周游，胥國強，蒲澤宴，李祥坤

（四川省遂寧市中心醫(yī)院 檢驗科，四川 遂寧 629000）

青年原發(fā)高尿酸血癥氧化應激與炎癥的關系研究*

周游，胥國強，蒲澤宴，李祥坤

（四川省遂寧市中心醫(yī)院 檢驗科，四川 遂寧 629000）

目的分析青年原發(fā)高尿酸血癥氧化應激與炎癥的關系。方法選取青年原發(fā)高尿酸血癥患者64例為高尿酸（HUA）組，健康體檢者60例為對照組，檢測血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、白介素6（IL-6）、腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平。結果HUA組MDA、IL-6、TNF-α高于對照組，SOD低于對照組（P＜0.05）；血清尿酸水平與MDA、IL-6、TNF-α呈正相關，與SOD呈負相關（P＜0.05）；MDA與IL-6、TNF-α呈正相關（P＜0.05），SOD與IL-6、TNF-α呈負相關（P＜0.05）；尿酸、MDA及SOD是IL-6、TNF-α的影響因素（P＜0.05）。結論青年原發(fā)高尿酸血癥患者體內(nèi)呈氧化應激及微炎癥狀態(tài)，而患者體內(nèi)炎癥應答可能與高尿酸引起的氧化應激反應有關。

青年患者；高尿酸血癥；氧化應激；炎癥反應

隨著人類生活水平提高及膳食結構改變，加之遺傳、環(huán)境因素的影響，高尿酸血癥的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈逐步升高的趨勢[1]。流行病學調查顯示，高尿酸血癥是心血管疾病、腦卒中發(fā)病及死亡的獨立危險因素[2-3]。氧化應激參與多種病理生理過程，尤其在炎癥應答中發(fā)揮類似“第二信使”的作用。既往研究證實，尿酸可以通過氧化應激反應來誘導炎癥反應[4]。本研究分析青年原發(fā)性高尿酸血癥氧化應激與炎癥的關系，以探討高尿酸（Hyperuricemia，HUA）可能的損傷機制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2015年1月-2016年1月四川省遂寧市中心醫(yī)院體檢中心體檢時發(fā)現(xiàn)的青年原發(fā)性高尿酸血癥患者64例為研究對象，作為HUA組。全為男性；年齡18～44歲，平均（29.3±8.5）歲。納入標準：①符合高尿酸血癥診斷標準，血清尿酸濃度≥416μmol/L；②納入患者均為男性，且無痛風性關節(jié)炎等臨床體征表現(xiàn)。排除標準：①未達高尿酸血癥診斷標準；②腎功能、肝功能、血脂譜、體重指數(shù)（body mass index，BMI）異常；③血糖、糖化血紅蛋白、糖耐量異常；④高血壓，嚴重肝、腎功能不全，伴自身免疫性疾病或惡性腫瘤；⑤急性感染或外傷等可致應激狀態(tài)等因素。另選取同等條件下健康體檢者60例作為對照組。全部為男性；年齡18～44歲，平均（28.8±9.3）歲。HUA組與對照組在年齡、肝腎功能、血壓、血糖、血脂譜、BMI等一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。本研究經(jīng)本院院倫理委員會同意，所有納入患者知曉本研究目的、意義及過程，簽署知情同意書。

1.2 方法

清晨取空腹靜脈血于促凝管，上下顛倒數(shù)次，靜置2 h，3 500 r/min離心5 min，取上層液體即為血清置于5 ml離心管，于-80℃冰箱冷凍保存待測。血清尿酸濃度于本院檢驗科全自動生化分析儀測定，試劑盒購自瑞士羅氏公司。血清丙二醛（Malondialdehyde，MDA）采用硫代巴比妥酸法，超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）采用黃嘌呤氧化酶法，試劑盒購自上海碧云天有限公司。酶聯(lián)免疫吸附試驗法測定血清白介素6（interleukin-6，IL-6）、腫瘤壞死因子α（tumour necrosis factor-α，TNF-α）水平，試劑盒購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司，WW100型酶標儀（德國西門子公司）。檢測當日實驗室溫度、濕度符合試劑盒說明書要求，所有操作嚴格按照試劑盒說明書進行。

1.3 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件，對數(shù)據(jù)進行正態(tài)性分析，顯示所得數(shù)據(jù)非正態(tài)分布，以M（P25，P75）表示，采用Wilcoxon符號秩和檢驗；相關性采用Spearman秩相關性分析；一般多元線性回歸分析炎癥指標影響因素，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組氧化應激指標比較

HUA組MDA為7.39 mmol/ml（5.16，10.27），對照組為4.12 mmol/ml（1.72，5.83），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（Z=2.503，P=0.020），HUA組高于對照組；HUA組SOD活性為768.9 u/L（1 020.4，562.2），對照組為978.6 u/L（692.3，1 367.1），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（Z=3.351，P=0.003），HUA組SOD活性低于對照組，提示HUA組患者存在氧化應激狀態(tài)。見圖1。

