趙新明

（河北省張家口市動物衛(wèi)生監(jiān)督所075000）

點眼接種新城疫苗對柴雞免疫效果影響

趙新明

（河北省張家口市動物衛(wèi)生監(jiān)督所075000）

目前，非典型新城疫是危害養(yǎng)禽業(yè)嚴重的疾病之一，此類病是由新城疫病毒引起的病毒性疾病，只能進行預(yù)防，臨床上沒有專門的藥物給予很好的治療。預(yù)防新城疫的疫苗種類繁多，免疫方法多樣，免疫劑量越用越大，但該病還是頻發(fā)，給養(yǎng)殖戶造成很大的損失。點眼接種雖然費工費時，但免疫效果確切，不存在漏免情況?，F(xiàn)就不同劑量新城疫LaSota苗點眼免疫對柴雞免疫效果做一分析，以確定最適合的免疫劑量，在生產(chǎn)上推廣應(yīng)用。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1日齡柴雞雛雞600只，購于河北北方學(xué)院柴雞養(yǎng)殖基地；雞新城疫低毒力活疫苗 （LaSota株，至少106.0EID50/羽份)，購于瑞普生物制品廠。

1.2 試驗處理

將全部試驗雞隨機各平均分成4組，每組150只，每組3個重復(fù)，每個重復(fù)50只。自由采食、自由飲水，35日齡前按常規(guī)飼養(yǎng)管理程序、免疫程序進行，35日齡進行ND-La弱毒活疫苗免疫，試驗1、2、3、4組分別用2、3、4、5倍量點眼免疫。具體免疫方法是將1000羽份疫苗分別用60～80ml不同比例的專用稀釋液稀釋，制成2、3、4、5倍量液體，每只雞滴眼1滴。

1.3 測定指標

1.3.1 血清抗體滴度 (Hl)測定

分別在免疫前和免疫后1周、2周、3周、4周在不同免疫途徑的各分組隨機挑起5只雞，稱重，經(jīng)頸動脈采血，制備血清，采用微量血凝集抑制試驗 (HI)檢測ND抗體滴度，結(jié)果以Nlog2表示。

1.3.2 免疫器官指數(shù)測定

上述采血完畢，采集脾臟、胸腺、法氏囊3種免疫器官，稱取濕重，按公式：脾臟 （胸腺或法氏囊)指數(shù)=脾臟 （胸腺或法氏囊)濕重 (g)/雞活體重 (kg)，計算免疫器官指數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

所有試驗數(shù)據(jù)均用Excell表和Spss19.0統(tǒng)計軟件進行分析。

2 結(jié)果

2.1 點眼免疫對HI抗體滴度的影響變化規(guī)律

點眼免疫HI抗體滴度的變化規(guī)律見圖1。

圖1 點眼免疫后新城疫HI效價變化規(guī)律

圖2 點眼免疫后胸腺指數(shù)變化曲線

圖3 點眼免疫后法氏囊指數(shù)變化曲線

圖4 點眼免疫后脾臟指數(shù)變化曲線

由圖1直觀看出，HI效價1周后3倍量組高于其他組，在免疫后1周測定新城疫HI效價最高，達到8log2，與其他各組差異顯著 (P＜0.05)； 免疫 3周測定2、4、5倍量組抗體水平降到保護零界值4log2以下，形成了免疫空白期，很容易感染NDV，保護率明顯降低，現(xiàn)在普遍認為抗體水平在6log2以上時，才具有很好的保護率。在免疫4周測定4倍量組新城疫HI效價降到最低?？梢钥闯觯煌瑒┝康狞c眼免疫劑量新城疫HI效價的消長規(guī)律并不相同。從抗體滴度來看，3倍量組優(yōu)于其他各組。

2.2 點眼免疫對免疫器官指數(shù)的影響

點眼免疫對胸腺指數(shù)的影響見圖2。

由圖2可知，點眼免疫后，胸腺免疫指數(shù)各劑量組在2周時上升達到高峰，在3周時整體有所下降，4周時又開始上升，且上升高度高于2周，3倍量組最高達4.75±0.08g/kg，其次是5倍量組為4.62±0.03g/kg。在免疫后 1周不同劑量組之間，2倍量組與5倍量組差異不顯著；3倍量組最高，與各組間差異極顯著；4倍量組胸腺指數(shù)最低。

點眼免疫對法氏囊官指數(shù)的影響見圖3。

由圖3法氏囊免疫指數(shù)變化曲線可以看出，點眼免疫1周后法氏囊指數(shù)3倍量組最高，與2倍量組差異不顯著，與4和5倍量組差異極顯著；2周后開始下降，3倍量組下降較緩慢，4倍量組在3周略有波動，且各組間存在極顯著差異 （P＜0.01)。

點眼免疫對脾臟指數(shù)的影響見圖4。

由圖4可見，脾臟指數(shù)在點眼免疫后2周上升達到最高峰，3、4、5倍量組最高超過4g/kg，2倍量最低，為2.49±0.05g/kg，與其他組間存在極顯著差異（P＜0.01)。2周之后開始下降，下降幅度較快，4周時3倍量組略高于其他各組，且差異極顯著 （P＜0.01)。

3 分析與討論

點眼免疫主要通過特異性黏膜免疫系統(tǒng)來完成，即黏膜結(jié)合淋巴組織（眼結(jié)膜、腸道黏膜和生殖道黏膜)誘導(dǎo)產(chǎn)生分泌型IgA，并通過淋巴和血液循環(huán)到達全身黏膜組織發(fā)揮免疫效應(yīng)。本試驗通過對35日齡雛雞血清中的抗體監(jiān)測表明，La Sota弱毒苗點眼免疫，3倍量組雞體產(chǎn)生抗體水平最高，免疫后1周抗體滴度就上升到最高水平。

胸腺和法氏囊是禽類中樞免疫器官，胸腺參與細胞免疫，法氏囊早期是B細胞發(fā)育的主要場所，參與體液免疫；脾臟是外周免疫器官，是T、B細胞定居繁殖的場所，提供特異性細胞免疫和體液免疫力。胸腺、法氏囊和脾臟免疫器官指數(shù)，反映免疫力的強弱。點眼接種LaSota苗后2周，免疫器官指數(shù)達到高峰，以后下降速度放緩，維持時間較長，3倍量點眼免疫免疫器官指數(shù)最高。因此，La Sota弱毒苗點眼免疫以3倍量為最優(yōu)。