.05),隨著發(fā)酵豆粕添加水平的提高,乳酸菌含量升高,3%和6%發(fā)酵豆粕添加組顯著高于對(duì)照組,9%及12%發(fā)酵豆粕添加組顯著高于對(duì)照組、3%和6%添加組。

      3 討論

      3.1 發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔生長(zhǎng)性能的影響

      豆粕是一種植物性蛋白飼料,被廣泛用于工業(yè)中,但其中存在許多抗?fàn)I養(yǎng)因子,會(huì)降低動(dòng)物對(duì)其營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和利用。相比豆粕,發(fā)酵豆粕不僅能夠降低豆粕中存在的抗?fàn)I養(yǎng)因子如大豆抗原、蛋白酶抑制因子的含量;而且豆粕經(jīng)微生物發(fā)酵后酶解成小分子蛋白質(zhì)、肽類(lèi)和氨基酸等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),能提高機(jī)體蛋白質(zhì)的合成和飼料氨基酸的利用率。研究發(fā)現(xiàn),仔豬飼料中添加發(fā)酵豆粕能促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)[2]。而李云蘭等[3]發(fā)現(xiàn),發(fā)酵豆粕替代豆粕飼喂鯉魚(yú)后對(duì)鯉魚(yú)的飼料系數(shù)和特定生長(zhǎng)率都沒(méi)有產(chǎn)生顯著影響,表明豆粕發(fā)酵后對(duì)鯉魚(yú)的生長(zhǎng)性能沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用。本試驗(yàn)研究表明,3%、6%、9%和12%的發(fā)酵豆粕替代豆粕對(duì)斷奶~2月齡肉兔的ADI、ADG和F/G均無(wú)顯著影響,3%、6%、9%和12%的發(fā)酵豆粕替代比例對(duì)斷奶~2月齡肉兔生長(zhǎng)性能沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用。

      3.2 發(fā)酵豆粕添加水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔血清指標(biāo)的影響

      血清生化指標(biāo)是評(píng)定畜禽營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化代謝及其機(jī)能的重要指標(biāo)[4]。血清總蛋白含量是對(duì)動(dòng)物機(jī)體蛋白質(zhì)代謝狀況的有效反映,血清總蛋白含量高則說(shuō)明蛋白在體內(nèi)的沉積較多,可供給動(dòng)物機(jī)體的蛋白質(zhì)也多。發(fā)酵豆粕完全代替普通豆粕配制肉雞飼料,結(jié)果血清總蛋白并無(wú)顯著差異[5,6]。這與本試驗(yàn)的結(jié)果相一致,本試驗(yàn)中,不同添加比例發(fā)酵豆粕飼喂的肉兔各組血清總蛋白含量無(wú)顯著差異。

      作為衡量飼糧氨基酸平衡的一個(gè)風(fēng)向標(biāo),血清尿素氮直接反映了機(jī)體蛋白質(zhì)分解代謝和營(yíng)養(yǎng)水平[7]。血清尿素氮水平越高則表明蛋白質(zhì)分解加強(qiáng),氮的利用率越低;血清尿素氮水平越低則表明蛋白質(zhì)分解減弱,機(jī)體內(nèi)氮的利用率越高。 本試驗(yàn)中,各處理組間血清尿素氮差異不顯著但與對(duì)照組相比,隨著發(fā)酵豆粕替代水平的升高,尿素氮呈下降趨勢(shì),表明發(fā)酵豆粕在一定程度上可以提高肉兔的氮利用率。endprint

      堿性磷酸酶與動(dòng)物成骨細(xì)胞活性的高低有著密切關(guān)系,堿性磷酸酶活性高則可促進(jìn)骨膠原蛋白和骨鹽沉積,進(jìn)而促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng)發(fā)育。本試驗(yàn)中,各試驗(yàn)組堿性磷酸酶活性與對(duì)照組相比均無(wú)顯著差異。

      血清膽固醇反映了機(jī)體對(duì)脂類(lèi)的利用情況,膽固醇水平越低則表明機(jī)體對(duì)脂肪的利用率越高[8],本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加發(fā)酵豆粕能降低血清中膽固醇含量,表明發(fā)酵豆粕能降低血清膽固醇含量,提高肉兔機(jī)體對(duì)脂肪的利用率。