圖1 兩組氧化應激指標比較

2.2 兩組炎癥指標比較

HUA組IL-6為31.29 pg/ml（18.19，36.82），對照組為18.63 pg/ml[（11.76，27.21），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（Z=3.228，P=0.006），HUA組高于對照組；HUA組TNF-α為41.32 pg/ml（20.65，51.43），對照組為25.52 pg/ml（14.93，31.68），兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義（Z=3.596，P=0.001），HUA組高于對照組，提示HUA患者體內(nèi)存在炎癥狀態(tài)。見圖2。

2.3 血尿酸水平與氧化應激指標的相關性分析

高尿酸血癥患者尿酸濃度與MDA呈正相關（r= 0.730，P=0.000），與SOD活性呈負相關（r=-0.370，P=0.003）。見圖3。

圖2 兩組炎癥指標比較

圖3 血尿酸水平與氧化應激指標的相關性分析

2.4 血尿酸水平與炎癥指標的相關性分析

高尿酸血癥患者尿酸濃度與IL-6呈正相關（r= 0.302，P=0.015），與TNF-α呈正相關（r=0.459，P= 0.000）。見圖4。

圖4 血尿酸水平與炎癥指標的相關性分析

2.5 氧化應激與炎癥指標的相關性

高尿酸血癥患者MDA與IL-6、TNF-α呈正相關（r=0.445和0.264，P=0.001和0.035）；而SOD與 IL-6、TNF-α呈負相關（r=-0.598和-0.399，P=0.000和0.001）。見圖5、6。

圖5 M AD與炎癥指標的相關性分析

2.6 炎癥指標相關因素分析

以IL-6、TNF-α為因變量，以尿酸、MDA、SOD作為自變量進行一般多元線性回歸分析，結果顯示，尿酸、MDA及SOD是IL-6、TNF-α的獨立影響因素。見表1、2。

圖6 SO D與炎癥指標的相關性分析

表1 I L-6的相關因素分析

表2 TNF-α的相關因素分析

3 討論

尿酸是人體內(nèi)嘌呤類化學物質的終代謝產(chǎn)物，當體內(nèi)尿酸合成過量或者排泄發(fā)生障礙時，會導致尿酸在體內(nèi)蓄積而發(fā)生高尿酸血癥。高尿酸血癥是多種臨床疾病的起始或誘發(fā)因素，與代謝性疾病、心血管系統(tǒng)及腦血管系統(tǒng)等疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關[2-3，5]。尿酸作為內(nèi)源性刺激因子對血管內(nèi)皮細胞的炎癥損傷，被認為是高尿酸相關疾病的病理生理學基礎之一，而氧化應激反應在該過程中發(fā)揮重要作用[6]。氧化應激與機體最終的刺激應答有密切聯(lián)系，尤其是在炎癥應答和免疫應答等病理生理過程中扮演關鍵角色。在早期的研究中，尿酸被認為是抗氧化劑，有助于保護機體免受氧化應激反應損傷[7]。KUZKAYA等[8]在體外研究發(fā)現(xiàn)，尿酸可以通過清除一氧化氮NO來防止一氧化氮合酶被解偶聯(lián)，增加NO合成水平，以此來發(fā)揮尿酸的抗氧化作用，保護血管內(nèi)皮細胞免受氧化應激反應損傷。但是隨著研究的深入，發(fā)現(xiàn)高尿酸對血管內(nèi)皮細胞的損傷遠大于其帶來的抗氧化功效。WU等[9]研究發(fā)現(xiàn)，氧化應激通過不同產(chǎn)物來調控絲裂原活化蛋白激酶、細胞外調節(jié)蛋白激酶、核轉錄因子Kappa B等諸多信號通路，充當?shù)诙攀沟淖饔茫陨险{終端炎癥應答。既往的研究多聚焦于有臨床癥狀或者已經(jīng)合并其他疾病的中老年高尿酸血癥患者，青年高尿酸血癥患者因為多數(shù)無臨床癥狀而被忽略。但是據(jù)RESCHKE等[10]的報道，高尿酸血癥在3～19歲的青少年人群發(fā)病率逐漸增高，并且是青少年肥胖和心血管疾病的危險因素。表明青年高尿酸血癥也可能誘發(fā)相關疾病，但是在該階段患者體內(nèi)是否已經(jīng)存在氧化應激和炎癥應答，目前還鮮見研究及報道。

人體內(nèi)除尿酸之外，高血糖、高血脂，高血壓、高BMI及肝腎功能異常指標也可能導致氧化應激和炎癥應答。本研究為分析單純高尿酸對體內(nèi)氧化應激和炎癥應答的影響，在納入高尿酸血癥研究對象時便將這些因素排除在外。研究結果顯示，高尿酸血癥患者MDA高于健康體檢者，而SOD低于健康體檢者。MDA是機體內(nèi)氧自由基連鎖反應的產(chǎn)物，可以間接反應氧自由基生成和清除能力，而SOD作為人體內(nèi)重要的抗氧化活性物質，可以提高抗氧化酶活性，清除人體內(nèi)因代謝等因素不斷產(chǎn)生的氧自由基，以保護機體免受其損害。氧化應激本就是氧自由基生成能力大于其自身清除能力，而導致自由基在體內(nèi)蓄積的應激狀態(tài)[11]，是氧化與抗氧化系統(tǒng)失衡的結果。本研究中MDA含量增加與SOD活性下降，均提示青年高尿酸血癥患者體內(nèi)處于氧化應激狀態(tài)。高尿酸血癥可以導致心房顫動、非酒精性脂肪肝發(fā)生，增加血液透析患者死亡率，這都與高尿酸導致的氧化應激反應密不可分[12-14]。相關性分析發(fā)現(xiàn)，尿酸濃度與MDA呈正相關，與SOD呈負相關，進一步表明青年患者體內(nèi)高濃度尿酸可以導致氧化應激狀態(tài)，與上述研究[12-14]相符。

