易興友蔣美山李中偉呂 瑤劉曉燕趙 明顏宗家唐奇峰周 強

（1.重慶市開州區(qū)動物疫病預防控制中心，重慶 405400 2.重慶市開州區(qū)畜牧技術推廣站，重慶 405400 3.重慶市江北區(qū)鐵山坪畜牧獸醫(yī)站，重慶 400020 4.重慶市開州區(qū)渠口鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 405400 5.重慶市開州區(qū)鐵橋鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 405400）

桑葉粉對蛋雞禽流感和新城疫免疫效果的影響試驗

易興友1蔣美山2李中偉1呂 瑤1劉曉燕1趙 明3顏宗家4唐奇峰5周 強1

（1.重慶市開州區(qū)動物疫病預防控制中心，重慶 405400 2.重慶市開州區(qū)畜牧技術推廣站，重慶 405400 3.重慶市江北區(qū)鐵山坪畜牧獸醫(yī)站，重慶 400020 4.重慶市開州區(qū)渠口鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 405400 5.重慶市開州區(qū)鐵橋鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶 405400）

本試驗旨在探討桑葉粉對蛋雞禽流感和新城疫免疫效果的影響。試驗選擇體重相近、健康的1日齡商品蛋雛雞1600只，隨機分成4個組（即添加桑葉粉免疫組、添加桑葉粉不免疫組、不添加桑葉粉免疫組、不添加桑葉粉不免疫組），每組400只，添加桑葉粉試驗組從16日齡開始在日糧中添加1%桑葉粉進行飼喂，41～60日齡時添加量為2%，60～135日齡時添加3%，分別在15、27、45、60、75、90、105、120、135日齡隨機抽取各組30只試驗蛋雞的血清進行H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體檢測。135日齡時在400只添加桑葉粉免疫組中選擇體重相近、健康的商品蛋雞270只，隨機分成3個處理組，桑葉粉添加量分別為3%、5%、7%；在400只不添加桑葉粉免疫組中同樣挑選90只商品蛋雞作為對照組；3個處理組和對照組都設置3個重復，每個重復30只。在150～490的不同日齡隨機抽取各組雞血清30份，進行H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體檢測。監(jiān)測結果顯示：135日齡前添加桑葉粉免疫組、添加桑葉粉不免疫組、不添加桑葉粉免疫組、不添加桑葉粉不免疫組的H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體水平差異不顯著（P＞0.05）；135日齡后對照組與各處理組之間的H5亞型禽流感抗體水平差異不顯著（P＞0.05），285日齡、300日齡、415日齡7%處理組的新城疫免疫抗體水平顯著低于其他各組（P＜0.05），其他日齡各組之間差異不顯著（P＞0.05）。因此，總體來看，在蛋雞日糧中添加桑葉粉對禽流感和新城疫免疫效果均無顯著影響。

桑葉粉 蛋雞 禽流感 新城疫 免疫效果 飼料添加劑 抗體滴度

桑樹是一種食藥同源的植物，桑葉中富含多種礦物質和維生素，還含有黃酮類、多糖類、植物甾醇、1-脫氧野尻霉素等多種天然活性物質，這些物質不僅能夠維持動物的正常生長發(fā)育，而且可以提高動物免疫力和抗病力。近些年來，開州區(qū)部分規(guī)模養(yǎng)殖場發(fā)現(xiàn)添加飼料桑飼喂蛋雞，可增強蛋雞免疫能力。為進一步了解飼料桑對蛋雞免疫效果的影響，本試驗以京粉蛋雞為試驗對象，設計了不同比例的桑葉粉添加量，比較在日糧中不同比例桑葉粉對蛋雞H5亞型禽流感和新城疫免疫效果的影響，以期更好地指導養(yǎng)殖戶開展蛋雞免疫工作。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗桑葉粉來源于重慶海田林業(yè)科技有限公司飼料桑種植基地生產(chǎn)的桑葉粉。試驗蛋雞為開縣德佳牧業(yè)有限公司飼養(yǎng)的京粉蛋雞。禽流感疫苗：為重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型），遼寧益康生物股份有限公司生產(chǎn)，批號2015026；新城疫疫苗：浩和利（雞新城疫、傳染性支氣管炎二聯(lián)活疫苗），乾元浩生物股份有限公司生產(chǎn)，批號20141102；浩倍欣（雞新城疫活疫苗），乾元浩生物股份有限公司生產(chǎn)，批號20140901；另外還有乾元浩生物股份有限公司南京生物藥廠生產(chǎn)的雞新城疫（La Sota株）、傳染性支氣管炎（H52株）二聯(lián)活疫苗；乾元浩生物股份有限公司鄭州生物藥廠生產(chǎn)的雞新城疫、傳染性支氣管炎、禽流感（H9亞型）三聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+WD株），雞新城疫、傳染性支氣管炎、減蛋綜合征、禽流感（H9亞型）四聯(lián)滅活疫苗（La Sota株+M41株+AV-127株+S2株）等。該批試驗蛋雞在35日齡免疫重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型），分別在5、10、35、80、110、120日齡免疫新城疫聯(lián)苗。

