李方華

（酒泉職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程系，甘肅酒泉 735000）

仙客來(lái)種子的無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn)

李方華

（酒泉職業(yè)技術(shù)學(xué)院生物工程系，甘肅酒泉 735000）

本文以仙客來(lái)種子為外植體進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，研究了硫酸處理、不同溫度的水處理、赤霉素處理對(duì)仙客來(lái)種子無(wú)菌萌發(fā)的影響。試驗(yàn)結(jié)果表明，用1moL/L硫酸處理仙客來(lái)種子40min和用40℃溫水浸種處理，仙客來(lái)種子無(wú)菌萌發(fā)效果相對(duì)較好。

仙客來(lái)；種子；組織培養(yǎng)

仙客來(lái)（Cyclamen persicum）為報(bào)春花科仙客來(lái)屬半耐寒多年生球莖類(lèi)草本植物，花色艷麗，花期約6個(gè)月，深受人們喜愛(ài)，具有較高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。采用植物組織培養(yǎng)的方法對(duì)仙客來(lái)進(jìn)行繁殖能夠保持其優(yōu)良性狀并具有較高繁殖率［1］，但在組培過(guò)程中，種子無(wú)菌培養(yǎng)階段存在種子萌發(fā)率低的問(wèn)題，嚴(yán)重制約組培快繁。本試驗(yàn)通過(guò)研究不同處理方法對(duì)仙客來(lái)種子無(wú)菌培養(yǎng)的效果，以期尋找較好的解決方法。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

仙客來(lái)種子由蘭州昶榮園林有限公司提供。

1.2 試驗(yàn)方法

A組：用1moL/L硫酸溶液分別浸泡仙客來(lái)種子10min、20min、30min、40min、50min、60min，然后撈出種子，用蒸餾水浸種24h；B組：分別用30℃、40℃、50℃、60℃蒸餾水浸種5h，待水溫自然降至室溫后再浸種24h；C組：分別用20mg/kg、50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg、300mg/kg、400mg/kg赤霉素溶液浸種24h，然后用蒸餾水清洗數(shù)次，再用蒸餾水浸種24h。將各組處理的種子分別用70%酒精浸泡1min，用無(wú)菌水沖洗3次，然后用0.1%升汞溶液浸泡并震蕩8min，用無(wú)菌水沖洗6次。將處理過(guò)的種子用無(wú)菌濾紙吸干水分，無(wú)菌接種于MS培養(yǎng)基（3%蔗糖、0.5%瓊脂，pH值5.6～5.8）上。每瓶培養(yǎng)基接種3粒種子，培養(yǎng)溫度15～20℃，觀察種子萌發(fā)情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 1moL/L硫酸溶液浸種不同時(shí)間對(duì)仙客來(lái)種子萌發(fā)的影響（A組）

由表1可知，用1moL/L硫酸溶液浸泡仙客來(lái)種子，處理時(shí)間不同，種子的發(fā)芽率有所不同，處理40min，仙客來(lái)種子發(fā)芽率較高，這可能是硫酸處理后仙客來(lái)種子增強(qiáng)了透性。

表1 1moL/L硫酸溶液浸種不同時(shí)間仙客來(lái)種子的發(fā)芽率

2.2 不同溫度浸種對(duì)仙客來(lái)種子萌發(fā)的影響（B組）

由表2可知，不同溫度浸種對(duì)仙客來(lái)種子的萌發(fā)影響不同，用40℃溫水浸種效果最好，萌發(fā)率達(dá)70%，隨著溫度的升高，種子萌發(fā)率下降，可能是溫度過(guò)高損傷了種胚。

表2 不同溫度浸種仙客來(lái)種子的發(fā)芽率

2.3 不同濃度赤霉素溶液對(duì)仙客來(lái)種子萌發(fā)的影響（C組）

由表3可知，不同濃度的赤霉素溶液處理對(duì)仙客來(lái)種子萌發(fā)的影響不同，濃度為100mg/kg時(shí)，種子萌發(fā)效果相對(duì)較好，為23%，隨著濃度的升高，種子的萌發(fā)率并沒(méi)有提高。

表3 不同濃度赤霉素溶液浸種仙客來(lái)種子的發(fā)芽率

3 小結(jié)

仙客來(lái)種子種皮較厚，胚根不易突破種皮，在發(fā)芽過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生休眠［2］。試驗(yàn)結(jié)果表明，采用一定濃度的硫酸溶液處理和溫水浸種可提高仙客來(lái)種子的萌發(fā)率，原因可能是處理后消減了種皮對(duì)萌發(fā)的阻礙；用100mg/kg赤霉素溶液處理也可提高仙客來(lái)種子的萌發(fā)率，但是效果不夠理想。仙客來(lái)種子無(wú)菌萌發(fā)率不高可能是多方面綜合影響的結(jié)果，還需要進(jìn)一步開(kāi)展相關(guān)試驗(yàn)進(jìn)行分析和研究。

［1］余會(huì)寧.仙客來(lái)的離體無(wú)性試管繁殖研究［J］.氨基酸和生物資源，2001，23（3）：21～23。

［2］王娟.仙客來(lái)種子萌發(fā)的研究［J］.山東農(nóng)業(yè)科技，2007（3）：21.