外周循環(huán)血中尿酸水平升高，可以激活白細胞與血管內(nèi)皮細胞的黏附及刺激作用，使血管內(nèi)皮細胞結構和功能發(fā)生紊亂，進一步導致炎癥因子如IL-1β、IL-10、細胞間黏附分子-1（intercellular cell adhesion molecule-1，ICAM-1）等的生成增加，形成炎癥反應的級聯(lián)效應，引起血管內(nèi)皮功能損傷的惡性循環(huán)。本研究結果顯示，高尿酸血癥患者體內(nèi)IL-6、TNF-α高于對照組，并且與尿酸濃度呈正相關，提示高尿酸可能導致青年患者體內(nèi)發(fā)生炎癥應答。尿酸通過對氧化應激反應產(chǎn)物及下游信號通路調控是其致炎癥應答途徑之一[9，15]。XIE等[16]在體外實驗發(fā)現(xiàn)，高濃度尿酸不僅可以引起人臍靜脈內(nèi)皮細胞（humanumbilical veinendothelialcells，HUVEC）IL-6、ICAM-1、TNF-α、單核細胞趨化蛋白-1等炎癥因子高表達，還可以增加HUVEC內(nèi)活性氧的生成量，表明尿酸誘導炎癥因子高表達可能與氧化應激反應相關。另一學者TAUSCHE等[17]通過別嘌醇、非布司他治療嚴重痛風性關節(jié)炎，在降低血尿酸水平后，患者體內(nèi)氧化應激指標（MDA和煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶）也隨之下降，提示氧化應激可能參與高尿酸的致炎作用。本研究進一步分析青年高尿酸血癥患者氧化應激與炎癥指標相關性，結果顯示，IL-6、TNF-α與MDA呈正相關，與SOD呈負相關。而多元線性回歸分析發(fā)現(xiàn)，尿酸、MDA及SOD可以影響IL-6、TNF-α水平。表明青年高尿酸血癥患者體內(nèi)存在的微炎癥狀態(tài)，可能與高尿酸誘發(fā)的氧化應激反應有一定關系。

綜上所述，本研究發(fā)現(xiàn)在無癥狀的青年原發(fā)性高尿酸血癥患者體內(nèi)存在微炎癥狀態(tài)，并且該炎癥應答可能與高尿酸誘發(fā)的氧化應激反應有一定關系，所以應該加強無癥狀青年高尿酸血癥患者的篩查，有助于對尿酸相關疾病積極預防。

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（童穎丹 編輯）

Relationship between oxidative stress and inflammatory response in young patients with primary hyperuricemia*

You Zhou,Guo-qiang Xu,Ze-yan Pu,Xiang-kun Li
(Department of Laboratory Medicine,Suining Central Hospital, Suining,Sichuan 629000,China)

ObjectiveTo analyze the relationships between oxidative stress indexes and inflammatory indexes in young patients with primary hyperuricemia.MethodsAsymptomatic young patients(64 cases)with primary hyperuricemia found during physical examination were selected as hyperuricemicgroup,60 healthy persons were selected as controlgroup.The levels of serum MDA,IL-6 and TNF-α and SOD activity were detected,and statistic analyses were carrid out.MethodsThe levels of MDA,IL-6 and TNF-α in the hyperuricemicgroup were significantly higher than those in the controlgroup(P＜0.05),and the SOD activity was significantly lower than that in the controlgroup (P＜0.05).The level of serum uric acid was positively correlated with MDA,IL-6 and TNF-α (P＜0.05),but negatively correlated with SOD (P＜0.05).The serum MDA level was positively correlated with IL-6 and TNF-α (P＜0.05).The SOD activity was negatively correlated with IL-6 and TNF-α (P＜0.05).Serum uric acid,MDA and SOD were the influencing factors of IL-6 and TNF-α (P＜0.05).ConclusionsThere are oxidative stress and micro-inflammatory state in young patients with hyperuricemia,and the inflammatory response may be related to the oxidative stress response induced by hyperuricemia.

young patient;hyperuricemia;oxidative stress;inflammatory response

R589

A

2016-09-14

四川省重點?？平ㄔO基金[No：（2015）328]；四川省衛(wèi)生和計劃生育委員會科研課題（No：17PJ067）

蒲澤宴，E-mail：1825361906@qq.com；Tel：18008258222

10.3969/j.issn.1005-8982.2017.20.012

1005-8982（2017）20-0060-05