診斷（檢測）試劑：禽流感病毒H5亞型血凝抑制試驗抗原，農(nóng)科院哈爾濱獸醫(yī)研究所生產(chǎn)，批號2015002；禽流感病毒H5亞型陽性血清，哈爾濱維科生物技術開發(fā)公司生產(chǎn)，批號2015010；雞新城疫血凝抑制試驗抗原，哈爾濱維科生物技術開發(fā)公司生產(chǎn)，批號2014M013；雞新城疫血凝抑制試驗陽性血清，哈爾濱動物生物制品國家工程研究中心有限公司生產(chǎn)，批號20150721。

1.2 方法

在重慶開縣德佳牧業(yè)有限公司蛋雞場選擇體重相近、健康的1日齡商品蛋雛雞1600只，分成4個組，每組400只（即添加桑葉粉免疫組、添加桑葉粉不免疫組、不添加桑葉粉免疫組、不添加桑葉粉不免疫組），添加桑葉粉試驗組從16日齡開始在蛋小雞料中添加1%桑葉粉進行飼喂，41日齡時改喂自配料，在41～60日齡時桑葉粉添加組添加桑葉粉量提高為2%，60～135日齡時桑葉粉桑添加量為3%，分別在15、27、45、60、75、90、105、120、135日齡隨機抽取各組30只試驗蛋雞的血清進行H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體檢測。

135日齡時在400只添加桑葉粉免疫組中選擇體重相近、健康的商品蛋雞270只，隨機分成3個處理組；在400只不添加桑葉粉免疫組中挑選體重相近、健康的商品蛋雞90只作為對照組；3個處理組桑葉粉添加量分別為3%、5%、7%，3個處理組和對照組都設置3個重復，每個重復30只。136～150日齡為預試期，分別在150日齡、170日齡、195日齡、225日齡、255日齡、270日齡、285日齡、300日齡、320日齡、340日齡、355日齡、370日齡、385日齡、400日齡、415日齡、430日齡、450日齡、465日齡、490日齡隨機抽取各組30只蛋雞的血清進行H5亞型禽流感和新城疫免疫抗體檢測。

1.3 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用 SPSS18的單一ANOVA分析方法進行，多重比較采用 Dun-CAN方法，顯著水平取 P＜0.05，極顯著水平取P＜0.01。

2 結果與分析

2.1 日糧中添加不同比例桑葉粉對禽流感免疫效果的影響

從表1可以看出，15日齡時各組H5亞型禽流感母源抗體水平無顯著差異（P>0.05），27日齡時各組母源抗體水平皆降為0。35日齡時對各組進行重組禽流感病毒滅活疫苗（H5N1亞型）免疫，到45日齡時添加桑葉粉免疫組和不添加桑葉粉免疫組均可檢測到免疫抗體，其差異不顯著；到75日齡時H5亞型禽流感免疫抗體滴度都達峰值10log2；添加桑葉粉組與不添加桑葉粉組抗體滴度差異不顯著（P>0.05）。

表1 不同處理組對禽流感免疫效果的影響

表2 不同處理組對禽流感免疫效果的影響

從表2可以看出，各組禽流感免疫抗體水平隨免疫時間的延長都逐漸下降，到300日齡時都同時降到最低，以后抗體滴度又逐漸回升，到370日齡時平均免疫抗體水平都可達到7 log2以上，以后又同時逐漸下降。對照組與各處理組，以及各處理組之間在相同日齡時免疫抗體差異不顯著（P>0.05）。

2.2 日糧中添加不同比例桑葉粉對新城疫免疫效果的影響

從表3可以看出，添加桑葉粉免疫組和不添加桑葉粉免疫組都同時在5日齡和10日齡分別免疫了浩和利和浩倍欣后，到15日齡時測得兩組新城疫平均免疫抗體水平差異不顯著（P>0.05）；從27～135日齡兩組同時間免疫了4次雞新城疫聯(lián)苗，同日齡新城疫免疫抗體監(jiān)測結果也均無顯著差異（P>0.05）。

表3 不同處理組對新城疫免疫效果的影響

表4 不同處理組對新城疫免疫效果的影響

從表4可以看出，285日齡，3%處理組抗體滴度極顯著高于7%處理組（P<0.01），對照組、5%處理組抗體滴度顯著高于7%處理組（P<0.05），300日齡、415日齡，對照組、3%處理組、5%處理組顯著高于7%處理組（P<0.05），其他各日齡，各組之間的差異不顯著（P>0.05）。

3 討論與結論

從表1和表2可以看出，添加不同比例桑葉粉飼喂蛋雞，對禽流感免疫效果無顯著影響（P＞0.05）。從表3和表4可以看出，在大多數(shù)日齡各組對新城疫免疫效果無顯著影響，但是在部分日齡，特別是在新城疫抗體滴度下降的日齡，7%處理組顯著低于其他各組，可能原因是桑葉粉中抗營養(yǎng)因子影響了蛋雞的正常生理功能，從而影響抗體的生成。因此，總的來說，在蛋雞日糧中添加桑葉粉對禽流感和新城疫免疫效果均無顯著影響。