      3.3 發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔腸道發(fā)育影響

      作為養(yǎng)分吸收的主要場(chǎng)所,小腸絨毛結(jié)構(gòu)良好是養(yǎng)分消化吸收和動(dòng)物正常生長(zhǎng)的生理學(xué)基礎(chǔ)[9]。小腸絨毛高度與絨毛上細(xì)胞數(shù)量呈顯著正相關(guān),絨毛越高成熟細(xì)胞越多,而只有成熟的絨毛細(xì)胞才具有吸收養(yǎng)分的功能,所以絨毛越高則說(shuō)明機(jī)體對(duì)養(yǎng)分的吸收能力越強(qiáng)[10],絨毛高度下降則說(shuō)明吸收功能降低[11]。發(fā)酵豆粕能提高小腸絨毛高度,有效改善仔豬小腸絨毛結(jié)構(gòu)[12,2]。本試驗(yàn)中,6%、9%和12%發(fā)酵豆粕替代組的絨毛高度顯著高于對(duì)照組,說(shuō)明發(fā)酵豆粕能夠提高絨毛高度,有效改善肉兔小腸絨毛結(jié)構(gòu)。

      肥大細(xì)胞遍布在所有組織中[13],其在炎癥反應(yīng)和速發(fā)型過(guò)敏反應(yīng)中扮演重要角色[14,15],同時(shí)還參與抵御細(xì)菌感染的免疫反應(yīng)并且與病毒感染有直接關(guān)系[16]。正常劑量的鋅硒對(duì)照組中肉雞腸道黏膜結(jié)構(gòu)完整且肥大細(xì)胞數(shù)量較多,而過(guò)高或過(guò)低的鋅硒處理組肉雞腸道黏膜結(jié)構(gòu)受損且肥大細(xì)胞數(shù)量減少[17]。王文利等[18]發(fā)現(xiàn),大蒜溶液飼喂小鼠能夠增加小鼠腸道肥大細(xì)胞數(shù)量。本試驗(yàn)結(jié)果表明,9%和12%發(fā)酵豆粕替代組的肉兔腸道肥大細(xì)胞數(shù)量顯著高于對(duì)照組,說(shuō)明提高肉兔飼料中發(fā)酵豆粕的比例可顯著提高腸道中肥大細(xì)胞的數(shù)量,從而改善肉兔的腸道免疫功能。

      3.4 發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔盲腸微生物的影響

      動(dòng)物體內(nèi)最大和最復(fù)雜的微生態(tài)系統(tǒng)是胃腸道微生物生態(tài)系統(tǒng),隨著動(dòng)物年齡的增長(zhǎng)、營(yíng)養(yǎng)變化等因素的影響,胃腸道微生物菌群發(fā)生著不同變化,健康動(dòng)物胃腸道菌群自身以及與動(dòng)物機(jī)體之間始終處于一種動(dòng)態(tài)平衡中。動(dòng)物胃腸道菌群的穩(wěn)定和平衡對(duì)動(dòng)物機(jī)體的生理功能具有重要作用,對(duì)宿主健康具有深遠(yuǎn)影響[19]。動(dòng)物胃腸道菌群大體可以分為有益菌、有害菌和條件致病菌三大類(lèi)。當(dāng)有益菌和有害菌數(shù)量在比例范圍內(nèi)存在于胃腸道部位時(shí)則不會(huì)引起疾病,此情況下有益菌和有害菌屬于腸道正道菌群[20],腸道微生物菌群的穩(wěn)定對(duì)宿主健康有著重要作用[21],當(dāng)發(fā)生食物過(guò)敏或腹瀉時(shí),腸道菌群中乳酸菌會(huì)減少,而腸桿菌會(huì)增多[22]。研究發(fā)現(xiàn),發(fā)酵豆粕能改善黃羽肉雞的腸道微生物菌群和腸道粘膜免疫功能[23]。本試驗(yàn)結(jié)果表明,隨著發(fā)酵豆粕替代水平的提高,肉兔盲腸微生物中乳酸菌含量顯著增加,而大腸桿菌含量顯著減少,表明發(fā)酵豆粕能促進(jìn)肉兔盲腸中乳酸菌的生長(zhǎng)而抑制大腸桿菌的生長(zhǎng)。

      4 結(jié)論

      不同發(fā)酵豆粕水平對(duì)斷奶~2月齡肉兔的生長(zhǎng)發(fā)育無(wú)顯著影響,但能顯著促進(jìn)伊拉肉兔的腸道發(fā)育,改善盲腸微生物菌群。

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